【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物培养领域，涉及邓恩桉无性繁殖育苗方法，尤其涉及邓恩桉的组培快繁方法。
技术介绍
1、邓恩桉，澳大利亚俗名邓恩白桉（dunn’s white gun），为桃金娘科桉树属树种，其拉丁学名为eucalyptus dunnii。邓恩桉天然分布于澳大利亚东北部海岸及沿海地区的热带雨林和昆士兰州东南部，是一种自然分布区狭窄的高大乔木，一般树高可达40~50m。邓恩桉是少有的夏雨型、速生丰产、耐寒力强的树种。该树种生长速度快，产量高，材质好，抗逆性强，尤其是具有较强的耐寒能力。据测定，人工栽培的邓恩桉10年龄的木材基本密度为500kg/m3左右，天然生长的邓恩桉大径材木材基本密度达800kg/m3左右，且木材纹理直，心材淡白色。其木材用途广，既适宜作为纸浆纤维原料材，也可作旋切板材和锯材。
2、但由于邓恩桉是异花授粉树种，用种子繁殖，个体分化大，因此在丰产林营造中，易造成速生不丰产；再加上邓恩桉结实差，种子产量低，种子价格昂贵，更限制了该树种的推广和应用。采用组培方法是探索邓恩桉快速无性繁殖的主要途径，国内外对邓恩桉树种的组培研究虽然一直在进行，但普遍无法克服邓恩桉组织培养生根难的不足。管朝旭等(2012)以低盐dcr基本培养基，并附加了 abt1促根剂，获得了84 .7％的生根率；而林彦(2004 )采用了培养基中仅含iba的一步、两步及液体等多种传统配方生根法，邓恩桉组培生根率仅为54 .3％-62 .3％。邓恩桉生根难严重制约了邓恩桉组培苗工厂化生产的发展。
技术实现思路
1、本专利技术为了克服上述现有技术不足，提供一种能有效保留邓恩桉优良种质，提高组培生根率和移栽成活率的邓恩桉的组培快繁方法。
2、本专利技术采用的技术方案如下：
3、一种邓恩桉的组培快繁方法，选择无病虫害的邓恩桉优良单株进行环割促萌，当萌芽条长至1.5~2.0m时，剪取木质化枝条进行嫁接，当嫁接茎段萌芽条长至20～25cm时，剪取半木质化茎段获取外植体并进行外植体消毒处理，按顺序依次进行诱导培养、继代培养和生根培养，最后将生根完全、苗高4-6cm的生根瓶苗洗净培养基并移栽至装有基质的营养杯内；
4、主要步骤包括：
5、（1）环割促萌
6、选择无病虫害的邓恩桉优良单株，铲除周围杂灌，于环割前一天喷洒1%高锰酸钾消毒，在离地20cm处环割树周长3/4，宽度3cm，刮尽形成层至韧皮部，喷洒促萌营养液至韧皮部，环割后第五天、第十天在树干周围喷洒75%酒精消毒；
7、（2）萌芽条嫁接
8、当萌芽条长至1.5~2.0m时，剪取木质化枝条进行嫁接；嫁接前，用100ppm萘乙酸(naa)浸泡处理枝条1h；
9、（3）外植体消毒
10、当嫁接茎段萌芽条长至20～25cm时，剪取半木质化茎段，用洗衣粉溶液洗涤5min，再用自来水冲洗5min；带至超净工作台，切成2～3cm、1～2个潜伏芽的小段放入无菌瓶，75%酒精浸泡20s，无菌水清洗3次，体积浓度2%次氯酸钠浸泡1min，无菌水清洗3次；
11、（4）诱导培养
12、用灭菌滤纸吸干步骤（3）处理后的小段表面水分，切除小段两端，接种至诱导培养基，在温度25±2℃，光照12h/d，光照强度1500-2000lux条件下培养20-25天；
13、（5）继代培养
14、切取步骤（4）获得的无菌芽转入继代培养基，在温度25±2℃，光照12h/d，光照强度1500-2000lux条件下培养20-25天；
15、（6）生根培养
16、当经步骤（5）培育获得的芽苗长至3-4cm，切取芽苗转入生根培养基，在温度25±2℃，光照12h/d，光照强度1500-2000lux条件下培养20-25天；
17、（7）移栽
18、将生根完全、苗高4-6cm的生根瓶苗洗净培养基并移栽至装有基质的营养杯内，淋透基质，覆盖薄膜保湿并盖上遮荫网，可用基托布津800～1 000倍液或多菌灵500～600倍液交替使用，每5～7 d喷施一次防治根腐病；10天后打开遮荫网和薄膜，每10天喷洒一次叶面营养液。
19、优选的，以上步骤（2）所述的嫁接的方法为：
20、嫁接时间：春季、晴天；
21、砧木选择：高25～35cm，杆径2.5～5mm，邓恩桉，于离地高10cm进行嫁接；
22、穗条选择：长20～22cm，杆径2.5～5mm，带4～8个腋芽、木质化邓恩桉枝条；
