【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学检验，尤其涉及一种液态肌红蛋白校准品稀释液及制备方法。
技术介绍
1、肌红蛋白(myo)是一种17.8kd的小分子蛋白质，由珠蛋白与正铁血红素(heme)结合而成，其分子结构与血红蛋白相似，具有在肌细胞内转运和贮存氧的功能。人体心肌、骨骼肌内含有大量肌红蛋白，正常人的血液中很少，主要由肾脏代谢并排泄。当心肌或横纹肌有损伤时，肌红蛋白由于细胞膜的破裂而被释放到血管系统，血清中的肌红蛋白即可明显升高。肌红蛋白是目前能最快地反映心肌坏死的生物标志。相比于乳酸脱氢酶(130kd)等酶，肌红蛋白的分子量较小，因此能更快地融入血循环。测定肌红蛋白可作为早期诊断心肌梗死的指标。肌钙蛋白ⅰ(ctni)、肌红蛋白(myo)和肌酸激酶同工酶(ck-mb)联合检测可对急性心肌梗死(ami)进行早期诊断。
2、目前，临床实验室测定肌红蛋白(myo)方法主要是免疫学方法，如荧光免疫层析法及磁微粒化学发光法。这两种方法在定量检测肌红蛋白(myo)的过程中，需要用到肌红蛋白校准品及质控品。但肌红蛋白校准品、质控品极易降解，保存困难。目前，国外体外诊断试剂生产企业研发的肌红蛋白校准品多数为冻干品，冻干校准品存在以下缺点：生产工艺复杂，增加企业生产成本；使用前需要手动复溶，给操作带来不便；复溶过程中操作者操作误差可能对准确度带来影响，导致检测结果出现偏差；且复溶后校准品不易保存。采用加入蛋白酶抑制剂的方法也能有效缓解肌红蛋白的降解过程，在破碎细胞提取肌红蛋白的同时，去抑制蛋白酶的释放，从而保持蛋白质不被降解，该操作较为简便，但蛋
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种液态肌红蛋白校准品稀释液及制备方法，旨在解决现有的校准品中含有的蛋白酶抑制剂具有毒性，危害健康，不宜大量使用的问题。
2、为实现上述目的，第一方面，本专利技术提供了一种液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，包括以下步骤：
3、称取tris、mes和氯化钠，并在预设温度条件下采用纯化水对所述tris、所述mes和所述氯化钠进行逐一溶解后调节ph值至预设范围，得到溶解液；
4、称取蔗糖、甘露醇和牛血清白蛋白加入所述溶解液中进行溶解；
5、完全溶解后加入蛋白稳定剂、非离子表面活性剂和防腐剂，搅拌混匀，得到混合液；
6、在所述混合液中加纯化水定容至稀释液总配制量，搅拌混匀后静置，然后过滤，得到液态肌红蛋白校准品稀释液。
7、其中，所述称取tris、mes和氯化钠，并在预设温度条件下采用纯化水对所述tris、所述mes和所述氯化钠进行逐一溶解后调节ph值至预设范围，得到溶解液，包括：
8、称取tris 10.9-13.3g/l、mes 9.0-11.0g/l和氯化钠1.8％，并在25±5℃温度条件下，用配制量为80％的纯化水对所述tris、所述mes和所述氯化钠进行逐一溶解，然后用6mol/l盐酸或1mol/l氢氧化钠溶液调节溶液ph值在7.4±0.1范围内，得到溶解液。
9、其中，所述称取蔗糖、甘露醇和牛血清白蛋白加入所述溶解液中进行溶解，包括：
10、称取蔗糖、甘露醇10-20g/l和牛血清白蛋白20-50g/l加入所述溶解液中进行溶解。
11、其中，所述完全溶解后加入蛋白稳定剂、非离子表面活性剂和防腐剂，搅拌混匀，得到混合液，包括：
12、完全溶解后加入蛋白稳定剂prionex 0.05％-0.1％、非离子表面活性剂0.05％和防腐剂0.3％搅拌混匀，得到混合液。
13、其中，所述在所述混合液中加纯化水定容至稀释液总配制量，搅拌混匀后静置，然后过滤，得到液态肌红蛋白校准品稀释液，包括：
14、在所述混合液中加纯化水定容至稀释液总配制量，搅拌混匀10分钟后，静置30分钟后用0.2μm～0.8μm孔径尼龙滤膜过滤，得到液态肌红蛋白校准品稀释液。
15、第二方面，本专利技术提供了一种液态肌红蛋白校准品稀释液，包括tris10.9-13.3g/l、mes 9.0-11.0g/l、氯化钠1.8％、蔗糖、甘露醇10-20g/l、牛血清白蛋白20-50g/l、蛋白稳定剂prionex 0.05％-0.1％、非离子表面活性剂0.05％-0.1％、防腐剂0.3％和纯化水。
16、其中，非离子表面活性剂为tween-20、tween-80和triton x-100中的任意一种；
17、防腐剂为proclin-300(pc-300)、proclin-950(pc-950)、krovin-300(kv-300)和krovin-400(kv-400)中的任意一种。
18、本专利技术的一种液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，通过称取tris、mes和氯化钠，并在预设温度条件下采用纯化水对所述tris、所述mes和所述氯化钠进行逐一溶解后调节ph值至预设范围，得到溶解液；称取蔗糖、甘露醇和牛血清白蛋白加入所述溶解液中进行溶解；完全溶解后加入蛋白稳定剂、非离子表面活性剂和防腐剂，搅拌混匀，得到混合液；在所述混合液中加纯化水定容至稀释液总配制量，搅拌混匀后静置，然后过滤，得到液态肌红蛋白校准品稀释液，本专利技术中的液态肌红蛋白校准品稀释液，校准品/质控品不需要做冻干处理，在液态条件下也可以长期保存，稳定性良好，在满足简化生产工序、降低成本的生产企业要求的同时，对人体无危害风险。解决了现有的校准品中含有的蛋白酶抑制剂具有毒性，危害健康，不宜大量使用的问题。
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1.一种液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，其特征在于，
3.如权利要求1所述的液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，其特征在于，所述称取蔗糖、甘露醇和牛血清白蛋白加入所述溶解液中进行溶解，包括：
4.如权利要求1所述的液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，其特征在于，
5.如权利要求1所述的液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，其特征在于，
6.一种液态肌红蛋白校准品稀释液，采用权利要求1所述的液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法进行制备，其特征在于，
7.如权利要求6所述的液态肌红蛋白校准品稀释液，其特征在于，
【技术特征摘要】
1.一种液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，其特征在于，
3.如权利要求1所述的液态肌红蛋白校准品稀释液制备方法，其特征在于，所述称取蔗糖、甘露醇和牛血清白蛋白加入所述溶解液中进行溶解，包括：
4.如权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘红平，陈婷，廖带娣，
申请(专利权)人：桂林优利特医疗电子有限公司，
类型：发明
国别省市：
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