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毛乳头细胞体外分离的纯化方法技术

技术编号:41205477 阅读:21 留言:0更新日期:2024-05-07 22:31
本发明专利技术提供了一种毛乳头细胞体外分离的纯化方法,该方法包括:获取离体小鼠的毛乳头部位,联合胶原酶消化,并添加碱性成纤维细胞生长因子以优化培养体系,建立体外分离的纯化方法;以光镜下观察、细胞计数、碱性磷酸酶特异性染色及荧光定量PCR鉴定DPCs的ALP mRNA表达水平;与传统方法比较,本发明专利技术的毛乳头基本全部贴壁,并可更快迁出及生长融合,所获得的细胞数量是传统方法的5.85倍;且改良方法的毛乳头细胞具有更强的ALP活性,尤其是第5代细胞更为明显;改良方法可获取更多数量、并具有较好功能的小鼠毛乳头细胞,为开展毛囊相关研究提供可靠的细胞来源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物细胞,具体涉及一种毛乳头细胞体外分离的纯化方法


技术介绍

1、脱发是临床常见疾病,虽不危及生命,但严重影响患者身心健康及生活质量,给患者及社会造成巨大的经济负担。而毛乳头细胞(dermal papilla cells, dpcs)是毛囊形态学发生的关键,被认为是促进毛发再生的重要种子细胞来源之一[1]。小鼠是毛发疾病及再生研究的重要模型和工具[2],但传统的小鼠dpcs分离培养方法效率低、来源有限且极易老化,严重限制了毛囊再生及毛发相关疾病研究的发展[3]。因此,迫切需要建立更快速、高效的新方法。

2、[1]hwang d, lee h, lee j, et al. micro-current stimulation haspotential effects of hair growth-promotion on human hair follicle-derivedpapilla cells and animal model[j]. int j mol sci, 2021, 22 (9)..

>3、[2]hu s本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种毛乳头细胞体外分离的纯化方法,其特征在于:该纯化方法包括:将离体小鼠的毛囊置于DMEM培养基中进行消化,并加入等体积全培养基终止消化,离心,弃上清液,收集组织块并用碱性成纤维细胞生长因子吹打混匀,种植于培养板上,在细胞培养箱中培养。

2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:所述DMEM培养基含0.1% 胶原酶NB4。

3.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:所述全培养基由血清、青-链霉素溶液、DMEM培养基配制。

4.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:所述消化的温度为37℃,时间为30-45min。>

5.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种毛乳头细胞体外分离的纯化方法,其特征在于:该纯化方法包括:将离体小鼠的毛囊置于dmem培养基中进行消化,并加入等体积全培养基终止消化,离心,弃上清液,收集组织块并用碱性成纤维细胞生长因子吹打混匀,种植于培养板上,在细胞培养箱中培养。

2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:所述dmem培养基含0.1% 胶原酶nb4。

3.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于:所述全培养基由血清、青-链霉素溶液、dmem培养基配制...

【专利技术属性】
技术研发人员:何晶林享玉祝佳铭沈辰云朱亮陈建军
申请(专利权)人:同济大学
类型:发明
国别省市:

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