【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药及微生物，尤其涉及一种植物源乳酸菌729及其应用。
技术介绍
1、结直肠癌是全世界常见的癌症之一，目前临床上多采用外科手术切除病灶的方式治疗；但由于其术后复发率高、并发症频发，临床治疗的效果并不理想。因此，随着分子生物学的快速发展，希望从中寻求治疗结肠癌的新材料和新方法。其中，人结肠癌细胞hct116是研究抗结肠癌最常用的细胞模型。
2、乳酸菌作为肠道中的正常菌群，常作为发酵剂或益生成分添加到食品中。乳酸菌能够改善肠道环境，抑制有害微生物的繁殖及修复对胃肠道的损伤，有大量试验证明乳酸菌胞外多糖、热灭活菌体细胞和细胞壁中肽聚糖成分对结肠癌细胞有明显的抑制作用。近年来，乳酸菌作为抗肿瘤特别是抗结肠癌的热门材料，具有生产成本较低，提取难度较小，产品安全性高的优势，备受肿瘤研究者关注。tuoyf等人报道了副干酪乳杆菌m5的细胞壁可促进il-12、ifn-γ、tnf-α的释放，细胞壁中的肽聚糖和脂磷壁酸等成分可以有效抑制结肠癌细胞的生长，并诱导其凋亡(study of probiotic potential of four wildlactobacillus rhamnosus strains[j].anaerobe，2013，21:22-27)。目前已有大量研究证明动物源乳酸菌具有抑制结肠癌的作用，但鲜有关于植物源乳酸菌抗结肠癌功效的报道。本专利技术采用cck-8法、caspase3酶活性检测法、细胞流式术和western blot法研究了热灭活植物源乳酸菌对人结肠癌细胞hct116的抑制功效和机制，为
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种植物源乳酸菌729及其应用，研究热灭活植物源乳酸菌对人结肠癌细胞hct116的抑制功效和机制，为植物源乳酸菌在防治结肠癌领域的应用提供依据。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一株植物源乳酸菌729，所述植物源乳酸菌729为植物乳杆菌(lactobacillusplantarum)；保藏编号为cgmcc no：25610。
4、优选地，所述植物源乳酸菌16srdna序列如seq id no：3所示。
5、本专利技术还提供了一种植物源乳酸菌729在制备抗炎、抗氧化和/或抑制人结肠癌产品中的应用，所述产品包括微生物制剂、药物或食品。
6、优选地，所述抗炎包括抑制细胞释放促炎因子，所述抗氧化包括降低细胞内活性氧(ros)水平；所述抗炎因子包括il-6、il-1β、tnf-α。
7、本专利技术还提供了一种植物源乳酸菌729在制备抑制李斯特菌和/或大肠杆菌和/或金黄色葡萄球菌产品中的应用，所述产品包括微生物制剂、药物或食品。
8、优选地，所述植物源乳酸菌729为热灭活植物源乳酸菌729菌悬液。
9、优选地，所述植物源乳酸菌729菌悬液的浓度为2×104～8×104cfu/ml。
10、本专利技术进一步提供了热灭活植物源乳酸菌729菌悬液的制备方法，包括如下步骤：
11、(1)将菌种活化三代后进行热灭活；
12、(2)将步骤(1)得到的灭活菌株离心机离心并去除上清液，用水洗去培养基残留后使用促生长培养基稀释。
13、优选地，步骤(1)所述菌种活化温度为34～40℃；步骤(1)所述热灭活条件为80～100℃，20～40min；步骤(2)所述离心转速为11000～13000r；所述离心时间为10～20min。
14、优选地，步骤(2)所述促生长培养基的配方包括：无机盐、氨基酸、维生素和碳源。
15、优选地，所述无机盐包括终浓度的二水合氯化钙132.420～132.440mg/l、无水硫酸镁97.710～97.730mg/l、氯化钾300.000～500.000mg/l、氯化钠6450.000～6470.000mg/l、无水磷酸钠504.340～504.360mg/l；
16、所述氨基酸包括终浓度的甘氨酸7.500～7.520mg/l、l-丙氨酸13.350～13.370mg/l、l-精氨酸盐酸盐42.130～42.150mg/l、l-天冬酰胺，无水45.020～45.040mg/l、l-天冬氨酸19.960～19.980mg/l、l-半胱氨酸盐酸盐31.400～31.600mg/l、l-谷氨酸22.060～22.080mg/l、l-谷氨酰胺219.100～219.300mg/l、l-组氨酸盐酸盐20.950～20.970mg/l、l-羟脯氨酸19.660～19.680mg/l、l-异亮氨酸39.350～39.370mg/l、l-亮氨酸39.350～39.370mg/l、l-赖氨酸盐酸盐36.530～36.350mg/l、l-蛋氨酸14.910～14.930mg/l、l-苯丙氨酸16.510～16.530mg/l、l-脯氨酸17.260～17.280mg/l、l-丝氨酸26.270～26.290mg/l、l-苏氨酸17.860～17.880mg/l、l-色氨酸3.050～3.070mg/l、l-酪氨酸二钠盐26.000～26.200mg/l、l-缬氨酸17.560～17.580mg/l；
