【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物分子检测，尤其涉及一种生物传感器及其构建方法。
技术介绍
1、表面增强拉曼散射(surface-enhancedraman scattering,sers)光谱是一种能够准确测定贵金属(金、银、铜等)粗糙表面或贵金属纳米颗粒表面样品结构信息的检测手段，由于其较高的灵敏度和特异性广泛应用于被广泛应用于食品安全、医学诊断、文物鉴定、石油化工等领域。由于生物分子的散射截面积较小，难以直接测定生物分子的拉曼光谱，通常采用能够特异性识别生物靶标分子的sers探针作为拉曼信号的输出单元，构建基于sers探针的生物传感器。虽然已有较多文献报道了基于sers探针构建的生物传感器，但是目前大多数传感器直接基于单一sers探针亮度来传感生物的含量，仍存在传感器灵敏度低的问题。
技术实现思路
1、本专利技术提供一种生物传感器及其构建方法，用以解决现有技术中的生物传感器基于单一sers探针亮度来传感靶标的含量，灵敏度低的缺陷，可以将包裹有染料的脂质体作为识别单元探针，采用银纳米线修饰的丝网印刷电极作为sers基底，结合三重信号放大策略，可以提高构建得到的生物传感器的灵敏度。
2、本专利技术提供一种生物传感器的构建方法，包括：
3、制备脂质膜，并通过超声波剥离的方式制备得到脂质体悬浮液，脂质体悬浮液中的脂质体包裹有染料；
4、对脂质体悬浮液进行透析，得到脂质体溶液；
5、在脂质体溶液中添加dna识别链，慢速孵育设定时间后，离心水洗得到脂质体探
6、采用银纳米线修饰丝网印刷电极；
7、在丝网印刷电极上形成dna发卡结构，在靶标存在时，通过发卡结构捕获脂质体探针，形成生物传感器。
8、根据本专利技术提供的生物传感器的构建方法，在丝网印刷电极上形成dna发卡结构，包括：
9、将dna捕获链进行退火处理，形成发卡，dna捕获链通过巯基修饰；
10、将发卡滴于丝网印刷电极，使用磷酸盐缓冲溶液对丝网印刷电极进行清洗，丝网印刷电极上形成发卡结构。
11、根据本专利技术提供的生物传感器的构建方法，通过发卡结构捕获脂质体探针，包括：
12、将脂质体探针、rna酶抑制剂以及目标mirna加入至丝网印刷电极，进行孵育；
13、丝网印刷电极上的发卡结构被目标mirna打开，发卡结构与脂质体探针发生碱基互补配对，丝网印刷电极上的发卡结构捕获脂质体探针。
14、根据本专利技术提供的生物传感器的构建方法，通过发卡结构捕获脂质体探针，之后还包括：
15、加入裂解剂，脂质体探针的脂质体膜在裂解剂的作用下被破坏；
16、脂质体探针的脂质体膜中包裹的染料被释放出来，与丝网印刷电极直接接触。
17、根据本专利技术提供的生物传感器的构建方法，通过发卡结构捕获脂质体探针，之后还包括：
18、对丝网印刷电极施加负电压，增强拉曼信号。
19、根据本专利技术提供的生物传感器的构建方法，染料为带有正电的有机分子，在负电压的吸引下，染料富集至丝网印刷电极。
20、根据本专利技术提供的生物传感器的构建方法，制备脂质膜，并通过超声波剥离的方式制备得到脂质体悬浮液，包括：
21、将大豆卵磷脂溶解于氯仿中，得到储备液；
22、对储备液进行真空旋蒸得到脂质膜；
23、向脂质膜中加入第二磷酸盐缓冲溶液，并进行加热和超声处理，得到脂质体悬浮液，其中第二磷酸盐缓冲溶液为包含有染料的磷酸盐缓冲溶液。
24、根据本专利技术提供的生物传感器的构建方法，对脂质体悬浮液进行透析，得到脂质体溶液，包括：
25、使用磷酸盐缓冲溶液对脂质体悬浮液进行若干次透析，得到脂质体溶液。
26、根据本专利技术提供的生物传感器的构建方法，dna识别链通过胆固醇进行修饰。
27、本专利技术还提供了一种生物传感器，应用上述任一种构建方法构建得到。
28、本申请的方案将薄膜水化法与超声波分散法相结合，通过常用的超声设备就能实现脂质体粒径的减小和均一化，无需借助脂质体挤出器等装置，即可制备得到粒径较为均一的脂质体，且具有良好的包封率和稳定性。该方案对设备要求较低，一般实验室均可制备，无需购置昂贵的挤出装置，降低了实验成本；本方案将循环放大、富集信号放大和电场增强信号放大相结合，发展了三重信号放大的传感器构建新方法，进一步提高了检测的灵敏度。
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1.生物传感器的构建方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述在所述丝网印刷电极上形成DNA发卡结构，包括：
3.根据权利要求1或2所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述通过所述发卡结构捕获所述脂质体探针，包括：
4.根据权利要求1所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述通过所述发卡结构捕获所述脂质体探针，之后还包括：
5.根据权利要求4所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述通过所述发卡结构捕获所述脂质体探针，之后还包括：
6.根据权利要求5所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述染料为带有正电的有机分子，在负电压的吸引下，所述染料富集至所述丝网印刷电极。
7.根据权利要求1所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述制备脂质膜，并通过超声波剥离的方式制备得到脂质体悬浮液，包括：
8.根据权利要求1所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述对所述脂质体悬浮液进行透析，得到脂质体溶液，包括：
9.根据权利要求1所述的生物
10.生物传感器，其特征在于，应用权利要求1-9任一项所述的构建方法构建得到。
...【技术特征摘要】
1.生物传感器的构建方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述在所述丝网印刷电极上形成dna发卡结构，包括：
3.根据权利要求1或2所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述通过所述发卡结构捕获所述脂质体探针，包括：
4.根据权利要求1所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述通过所述发卡结构捕获所述脂质体探针，之后还包括：
5.根据权利要求4所述的生物传感器的构建方法，其特征在于，所述通过所述发卡结构捕获所述脂质体探针，之后还包括：
6.根据权利要求5所述的生...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘会俏，曹康哲，付金金，张家坤，王思甜，马佳慧，
申请(专利权)人：信阳师范学院，
类型：发明
国别省市：
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