高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株及获得方法与应用技术

技术编号:41236812 阅读:21 留言:0更新日期:2024-05-09 23:50
本发明专利技术属于生物工程技术领域,尤其是涉及一种高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株及获得方法与应用。通过PCR将所需的基因BldD、metK、genC片段及pIB139双酶切片段扩增出来;通过一步克隆的方法构建基因过表达质粒,所述基因过表达质粒含有pIB139双酶切片段,且含有基因BldD、metK、genC中的两种或三种;将基因过表达质粒转入菌株中,得到高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株。与现有技术相比,本发明专利技术提供了一种在基因调控层面上提高庆大霉素效价的方法,而且为提升庆大霉素产量提供了新思路,新的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程,尤其是涉及一种高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株及获得方法与应用


技术介绍

1、棘孢小单孢菌是庆大霉素主要的生产菌,属于链霉菌属,其基因组dna中g+c百分含量高达71.4%-72.8%。棘孢小单孢菌菌落表面呈光滑或突出状,主要进行孢子生殖,其菌丝具有很细的分支结构。基丝一般为橘红色,少部分为褐色或紫褐色。

2、庆大霉素是具有热稳定性的广谱抗生素之一。庆大霉素是一种碱性物质,易溶于水,性质相对稳定,与硫酸结合可以形成硫酸庆大霉素供临床使用。庆大霉素的母体结构2-dos是通过一个糖苷键分别与加拉糖胺和绛红糖胺相连。由于绛红糖胺有不同的取代基和取代部位,其可以被分为四大族,a、b、x和c。

3、对于庆大霉素整个合成途径的完全剖析有助于对其进行分子层面的改造,进而提升庆大霉素的整体效价或者某一组分的效价。随着基因操作手段的发展,利用微生物代谢方面的研究来提升目标抗菌物质的产量成为研究重点。一方面,可以利用某些起决定作用的调节因子来调控抗生素的合成,这些因子所起到的作用主要集中在激活抗生素合成的基因簇或者改变本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.基因BldD、metK、genC中的两种或三种的组合在制备高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株中的应用,其特征在于,基因genC的序列如SEQ ID NO.1所示,基因metK的序列如SEQ ID NO.2所示,基因BldD的序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株,其特征在于,所述多基因过表达链霉菌工程菌株中含有基因BldD、metK、genC中的两种或三种,表达基因BldD、metK、genC中的两种或三种对应的酶,基因genC的序列如SEQ ID NO.1所示,基因metK的序列如SEQ IDNO.2所示,基因BldD...

【技术特征摘要】

1.基因bldd、metk、genc中的两种或三种的组合在制备高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株中的应用,其特征在于,基因genc的序列如seq id no.1所示,基因metk的序列如seq id no.2所示,基因bldd的序列如seq id no.3所示。

2.一种高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株,其特征在于,所述多基因过表达链霉菌工程菌株中含有基因bldd、metk、genc中的两种或三种,表达基因bldd、metk、genc中的两种或三种对应的酶,基因genc的序列如seq id no.1所示,基因metk的序列如seq idno.2所示,基因bldd的序列如seq id no.3所示。

3.根据权利要求2所述的一种高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株,其特征在于,所述多基因过表达链霉菌工程菌株中同时含有基因bldd、metk、genc。

4.权利要求2所述的高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株的获得方法,其特征在于,包括以下步骤:

5.根据权利要求4所述的高产庆大霉素的多基因过表达链霉菌工程菌株的获得方法,其特征在于,当所述高产庆大...

【专利技术属性】
技术研发人员:储炬吴洁田锡炜徐峰
申请(专利权)人:华东理工大学
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1