【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，更具体地涉及一种map2蛋白核酸适配体wqy-022及其应用。
技术介绍
1、map2蛋白(全称为微管相关蛋白2，microtubule-associated protein 2)，是一种在神经元和中枢神经系统中高表达并且发挥重要功能的蛋白质，在神经元的发育、形态和功能中起到调节和稳定微管的作用。map2蛋白可用作神经系统疾病的标志物或指标，例如神经退行性疾病阿尔茨海默病和癫痫等，中南大学湘雅医院重症医学科发现脑脊液生物标志物泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)、微管相关蛋白(map)-2、α-突触核蛋白和过氧化物酶ⅵ的浓度与入院时格拉斯哥昏迷量表(gcs)评分较低、长期功能预后较差和死亡率增加有关。研究人员还发现map2蛋白的突变或异常表达与一些神经系统疾病的发生和发展密切相关。随着map2蛋白在神经相关疾病中的表达发生变化，近年来，对map2蛋白的研究受到越来越广泛的关注。
2、核酸适配体(aptamer)是一段寡核苷酸序列(dna或rna)。通常是利用体外筛选技术——指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands byexponential enrichment，selex)，从核酸分子文库中人工合成得到的寡核苷酸片段。核酸适配体具有稳定的二级结构，能够和靶标分子特异性结合。核酸适配体的特异性如同抗体一样，对可结合的配体有严格的识别能力和高度的亲和力。核酸适配体可以结合的靶分子有小分子、蛋白、细菌、病毒、细胞和组织等。
3、在
技术实现思路
1、鉴于上述问题，本申请提供了一种map2蛋白核酸适配体wqy-022及其应用，以期填补现有技术缺乏map2蛋白核酸适配体的技术空白，同时为map2蛋白核酸适配体后续作为分子探针构建生物检测传感器、体外诊断、生物标志物的检测和分析、新药研发等应用提供基础支撑。
2、为实现上述目的，一方面，本专利技术提供了一种map2蛋白核酸适配体wqy-022，所述map2蛋白核酸适配体的核苷酸序列如seq id no.1所示。
3、seq id no.1为tccagcactccacgcataacttcacggtgctggtttccgtttgcgtgggctgcgttgttatgcgtgctaccgtgaa。
4、在一种具体的实施方式中，map2蛋白核酸适配体wqy-022的核苷酸序列由seq idno.1所示的核苷酸序列经修饰得到。
5、在一些具体的实施方式中，所述修饰包括以下修饰方法中的至少一种：磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化、同位素化和氟化。
6、另一方面，本专利技术提供了一种map2蛋白核酸适配体的衍生物，所述map2蛋白核酸适配体的衍生物包括seq id no.1所示的map2蛋白核酸适配体和标记所述map2蛋白核酸适配体的可检测标记物。
7、标记可以是通过化学键连接或物理吸附。
8、在一些优选具体的实施方式中，所述可检测标记物包括荧光标记物、放射性物质、治疗性物质、生物素、亲和素、酶、地高辛、纳米发光材料、磁珠、胶体金、有色玻璃、塑料珠、小分子肽和sirna中的至少一种。
9、荧光标记物包括但不限于fam(羧基荧光素，carboxy fluorescein)、fitc(异硫氰酸荧光素，fluorescein isothiocyanate)、tet(四氯-6-羧基荧光素，tetrachlorofluorescein)、hex(六氯-6-甲基荧光素，hexachloro fluorescein)、joe(2,7-二甲基-4,5-二氯-6-羧基荧光素)、罗丹明类(rhodamine染料如r110、tamra、texas red等)、rox、alexafluor染料(如alexa 350、alexa 405)、atto染料(如atto 390、atto 425、atto 465)、dylight染料、cyanine染料(如cy2、cy3、cy5.5、cy7、cy7.5)、fluoprobes染料、sulfocy染料、seta染料、iris染料、setau染料、srfluor染料、square染料。
10、放射性物质包括例如3h、14c、32p、33p、35s、90y、99tc、111in、125i、131i、177lu、166ho和153sm。
11、治疗性物质、生物素、亲和素、酶、地高辛、纳米发光材料、磁珠、胶体金、有色玻璃、塑料珠、小分子肽和sirna。
12、本专利技术还提供了如seq id no.1所示的map2蛋白核酸适配体在神经相关疾病中的检测、分析或研究中的应用。
13、同时，本专利技术还提供了如seq id no.1所示的map2蛋白核酸适配体在急性脑损伤患者体液生物标志物中的检测、分析或研究中的应用。
