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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物,尤其涉及一种乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05及其应用。
技术介绍
1、食源性疾病是我国较为严重的公共卫生问题之一,微生物病原是其主要诱因,而细菌又为微生物病原的主要部分。细菌性微生物是我国食源性疾病发生的主要病因,严重危及人们的健康,造成重大经济损失,成为目前较为突出的公共卫生问题之一。金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)是一种常见的革兰氏阳性食源性致病菌,因具有较厚的细胞壁,使其对抗生素和环境压力具有较高耐受性,广泛存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌是人类和动物中常见的病原菌之一,其产生的多种外毒素,如肠毒素和副溶血素等,可以引起食物中毒和其他疾病。据统计,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,目前,金黄色葡萄球菌已成为仅次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。
2、抗菌肽(amps)作为有前景的抗多重耐药菌的生物材料已展现出前所未有的优势。与干扰病原微生物代谢过程的抗生素不同的是,抗菌肽通常通过物理破坏微生物细胞膜脂质和诱导细胞内容物泄漏来产生抗微生物作用,因此它们对细菌耐药性进化概率的影响很小。目前,由于其强大的抗菌潜力和独特的作用机制,抗菌肽被认为是抗生素的理想替代品。
3、本研究通过乙酰短杆菌发酵液发现了一种新型抗菌肽sk05,对金黄色葡萄球菌表现出很强的抑菌活性,并对其抑菌机理进行了进一步研究,为食源性致病微生物的防治提供新的解决方案。
技术实现思路
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2、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之一是:提供一种乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05。其氨基酸序列为ksadtlwgiqk,如seq id no:1所示。
3、所述抗菌肽的分子量为1246.679道尔顿,含有α螺旋,所带正电荷为+1,总疏水性比为36%。
4、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之二是:提供一种乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05在制备抗菌药物中的应用,该抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
5、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之三是:提供一种抗菌药物,其有效成分包括乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05,所述抗菌肽sk05的氨基酸序列为seqid no:1。
6、在本专利技术一较佳实施例中,所述抗菌药物的有效成分为乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05,所述抗菌肽sk05的氨基酸序列为seq id no:1。
7、在本专利技术一较佳实施例中,所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
8、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之四是:提供一种饲料添加剂,其有效成分包括乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05,所述抗菌肽sk05的氨基酸序列为seq id no:1。
9、在本专利技术一较佳实施例中,所述饲料添加剂的有效成分为乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05,所述抗菌肽sk05的氨基酸序列为seq id no:1。
10、在本专利技术一较佳实施例中,所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
11、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之五是:提供一种食品防腐剂,其有效成分为乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05,所述抗菌肽sk05的氨基酸序列为seqid no:1。
12、在本专利技术一较佳实施例中,所述食品防腐剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
13、抗菌肽sk05作用于细胞膜使其发生变形和萎缩,增强细胞膜通透性,对细菌细胞膜产生破坏,使肽能够穿过细菌细胞膜,与细菌dna结合,抑制dna的复制合成等功能,从而达到使细菌失活的作用。
14、本专利技术的抗菌肽可以采用本领域技术人员已知的方法合成,例如固相合成,并采用本领域技术人员已知的方法进行纯化,例如高效液相色谱法。
15、实施本专利技术,具有如下有益效果:
16、本专利技术对乙酰短杆菌发酵液进行质谱鉴定,根据质谱鉴定结果,利用apd3、pymol2.0等软件及i-tasser在线网站(https://zhanggroup.org/i-tasser/)以质谱鉴定所得肽段为对象进行生物信息学预测,得到一个新的氨基酸序列的多肽sk05。研究sk05对金黄色葡萄球菌的抑菌活性;并利用碘化丙啶染色分析、核酸蛋白质泄漏实验、透射电镜等实验观察sk05对细菌细胞膜的破坏程度;同时提取金黄色葡萄球菌的基因组dna,通过dna凝胶电泳实验验证其对细菌dna的影响作用。实验结果表明,该抗菌肽sk05对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种乙酰短杆菌L-乳酸脱氢酶A链蛋白抗菌肽SK05,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.如权利要求1所述的乙酰短杆菌L-乳酸脱氢酶A链蛋白抗菌肽SK05在制备抗菌药物中的应用,其特征在于:所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
3.一种抗菌药物,其特征在于:其有效成分包括乙酰短杆菌L-乳酸脱氢酶A链蛋白抗菌肽SK05,所述抗菌肽SK05的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。
4.如权利要求3所述的抗菌药物,其特征在于:其有效成分为乙酰短杆菌L-乳酸脱氢酶A链蛋白抗菌肽SK05,所述抗菌肽SK05的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。
5.如权利要求3或4任一项所述的一种抗菌药物,其特征在于:所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
6.一种饲料添加剂,其特征在于:其有效成分包括乙酰短杆菌L-乳酸脱氢酶A链蛋白抗菌肽SK05,所述抗菌肽SK05的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。
7.如权利要求6所述的饲料添加剂,其特征在于:其有效成分为乙酰短杆菌L-乳酸脱氢酶A链蛋白抗菌肽SK
8.如权利要求6或7任一项所述的一种饲料添加剂,其特征在于:所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
9.一种食品防腐剂,其特征在于:其有效成分为乙酰短杆菌L-乳酸脱氢酶A链蛋白抗菌肽SK05,所述抗菌肽SK05的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。
10.如权利要求9所述的一种食品防腐剂,其特征在于:所述食品防腐剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
...【技术特征摘要】
1.一种乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05,其氨基酸序列如seq id no:1所示。
2.如权利要求1所述的乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05在制备抗菌药物中的应用,其特征在于:所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
3.一种抗菌药物,其特征在于:其有效成分包括乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05,所述抗菌肽sk05的氨基酸序列为seq id no:1。
4.如权利要求3所述的抗菌药物,其特征在于:其有效成分为乙酰短杆菌l-乳酸脱氢酶a链蛋白抗菌肽sk05,所述抗菌肽sk05的氨基酸序列为seq id no:1。
5.如权利要求3或4任一项所述的一种抗菌药物,其特征在于:所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
【专利技术属性】
技术研发人员:杨燊,孙启明,陶玮红,金日天,林蓉,梁铎,翁武银,
申请(专利权)人:集美大学,
类型:发明
国别省市:
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