【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及血液分离领域，特别涉及一种血液分离胶及其制备方法。
技术介绍
1、分离全血是研究、诊断和治疗中会使用到的操作。在医学治疗中，自体白细胞、血小板和细胞因子溶液用于治疗无菌性炎症性疾病(如关节炎，肌腱炎)，是一个较为新型的具有广泛应用前景的细胞治疗疗法，相比于市场长广泛应用的富血小板血浆(prp)治疗，此溶液中拥有浓缩的(高浓度的)白细胞和细胞因子，细胞因子提供短效的抗炎镇痛作用，白细胞提供长效的抗炎因子释放，从而提供长效的炎症和疼痛缓解，以及受伤组织(软组织和骨组织)的再生。
2、由于细胞治疗是一种相对较新的治疗方式，现有技术中，自体白细胞、血小板和细胞因子溶液并没有特定的分离装置，提取非常困难。临床上可以离心的方式通过提取富血小板血浆(prp)来得到血小板，但临床中没有提取“自体白细胞和细胞因子溶液”的方式。
3、目前，实验室提取“自体白细胞、血小板和细胞因子溶液”依然无特定的分离装置和试剂。市场上现有的血液分离液主要有ge healthcare公司的percoll、percoll plus、ficoll-paque，以及sigma公司的histopaque-1077产品。上述分离液只能分离单一密度的血液细胞(例如淋巴细胞)，无法得到存在密度差异的自体白细胞、血小板和细胞因子溶液操作过程中，上述血液分离液也存在有毒性和操作困难的问题。具体的，percoll是聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone)涂层硅胶介质(密度1.13g/ml)，有毒，只能用于科研；percoll pl
4、另外，现有的分离液(分离胶)对血液进行分离后(例如分离淋巴细胞)，淋巴细胞层很薄，且与其下层的分离胶层混在一起，较难分出边界，人工取液的过程中，鉴定所需细胞层非常困难，容易出现较大误差。例如收集淋巴细胞层时，容易误收集有毒的分离液层，或为了避免误收集分离液层，会造成白细胞层的损失。因此，鉴定和取出所需的细胞层对操作人员的熟练程度要求很高。另外，由于现有技术中的分离胶对血量有下限要求，因为定位和取出白细胞层的难度随着血液量减少而增加，当血液量少时，白细胞层厚度很小，依然难以准确提取，因此，为了更好的提取所需细胞层，需要更多的血量。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是提供一种血液分离胶及其制备方法，可以实现对自体血液进行分离，并且分离后得到的是白细胞、血小板和细胞因子溶液，且该溶液中，保留了所有白细胞类型，还不含有毒物质，可以直接用于软组织和骨细胞，具有激活软组织和骨细胞再生的修复作用。
2、本专利技术的第一个方面是提供一种血液分离胶，该血液分离胶按重量份计，包括如下组分：
3、多糖，1-20重量份；
4、生物相容性颗粒物，1-10重量份，粒径1-200um；
5、溶剂，100重量份；
6、所述血液分离胶的密度为1.05-1.1g/ml。
7、本专利技术提供的血液分离胶的组分中，多糖优选为透明质酸或其衍生物或海藻酸盐，均为可进入人体的生物材料，无毒，且具有抗菌消炎、激活软组织和骨细胞再生等辅助治疗功能；生物相容性颗粒物可以是生物玻璃颗粒、生物相容性金属颗粒等，其主要起到增加分离胶密度，离心后使分离胶呈密度梯度分布的作用，同时也可起到辅助抗菌、抑制炎症、激活软组织和骨细胞再生的修复作用；本专利技术的分离胶是将生物相容性颗粒物分散于多糖凝胶体系中，密度范围优选为1.05-1.0g/ml之间；利用本专利技术的分离胶分离血液时，在离心后分离胶呈密度梯度分布，密度从上至下逐渐变大，但其最小密度高于血浆密度，最大密度低于红细胞密度，较大密度的分离胶位于白细胞层和红细胞层之间，较小密度的分离胶位于血小板层与血浆层之间，白细胞层(包括密度较小的单核白细胞以及密度较大的多核白细胞等所有类型白细胞)和血小板层侧位于分离胶层中部偏上的位置处，白细胞以絮状物形式存在于分离胶内，同时，细胞因子也聚集在白细胞层中，因此，本申请的分离胶分离血液后，白细胞层与红细胞层不直接接触，血小板层与血浆层也不直接接触，便于完全抽取处白细胞层和血小板层，有利于降低人为操作误差，且对血液剂量的要求更低，便于使用。
