一种高效表达重组尿酸酶的大肠杆菌重组菌株及其制备和应用制造技术

技术编号:41228266 阅读:22 留言:0更新日期:2024-05-09 23:45
本发明专利技术公开了一种高效表达重组尿酸酶的大肠杆菌重组菌株及其制备和应用,所述重组菌株的构建方法为:将序列如SEQ ID NO.1所示的uox序列插入初始质粒中得到重组质粒,再将重组质粒转入大肠杆菌即得。本发明专利技术通过将密码子优化后的c.utiis氧化酶基因导入大肠杆菌中,大大增加了发酵过程中尿酸酶的产量,通过两步纯化即可获得高纯度的重组尿酸酶,对开发降尿酸药物具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物,具体涉及一种高效表达重组尿酸酶的大肠杆菌重组菌株及其制备和应用


技术介绍

1、尿酸(ua)是rna、dna和atp分解过程中产生的含氮废物。大多数哺乳动物的血清尿酸(ua在体内的电离形式)水平很低,因为尿酸酶将ua转化为尿囊素,尿囊素是一种极易溶解的排泄产物,可被尿液自由排出。然而,与大多数哺乳动物不同的是,在人类祖先中,尿酸酶的活性在灵长类动物进化过程中逐渐减弱,并在数百万年前较小的类人猿出现之前完全沉默。缺乏尿酸酶是成年雄性血清尿酸(sua)水平为~6.0mg/dl的主要原因,而大多数哺乳动物的尿酸水平<0.5-1mg/dl。

2、尿酸酶突变使sua水平升高,调节效率降低。当血清尿酸水平高于标准阈值时,组织中的尿酸盐晶体沉积开始发生。高尿酸血症的病理阈值为6.8mg/dl。高尿酸血症是发生痛风的主要危险因素,当sua水平升高时,这种风险呈指数增长。只有少数高尿酸水平的患者会发展为痛风。然而,高尿酸血症与多种慢性疾病有关,包括慢性肾病(ckd)、高血压、心血管疾病(cvd)、中风、糖尿病和代谢综合征。此外,在白本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高效表达重组尿酸酶的大肠杆菌重组菌株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤S1包括以下过程:

3.根据权利要求1或2所述的构建方法,其特征在于,所述初始质粒为pET-28a(+)。

4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述大肠杆菌为大肠杆菌BL21(DE3)。

5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤S2采用热激法进行转化。

6.根据权利要求1-5任一项所述构建方法制备的大肠杆菌重组菌株。

7.如权利要求6所述的大肠杆菌重组菌株在制备重组...

【技术特征摘要】

1.一种高效表达重组尿酸酶的大肠杆菌重组菌株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤s1包括以下过程:

3.根据权利要求1或2所述的构建方法,其特征在于,所述初始质粒为pet-28a(+)。

4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述大肠杆菌为大肠杆菌bl21(de3)。

5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤s2采用热激法进行转化。

6.根据权利要求1-5任一项所述构建方法制备的大肠...

【专利技术属性】
技术研发人员:谢浩冯一平郭君慧李其昌夏关慧芷邵梅潘慧健孙永琦
申请(专利权)人:武汉理工大学
类型:发明
国别省市:

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