23、嫁接前用医用封口膜包缠穗条，嫁接时将穗条两面削成“v”状,从砧木嫁接位置中间切一条2～3cm长的切口，将穗条插入砧木，用封口膜包扎；
24、将嫁接苗移入温室大棚，保持大棚湿度80%,温度26±2℃，当新叶到成熟叶大小一半时，移至透光度为50%的遮阴网下培育，当新叶到成熟叶片大小时，全光照培育。
25、优选的，以上步骤（1）所述促萌营养液原料组分为：1l促萌营养液含180mgkno3、36mgnh4no3、27mgkh2po4、20mgcacl2、36mgmgso4、0.1-0.2mgn6苄基腺嘌呤(6-ba)、0.1-0.2mg萘乙酸(naa)。
26、优选的，以上步骤（4）所述诱导培养基原料组分为：1l诱导培养基含1800mgkno3、360mgnh4no3、270mgkh2po4、200mgcacl2、360mgmgso4、10mgh3bo3、25mgmnso4、10mgznso4、0.25mgna2moo4、0.025mgcuso4、0.025mgcocl2、0.83mgki、1000mgpvp、0.24mg生物素(vh)、100mgl-半胱氨酸、2.4mgd-泛酸钙(vb5)、2mg甘氨酸、5mg烟酸(vb3)、2mg硫胺素(vb1)、0.5mg吡哆素(vb6)、37.3mg na2-edta、27.8mg feso4、100mg肌醇、0.3-0.5mgn6苄基腺嘌呤(6-ba)、0.1-0.2mg萘乙酸(naa)、0.2-0.3mg激动素(kt)、30g蔗糖、5g琼脂粉、ph值5.8~6。在诱导培养基中尤其增加激动素，能有效促进邓恩桉芽的萌动。
27、优选的，以上步骤（5）所述继代培养基原料组分为：1l继代培养基含1800mgkno3、360mgnh4no3、270mgkh2po4、200mgcacl2、360mgmgso4、10mgh3bo3、25mgmnso4、10mgznso4、0.25mgna2moo4、0.025mgcuso4、0.025mgcocl2、0.83mgki、0.24mg生物素(vh)、100mgl-半胱氨酸、2.4mgd-泛酸钙(vb5)、2mg甘氨酸、5mg烟酸(vb3)、2mg硫胺素(vb1)、0.5mg吡哆素(vb6)、37.3mg na2-edta、27.8mg feso4、100mg肌醇、0.4-0.6mgn6苄基腺嘌呤(6-b本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：选择无病虫害的邓恩桉优良单株进行环割促萌，当萌芽条长至1.5~2.0m时，剪取木质化枝条进行嫁接，当嫁接茎段萌芽条长至20～25cm时，剪取半木质化茎段获取外植体并进行外植体消毒处理，按顺序依次进行诱导培养、继代培养和生根培养，最后将生根完全、苗高4-6cm的生根瓶苗洗净培养基并移栽至装有基质的营养杯内；
2.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（2）所述的嫁接的方法为：
3.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（1）所述促萌营养液原料组分为：1L促萌营养液含180mgKNO3、36mgNH4NO3、27mgKH2PO4、20mgCaCl2、36mgMgSO4、0.1-0.2mgN6苄基腺嘌呤、0.1-0.2mg萘乙酸。
4.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（4）所述诱导培养基原料组分为：1L诱导培养基含1800mgKNO3、360mgNH4NO3、270mgKH2PO4、200mgCaCl2、360mgMgSO4、10m
5.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（5）所述继代培养基原料组分为：1L继代培养基含1800mgKNO3、360mgNH4NO3、270mgKH2PO4、200mgCaCl2、360mgMgSO4、10mgH3BO3、25mgMnSO4、10mgZnSO4、0.25 mgNa2MoO4、0.025mgCuSO4、0.025mgCoCl2、0.83mgKI、0.24mg生物素、100mgL-半胱氨酸、2.4mgD-泛酸钙、2mg甘氨酸、5mg烟酸、2mg硫胺素、0.5mg吡哆素、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4、100mg肌醇、0.4-0.6mgN6苄基腺嘌呤、0.2-0.3mg萘乙酸、0.1-0.2mg激动素、30g蔗糖、5g琼脂粉、PH值5.8~6。
