【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于猪链球菌菌蜕，尤其涉及一种猪链球菌菌蜕及其制备方法和应用。
技术介绍
1、猪链球菌是一种革兰氏阳性的人畜共患病原菌，可引发脑膜炎、关节炎、肺炎、心内膜炎和败血症等多种病症。目前猪链球菌病发病范围广，发病频率高，一年四季均可发生，严重危害养猪业。在当前“减抗限抗”以及抗生素优化使用的背景下，疫苗接种已成为养殖场预防猪链球菌病的主要手段之一。宿主免疫系统主要通过识别猪链球菌表面抗原激活免疫应答，从而对病原感染产生免疫保护。表面抗原的亚单位疫苗是疫苗发展的一个重要方向，但猪链球菌表面抗原众多，单一抗原的免疫保护效果并不理想。猪链球菌灭活疫苗接种可为宿主提供有效的免疫保护力，但其经化学试剂灭活处理，表面抗原的完整性并不能得以完全保留，往往需要以佐剂及更高的剂量加强免疫反应。
2、菌蜕由基因调控表达，完整保留细菌细胞膜，兼顾了组合抗原免疫原性、佐剂效应、靶向性载体的作用，可诱导机体产生更强的免疫反应，是新型疫苗开发的优质载体。目前菌蜕已在大肠杆菌、沙门菌等革兰阴性致病菌得以实现，主要依靠调控phix174噬菌体裂解基因e...
【技术保护点】
1.一种猪链球菌菌蜕的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的猪链球菌菌蜕的制备方法，其特征在于，所述质粒通过自然转化的方法转入猪链球菌中后，转接至含有壮观霉素(Spc+)的THB液体培养基中，培养至OD600nm为0.3±0.05时，添加无水四环素诱导表达后，制得所述猪链球菌菌蜕；优选的，所述无水四环素的添加浓度为400-600ng/ml，诱导时间为2-4h。
3.根据权利要求1所述的猪链球菌菌蜕的制备方法，其特征在于，所述四环素诱导Crfp表达后，还包括添加氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的细胞穿透肽WR12对菌...
【技术特征摘要】
1.一种猪链球菌菌蜕的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的猪链球菌菌蜕的制备方法，其特征在于，所述质粒通过自然转化的方法转入猪链球菌中后，转接至含有壮观霉素(spc+)的thb液体培养基中，培养至od600nm为0.3±0.05时，添加无水四环素诱导表达后，制得所述猪链球菌菌蜕；优选的，所述无水四环素的添加浓度为400-600ng/ml，诱导时间为2-4h。
3.根据权利要求1所述的猪链球菌菌蜕的制备方法，其特征在于，所述四环素诱导crfp表达后，还包括添加氨基酸序列如seq id no.3所示的细胞穿透肽wr12对菌蜕溶液进行二次灭活，制得所述猪链球菌菌蜕。
4.根据权利要求3所述的猪链球菌菌蜕的制备方法，其特征在于，所述二次灭活的方法包括如下步骤：
5.一种用于...
【专利技术属性】
技术研发人员：马家乐，刘嘉楠，蒲晚霞，吴宗福，姚火春，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：
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