8、较佳地，所述多糖为5-10重量份，所述生物相容性颗粒物为2-4重量份；可理解地，多糖5-10重量份、生物玻璃2-4重量份以及溶剂100重量份通过合理配制后形成的血液分离胶的密度能满足不同物种、不同人群血液分离的需求。
9、较佳地，所述血液分离胶还包括多糖总重量的0.1％-0.5％的交联剂。更佳地，所述交联剂为含ca2+的化合物，例如cacl2；可理解地，本专利技术中交联剂的目的是减少血液分离胶密度的分别范围，使其密度梯度更小，进而实现对单一或特定密度范围内细胞的分离；同时，添加交联剂还有利于增加血液分离胶的储存稳定性。
10、较佳地，所述多糖选自分子量为1000-100000道尔顿的透明质酸、分子量为1000-100000道尔顿的透明质酸衍生物或分子量为1000-100000的海藻酸盐的一种或多种；
11、所述生物相容性颗粒物优选为45s5生物活性玻璃，粒径为20-50um。45s5生物活性玻璃具有显著的生物活性，生物相容性，和抗炎特性，对于促进伤口愈合，修复和组织再生。当45s5生物活性玻璃接触到体液时，会迅速释放钠、钙、磷和硅等离子。可以刺激人体产生抗炎细胞因子，如白细胞介素-10(il-10)，这有助于抑制炎症反应。可理解地，生物相容性颗粒物还可以是其他生物相容性颗粒物材料，例如生物相容性金属颗粒物等。
12、所述溶剂为水。
13、本专利技术优选1000-100000之间的低分子量多糖，是因为较低分子量的多糖具有更小的分子尺寸，因此它们的分子间相互作用较弱，更容易被水分子包围和分散。这使得它们更容易在水中形成高浓度的胶体，从而实现胶体高密度。但分子量太低会导致多糖分子之间的相互作用不足以形成稳定的胶体结构，所以优选1000-100000之间。
14、本专利技术优选粒径为1-200um的生物相容性颗粒物，是因为：粒径小会显著增加其与多糖的接触本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种血液分离胶，其特征在于，所述血液分离胶按重量份计，包括如下组分：
2.如权利要求1所述的血液分离胶，其特征在于，所述多糖为5-10重量份，所述生物玻璃为2-4重量份。
3.如权利要求1所述的血液分离胶，其特征在于，所述血液分离胶还包括多糖总重量的0.1％-0.5％的交联剂。
4.如权利要求3所述的血液分离胶，其特征在于，所述交联剂为含Ca2+的化合物。
5.如权利要求1所述的血液分离胶，其特征在于，所述多糖选自分子量为1000-100000道尔顿的透明质酸、分子量为1000-100000道尔顿的透明质酸衍生物或分子量为1000-100000道尔顿的海藻酸盐的一种或多种；
6.一种权利要求1所述的血液分离胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤2中还包括向生物相容性颗粒物悬浊液中添加0.005-0.03重量份的交联剂。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤S1中：
9.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤S2中
10.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述步骤S2中添加的交联剂为含Ca2+的化合物。
...【技术特征摘要】
1.一种血液分离胶，其特征在于，所述血液分离胶按重量份计，包括如下组分：
2.如权利要求1所述的血液分离胶，其特征在于，所述多糖为5-10重量份，所述生物玻璃为2-4重量份。
3.如权利要求1所述的血液分离胶，其特征在于，所述血液分离胶还包括多糖总重量的0.1％-0.5％的交联剂。
4.如权利要求3所述的血液分离胶，其特征在于，所述交联剂为含ca2+的化合物。
5.如权利要求1所述的血液分离胶，其特征在于，所述多糖选自分子量为1000-100000道尔顿的透明质酸、分子量为1000-100000道尔顿的透明质酸衍生物或分子量为1...
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