6.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（6）所述生根培养基原料组分为：1L生根培养基含600mgKNO3、120mgNH4NO3、90mgKH2PO4、66mgCaCl2、120mgMgSO4、6.2mgH3BO3、25mgMnSO4、10mgZnSO4、0.25 mgNa2MoO4、0.025mgCuSO4、0.025mgCoCl2、0.83mgKI、0.24mg生物素、100mgL-半胱氨酸、2.4mgD-泛酸钙、2mg甘氨酸、5mg烟酸、2mg硫胺素、0.5mg吡哆素、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4、100mg肌醇、0.4-0.6mg吲哚丁酸、0.1-0.2mg萘乙酸、0.5-0.8mg多效唑、30g蔗糖、5g琼脂粉、5g活性炭、PH值5.8~6。
7.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（7）所述的基质为黄心土：用95％黄心土+ 5％的过磷酸钙混合均匀制成或由椰糠：炭化谷壳：泥炭土：黄心土按重量比为5：2.5：2：0.5混合，加入钙镁磷肥4 kg/m3混匀，盖上薄膜堆沤一个月制成的轻型基质；
8.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（1）所述邓恩桉优良单株为邓恩桉GED9502品种。
...【技术特征摘要】
1.一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：选择无病虫害的邓恩桉优良单株进行环割促萌，当萌芽条长至1.5~2.0m时，剪取木质化枝条进行嫁接，当嫁接茎段萌芽条长至20～25cm时，剪取半木质化茎段获取外植体并进行外植体消毒处理，按顺序依次进行诱导培养、继代培养和生根培养，最后将生根完全、苗高4-6cm的生根瓶苗洗净培养基并移栽至装有基质的营养杯内；
2.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（2）所述的嫁接的方法为：
3.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（1）所述促萌营养液原料组分为：1l促萌营养液含180mgkno3、36mgnh4no3、27mgkh2po4、20mgcacl2、36mgmgso4、0.1-0.2mgn6苄基腺嘌呤、0.1-0.2mg萘乙酸。
4.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（4）所述诱导培养基原料组分为：1l诱导培养基含1800mgkno3、360mgnh4no3、270mgkh2po4、200mgcacl2、360mgmgso4、10mgh3bo3、25mgmnso4、10mgznso4、0.25 mgna2moo4、0.025mgcuso4、0.025mgcocl2、0.83mgki、1000mgpvp、0.24mg生物素、100mgl-半胱氨酸、2.4mgd-泛酸钙、2mg甘氨酸、5mg烟酸、2mg硫胺素、0.5mg吡哆素、37.3mg na2-edta、27.8mg feso4、100mg肌醇、0.3-0.5mgn6苄基腺嘌呤、0.1-0.2mg萘乙酸、0.2-0.3mg激动素、30g蔗糖、5g琼脂粉、ph值5.8~6。
5.根据权利要求1所述的一种邓恩桉的组培快繁方法，其特征在于：步骤（5）所述继代培养基原料组分为：1l继代培养基含1800mgkno3、360mgnh4no3、270mgkh2p...
【专利技术属性】
技术研发人员：邓紫宇，郭东强，唐庆兰，李昌荣，刘媛，卢翠香，任世奇，伍琪，朱慧，陈升侃，颜宁复，陈健波，韦振道，向旺，甘春雁，
申请(专利权)人：广西壮族自治区林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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