17、优选地，所述维生素包括终浓度的抗坏血酸0.5622～0.5628mg/l、生物素0.100～0.300mg/l、氯化胆碱2.000～8.000mg/l、d-钙泛酸酯0.100～0.300mg/l、叶酸5.000～15.000mg/l、烟酸0.200～0.800mg/l、烟酰胺0.200～0.800mg/l、盐酸吡哆醛0.200～0.800mg/l、盐酸吡哆醇0.200～0.800mg/l核黄素0.100～0.300mg/l、盐酸硫胺素0.100～0.300mg/l、维生素b121.000～3.000mg/l、i-肌醇33.000～39.000mg/l、对氨基苯甲酸0.500～1.500mg/l；
18、所述碳源包括终浓度的d-葡萄糖2000.000～4000.000mg/l、还原式谷胱甘肽0.200～0.800mg/l、动物组织的消化物500.000～700.000mg/l、酚红钠盐10.000～12.000mg/l、碳酸氢钠2100.000～2300.000mg/l。
19、与现有技术相比，本专利技术具有如下技术效果：
20、本专利技术记载的植物源乳酸菌729对人结肠癌细胞hct116的抑制作用显著强于益生菌lgg；通过caspase3酶活性检测试验，得到729菌株最佳抑制结肠癌细胞hct116的作用浓度为1×108cfu/ml；
21、本专利技术记载的热灭活植物源乳酸菌729菌株可以通过阻滞细胞周期，诱导细胞凋亡来抑制结肠癌细胞hct116的增殖，且在铁死亡抑制剂处理时，加菌组凋亡细胞比例显著降低，证明729菌株的抑制作用与诱导hct116细胞铁死亡有关；
22、本专利技术记载本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株植物源乳酸菌729，其特征在于，所述植物源乳酸菌729为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)；保藏编号为CGMCC NO：25610。
2.根据权利要求1所述的一株植物源乳酸菌729，其特征在于，所述植物源乳酸菌16SrDNA序列如SEQ ID NO：3所示。
3.权利要求1或2所述的植物源乳酸菌729在制备抗炎、抗氧化和/或抑制人结肠癌产品中的应用，所述产品包括微生物制剂、药物或食品。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗炎包括抑制细胞释放促炎因子，所述抗氧化包括降低细胞内活性氧水平；所述促炎因子包括IL-6、IL-1β、TNF-α。
5.权利要求1或2所述的植物源乳酸菌729在制备抑制李斯特菌和/或大肠杆菌和/或金黄色葡萄球菌产品中的应用，所述产品包括微生物制剂、药物或食品。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述植物源乳酸菌729为热灭活植物源乳酸菌729菌悬液；所述热灭活植物源乳酸菌729菌悬液的浓度为2×104～8×104CFU/mL。
7.根据权利
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述菌种活化温度为34～40℃；步骤(1)所述热灭活条件为80～100℃，20～40min；步骤(2)所述离心转速为11000～13000r；所述离心时间为10～20min。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，步骤(2)所述促生长培养基的配方包括：无机盐、氨基酸、维生素和碳源。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述无机盐包括终浓度的二水合氯化钙132.420～132.440Mg/L、无水硫酸镁97.710～97.730Mg/L、氯化钾300.000～500.000Mg/L、氯化钠6450.000～6470.000Mg/L、无水磷酸钠504.340～504.360Mg/L；
...【技术特征摘要】
1.一株植物源乳酸菌729，其特征在于，所述植物源乳酸菌729为植物乳杆菌(lactobacillusplantarum)；保藏编号为cgmcc no：25610。
2.根据权利要求1所述的一株植物源乳酸菌729，其特征在于，所述植物源乳酸菌16srdna序列如seq id no：3所示。
3.权利要求1或2所述的植物源乳酸菌729在制备抗炎、抗氧化和/或抑制人结肠癌产品中的应用，所述产品包括微生物制剂、药物或食品。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗炎包括抑制细胞释放促炎因子，所述抗氧化包括降低细胞内活性氧水平；所述促炎因子包括il-6、il-1β、tnf-α。
5.权利要求1或2所述的植物源乳酸菌729在制备抑制李斯特菌和/或大肠杆菌和/或金黄色葡萄球菌产品中的应用，所述产品包括微生物制剂、药物或食品。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述植物源乳酸菌729为热灭活植物源乳酸菌729菌...
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