一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法技术

技术编号：41229712 阅读：4 留言：0更新日期：2024-05-09 23:46

本发明专利技术属于蛋白分离提纯技术领域，涉及一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法。步骤为：首先将谷朊粉溶于70％的乙醇溶液中，质量比为1:30，经磁力搅拌后，离心取上清液，并稀释得到稀释液，然后调节pH为6.2，进行搅拌，收集溶液上层会出现淡黄色粘性物质；并再次调节pH为6.2，持续搅拌收集淡黄色粘性物质；如此重复调节pH，直至搅拌过程中溶液上层不再出现淡黄色粘性物质，完成对醇溶蛋白的提取。本发明专利技术通过调整乙醇浓度、料液比及等电点沉淀法连续提纯小麦醇溶蛋白，在特定条件下，实现了醇溶蛋白的有效提取，提取纯度高达92％，取得了意想不到的技术效果；本发明专利技术具有广阔的应用前景，为小麦蛋白分离提纯工艺提供一种新的思路。

全部详细技术资料下载

【技术实现步骤摘要】

：本专利技术属于蛋白分离提纯，特别涉及一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法。

技术介绍

0、
技术介绍
：

1、小麦面筋蛋白，俗称谷朊粉，是小麦淀粉加工的副产物之一，约占总蛋白含量80％。根据谷朊蛋白在乙醇水溶液中的溶解性，谷朊蛋白分为小麦醇溶蛋白和麦谷蛋白。小麦醇溶蛋白为单链蛋白质，其分子量为28～55kda，呈球形，根据分子结构的不同，醇溶蛋白又可分为α、β、γ与ω型；其中，α-与β-醇溶蛋白含短n-区与c-终端区，重复单元为十二肽，α-醇溶蛋白含6个巯基丙氨酸残基，形成三个分子内二硫键，而γ-醇溶蛋白含有8个巯基丙氨酸残基，形成四个分子内二硫键，醇溶蛋白中，结构重复区域富含α-螺旋结构；而结构非重复区域则富含β-片层结构，因此醇溶蛋白球形三维结构形成的作用力主要是疏水键、氢键和分子内二硫键；其不溶于水和盐溶液，溶于60％～95％乙醇溶液，由于非极性氨基酸含量较多，在水合时胶粘性极大，抗延伸性小甚至没有，从而可能赋予面团粘性的主要原因。

2、目前，关于醇溶蛋白的分离方法也有不少相关文献报道；如酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术，广泛用于分离蛋白质，但是其同时面临费时、费力并且分辨率低的问题。还有文献报道利用乙醇水溶液作为提取溶剂提取玉米醇溶蛋白，虽简化了程序，但是提纯效果欠佳。因此，现有这些分离提纯方法中还不能很好的解决简化方法与提高提纯效果兼具的技术问题。

技术实现思路

0、
技术实现思路
：

1、本专利技术的目的

2、本专利技术的目的通过以下技术方案实现；

3、一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，包括如下步骤：

4、s1、首先将谷朊粉溶于70％的乙醇溶液中，控制质量比为1:30，经磁力搅拌一段时间后，离心取上清液(沉淀为麦谷蛋白)；

5、s2、取s1中得到的上清液进一步稀释得到稀释液，然后调节稀释液的ph为6.2；

6、s3、对于步骤s2中调节ph后的稀释液进行搅拌，搅拌过程中溶液上层会出现淡黄色粘性物质，收集淡黄色粘性物质；并再次调节ph为6.2，持续搅拌收集淡黄色粘性物质；如此重复调节ph，直至搅拌过程中溶液上层不再出现淡黄色粘性物质，完成对醇溶蛋白的提取。

7、纯度测定：将收集的麦谷蛋白和醇溶蛋白经冷冻干燥、研磨，测定醇溶蛋白纯度；所述冷冻干燥的时间为36h。

8、进一步地，步骤s1中所述磁力搅拌一段时间为2-3h。

9、进一步地，步骤s1中所述离心的速率为4000r/min，离心时间为10-15min。

10、进一步地，步骤s2中所述稀释的比例为1:2，稀释溶剂为水。

11、进一步地，步骤s2中所述调节稀释液ph所用的试剂为0.1mol/l hcl溶液。

12、进一步地，步骤s3中所述搅拌速率为200-300r/min。

13、进一步地，所述s3中再次调节ph的试剂为0.1mol/l naoh和0.1mol/l hcl。

14、与现有技术相比，本专利技术具有以下优点和有益效果：

15、本专利技术通过调整乙醇浓度、料液比及等电点沉淀法连续提纯小麦醇溶蛋白，在特定条件下，即控制乙醇浓度为70％、料液比为1:30以及ph为6.2，三种条件协同作用实现了醇溶蛋白的有效提取，不仅方法简单，而且醇溶蛋白的提取率高达92％，取得了意想不到的技术效果；本专利技术具有广阔的应用前景，为小麦蛋白分离提纯工艺提供一种新的思路。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：步骤S1中所述磁力搅拌一段时间为2-3h。

3.根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：步骤S1中所述离心的速率为4000r/min，离心时间为10-15min。

4.根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：步骤S2中所述稀释的比例为1:2，稀释溶剂为水。

5. 根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：步骤S2中所述调节稀释液pH所用的试剂为0.1mol/L HCl溶液。

6.根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：步骤S3中所述搅拌速率为200-300r/min。

7. 根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：所述S3中再次调节pH的试剂为0.1mol/L NaOH和0.1mol/L HCL。

【技术特征摘要】

1.一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：步骤s1中所述磁力搅拌一段时间为2-3h。

3.根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：步骤s1中所述离心的速率为4000r/min，离心时间为10-15min。

4.根据权利要求1所述的一种谷朊粉分离提纯醇溶蛋白的方法，其特征在于：步骤s2中所述稀释的比例为1:2，稀释...

【专利技术属性】
技术研发人员：李明菲，安迪，鲁玉杰，张晓伟，王凤贺，
申请(专利权)人：江苏科技大学，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载我是这个专利的主人