【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及益生菌，具体涉及一种调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂及其制备方法。
技术介绍
1、近些年来，我国经济发展迅速，人民生活水平提高，关于肉类的消费理念发生了很大变化。人们在追求肉“量”的同时，更加注重对肉“质”的要求。随着家禽肉类的需求量日益增加，现代选育的快大型家禽快速生长的同时，也伴随着体内脂肪含量高、体脂沉积严重等问题。
2、脂肪的功能主要是为机体贮存能量，家禽通过对食物摄入脂肪，消耗能量进行生理调节。适量腹部脂肪有利于家禽能量储存，而绝大部分脂肪沉积并非机体生理所必需。现在的养殖方法使得家禽体内过多的脂肪，会导致一系列负面后果，如：影响饲料利用率；降低可食用胴体产量；作为加工废物丢弃而污染环境；增加脂肪肝综合征的发生等等。
3、脂肪形成的过程是前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化的过程，并受到一系列转录因子的调控。如何调控脂肪合成、转运、分解和脂肪细胞分化相关基因的表达，是维持动物体内脂肪代谢平衡和防止脂肪过度沉积的关键。如何将饲料中的营养成分有效转化为人们所需要的产品，减少过多的脂肪沉积，生产出高品质的畜产品，是家禽生产者和消费者的当务之急。
4、丁酸梭菌是一种革兰氏阳性厌氧细菌袁存在于健康的人和动物肠道中，丁酸梭菌是一种活跃的糖酵菌，可发酵碳水化合物，产生短链脂肪酸，包括丁酸、丙酸和乙酸等，短链脂肪酸在调控动物的生长和免疫力等方面发挥着重要作用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提出一种调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂及其制备方法
2、本专利技术的技术方案是这样实现的：
3、本专利技术提供一种调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂的制备方法，将制得小蘖碱/l-肉碱/甜菜碱共晶、由荷叶、决明子、山楂水提取得到的脂肪调节水提取物和发酵得到的脂肪调节发酵提取物、丁酸梭菌经富集铬和多糖并包埋的微球混合均匀，制得调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂。
4、作为本专利技术的进一步改进，包括以下步骤：
5、s1.小蘖碱/l-肉碱/甜菜碱共晶的制备：将小蘖碱溶于热乙醇，得到溶液a；将l-肉碱和甜菜碱溶于水中，得到溶液b；将溶液a和溶液b加热混合均匀，停止加热，静置，过滤，洗涤，干燥，制得小蘖碱/l-肉碱/甜菜碱共晶；
6、s2.脂肪调节水提取物的制备：将荷叶、决明子、山楂洗涤，干燥，粉碎，制得混合粉，加入水中，加热至沸腾提取，过滤，滤渣干燥留用，滤液加入乙醇沉淀，离心，收集固体，制得混合多糖，上清液回收乙醇，干燥，制得脂肪调节水提取物；
7、s3.丁酸梭菌的活化：将丁酸梭菌接种于高氏培养基中，活化培养，制得菌种种子液；
8、s4.发酵：将步骤s2中的滤渣加入水中，灭菌，接种步骤s3制得的丁酸梭菌菌种种子液，发酵培养，过滤，滤渣洗涤，收集洗脱液浓缩，得到浓缩菌液，滤液冷冻干燥，制得脂肪调节发酵提取物；
9、s5.富铬菌多糖混合物的制备：将步骤s2制得的混合多糖经灭菌后加入步骤s4中的浓缩菌液中，加入三价铬盐，搅拌混合均匀，发酵培养，透析，制得富铬菌多糖混合物；
10、s6.包埋：向步骤s5制得的富铬菌多糖混合物中加入海藻酸钠和卵磷脂，加入鱼油中，乳化，滴加氯化钙溶液，常温固化，离心，洗涤，干燥，制得包埋球；
11、s7.调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂的制备：将步骤s1制得的小蘖碱/l-肉碱/甜菜碱共晶、步骤s2制得的脂肪调节水提取物、步骤s4制得的脂肪调节发酵提取物、步骤s6制得的包埋球混合均匀，制得调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂。
12、作为本专利技术的进一步改进，步骤s1中所述热乙醇的温度为70-80℃，所述小蘖碱、l-肉碱和甜菜碱的质量比为5-7:2-4:1-2，所述加热至温度为70-80℃，所述静置的时间为2-4d。
13、作为本专利技术的进一步改进，步骤s2中所述荷叶、决明子、山楂的质量比为7-10:2-4:3-5，所述混合粉和水的固液比为1:5-10g/ml，所述沸腾提取的时间为3-5h，所述加入乙醇至体系乙醇含量为60-80wt％，沉淀2-4h。
14、作为本专利技术的进一步改进，步骤s3中所述活化培养的条件为无氧条件下，36-38℃，100-120r/min，活化培养18-24h，所述菌种种子液的含菌量为108-109cfu/ml；步骤s4中所述滤渣、水的质量比为10-15:100，所述丁酸梭菌菌种种子液的接种量为2-4v/v％，所述发酵培养的条件为无氧条件下，36-38℃，100-120r/min，发酵培养48-56h，所述浓缩菌液的含菌量为1011-1012cfu/ml。
15、作为本专利技术的进一步改进，步骤s5中所述混合多糖、三价铬盐、浓缩菌液的质量比为12-15:2-4:120-150，所述三价铬盐选自氯化铬、硝酸铬、硫酸铬中的至少一种，所述发酵培养的条件为无氧条件下，36-38℃，100-120r/min，发酵培养12-16h，所述透析采用的透析袋孔径为3000-5000da，时间为7-10h。
16、作为本专利技术的进一步改进，步骤s6中所述富铬菌多糖混合物、海藻酸钠和卵磷脂的质量比为100:10-12:0.5-1，所述常温固化的时间为20-30min。