14、此外，本专利技术还提供了一种检测试剂盒，包括seq id no.1所示的map2蛋白核酸适配体或标记seq id no.1所示的map2蛋白核酸适配体的可检测标记物。
15、可检测标记物可以发出号包括光学信号或电学信号等可检测信号，光学信号包括荧光信号、光吸收信号、红外吸收信号、拉曼散射信号或化学发光信号。
16、本专利技术还提供一种药物组分，包括seq id no.1所示的map2蛋白核酸适配体或其经过磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化、同位素化和氟化中一种修饰方法修饰后的map2蛋白核酸适配体，或seq id no.1所示的map2蛋白核酸适配体和标记其上的可检测标记物形成的map2蛋白核酸适配体衍生物。
17、进一步地，本专利技术还提供一种map2蛋白核酸适配体生物传感器，包括将seq idno.1所示的map2蛋白核酸适配体或其经过磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化、同位素化和氟化中一种修饰方法修饰后的map2蛋白核酸适配体固定于电极、纳米材料或薄膜上的步骤制备得到该生物传感器。
18、本专利技术的靶标为map2蛋白，采用mb-selex(磁珠-指数富集的配体系统进化技术)具体地采用羧基磁珠固定靶标的方法进行筛选得到map2蛋白核酸适配体，将其命名为wqy-022，并通过磁珠荧光定量pcr法测得筛到的核酸适配体与map2蛋白的亲和力常数kd，约为14.34nm。
19、wqy-022的核苷酸序列如seq id no.1所示，seq id no.1：tccagcactccacgcataacttcacggtgctggtttccgtttgcgtggg ctgcgttgttatgcgtgc本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种MAP2蛋白核酸适配体，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种MAP2蛋白核酸适配体，其特征在于，其核苷酸序列由权利要求1所述的MAP2蛋白核酸适配体的核苷酸序列经修饰得到。
3.根据权利要求2所述的MAP2蛋白核酸适配体，其特征在于，所述修饰包括以下修饰方法中的至少一种：磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化、同位素化和氟化。
4.一种MAP2蛋白核酸适配体的衍生物，其特征在于，包括权利要求1所述的MAP2蛋白核酸适配体和标记所述MAP2蛋白核酸适配体的可检测标记物。
5.根据权利要求4所述的衍生物，其特征在于，所述可检测标记物包括荧光标记物、放射性物质、治疗性物质、生物素、亲和素、酶、地高辛、纳米发光材料、磁珠、胶体金、有色玻璃、塑料珠、小分子肽和siRNA中的至少一种。
6.如权利要求1所述的MAP2蛋白核酸适配体在神经相关疾病中的检测、分析或研究中的应用。
7.如权利要求1所述的MAP2蛋白核酸适配体在急性脑损伤患者体液生物标志物中的检测、分析或研究中的应用。
8
9.一种药物组分，其特征在于，包括权利要求1或2所述的MAP2蛋白核酸适配体，或权利要求4所述的MAP2蛋白核酸适配体的衍生物。
10.一种MAP2蛋白核酸适配体生物传感器，其特征在于，包括将权利要求1或2所述的MAP2蛋白核酸适配体固定于电极、纳米材料或薄膜上的步骤制备得到。
...【技术特征摘要】
1.一种map2蛋白核酸适配体，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.一种map2蛋白核酸适配体，其特征在于，其核苷酸序列由权利要求1所述的map2蛋白核酸适配体的核苷酸序列经修饰得到。
3.根据权利要求2所述的map2蛋白核酸适配体，其特征在于，所述修饰包括以下修饰方法中的至少一种：磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化、同位素化和氟化。
4.一种map2蛋白核酸适配体的衍生物，其特征在于，包括权利要求1所述的map2蛋白核酸适配体和标记所述map2蛋白核酸适配体的可检测标记物。
5.根据权利要求4所述的衍生物，其特征在于，所述可检测标记物包括荧光标记物、放射性物质、治疗性物质、生物素、亲和素、酶、地高辛、纳米发光材...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴巧艺，魏奕柳，陈维志，洪婕，叶君成，
申请(专利权)人：福建医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：
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