17、作为本专利技术的进一步改进，步骤s7中所述小蘖碱/l-肉碱/甜菜碱共晶、脂肪调节水提取物、脂肪调节发酵提取物、包埋球的质量比为2-4:4-8:7-10:10-15。
18、作为本专利技术的进一步改进，具体包括以下步骤：
19、s1.小蘖碱/l-肉碱/甜菜碱共晶的制备：将5-7重量份小蘖碱溶于50重量份温度为70-80℃的乙醇，得到溶液a；将2-4重量份l-肉碱和1-2重量份甜菜碱溶于50重量份水中，得到溶液b；将溶液a和溶液b加热至温度为70-80℃，搅拌混合均匀，停止加热，静置2-4d，敞口挥发溶剂，过滤，洗涤，干燥，制得小蘖碱/l-肉碱/甜菜碱共晶；
20、s2.脂肪调节水提取物的制备：将7-10重量份荷叶、2-4重量份决明子、3-5重量份山楂洗涤，干燥，粉碎，制得混合粉，加入水中，所述混合粉和水的固液比为1:5-10g/ml，加热至沸腾提取3-5h，过滤，滤渣干燥留用，滤液加入乙醇至体系乙醇含量为60-80wt％，沉淀2-4h，离心，收集固体，制得混合多糖，上清液回收乙醇，干燥，制得脂肪调节水提取物；
21、s3.丁酸梭菌的活化：将丁酸梭菌接种于高氏培养基中，无氧条件下，36-38℃，100-120r/min，活化培养18-24h，制得含菌量为108-109cfu/ml的菌种种子液；
22、s4.发酵：将步骤s2中的滤渣加入水中，灭菌，接种步骤s3制得的丁酸梭菌菌种种子液，接种量为2-4v/v％，无氧条件下，36-38℃，1本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂的制备方法，其特征在于，将制得小蘖碱/L-肉碱/甜菜碱共晶、由荷叶、决明子、山楂水提取得到的脂肪调节水提取物和发酵得到的脂肪调节发酵提取物、丁酸梭菌经富集铬和多糖并包埋的微球混合均匀，制得调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述热乙醇的温度为70-80℃，所述小蘖碱、L-肉碱和甜菜碱的质量比为5-7:2-4:1-2，所述加热至温度为70-80℃，所述静置的时间为2-4d。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述荷叶、决明子、山楂的质量比为7-10:2-4:3-5，所述混合粉和水的固液比为1:5-10g/mL，所述沸腾提取的时间为3-5h，所述加入乙醇至体系乙醇含量为60-80wt%，沉淀2-4h。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述活化培养的条件为无氧条件下，36-38℃，100-120r/min，活化培养18-24h，所述菌种种子液
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S5中所述混合多糖、三价铬盐、浓缩菌液的质量比为12-15:2-4:120-150，所述三价铬盐选自氯化铬、硝酸铬、硫酸铬中的至少一种，所述发酵培养的条件为无氧条件下，36-38℃，100-120r/min，发酵培养12-16h，所述透析采用的透析袋孔径为3000-5000Da，时间为7-10h。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S6中所述富铬菌多糖混合物、海藻酸钠和卵磷脂的质量比为100:10-12:0.5-1，所述常温固化的时间为20-30min。
8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S7中所述小蘖碱/L-肉碱/甜菜碱共晶、脂肪调节水提取物、脂肪调节发酵提取物、包埋球的质量比为2-4:4-8:7-10:10-15。
9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
10.一种如权利要求1-9任一项所述的制备方法制得的调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂。
...【技术特征摘要】
1.一种调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂的制备方法，其特征在于，将制得小蘖碱/l-肉碱/甜菜碱共晶、由荷叶、决明子、山楂水提取得到的脂肪调节水提取物和发酵得到的脂肪调节发酵提取物、丁酸梭菌经富集铬和多糖并包埋的微球混合均匀，制得调控动物脂肪代谢的丁酸梭菌制剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述热乙醇的温度为70-80℃，所述小蘖碱、l-肉碱和甜菜碱的质量比为5-7:2-4:1-2，所述加热至温度为70-80℃，所述静置的时间为2-4d。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述荷叶、决明子、山楂的质量比为7-10:2-4:3-5，所述混合粉和水的固液比为1:5-10g/ml，所述沸腾提取的时间为3-5h，所述加入乙醇至体系乙醇含量为60-80wt%，沉淀2-4h。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤s3中所述活化培养的条件为无氧条件下，36-38℃，100-120r/min，活化培养18-24h，所述菌种种子液的含菌量为108-109cfu/ml；步骤s4中所述滤渣、水的质量比为10-15:100，所述丁酸梭菌菌种种...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖英平，马灵燕，徐求文，吕文涛，温洋，汪雯，杨华，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：
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