【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于对样本中的复数种细菌群进行溶菌的溶菌方法、以及使用了溶菌方法的细菌检测方法。本专利技术还涉及溶菌方法中使用的溶菌剂、溶菌试剂盒、以及细菌检测方法中使用的细菌检测试剂盒。
技术介绍
1、以往，出于基于细胞内成分检测样本中的细菌等目的，使用了对样本中的细菌进行溶菌的各种技术。例如，专利文献1和2(日本特开2017-32579公报和国际公开2015/093544号)中公开了对金黄色葡萄球菌基于其核糖体蛋白l7/l12通过抗原抗体反应进行检测的技术，记载了此时使用溶葡球菌酶作为溶菌剂对样本中的细菌进行溶菌。另外，专利文献3(国际公开2015/093545号)中公开了对于大肠杆菌基于其核糖体蛋白l7/l12通过抗原抗体反应进行检测的技术，记载了此时使用溶菌酶作为溶菌剂对样本中的细菌进行溶菌。
2、现有技术文献
3、专利文献
4、专利文献1：日本特开2017-32579公报
5、专利文献2：国际公开2015/093544号
6、专利文献3：国际公开2015/093545号
技术实现思路
1、专利技术所要解决的课题
2、但是，在专利文献1～3等以往的溶菌方法中，无法同时对复数种细菌进行溶菌。因此，在同时检测复数种细菌等情况下，需要利用不同的溶菌剂对每个细菌属进行溶菌，导致溶菌处理繁杂、延迟。
3、用于解决课题的手段
4、本专利技术人进行了深入研究，结果发现，通过使用包含表面活性剂和溶
5、即，本专利技术的主旨例如涉及以下内容。
6、[1]一种溶菌方法，其是样本中的包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和/或革兰氏阴性细菌的复数种细菌群的溶菌方法，上述方法包括用包含表面活性剂和溶菌性酶的溶液对样本进行处理的工序，上述表面活性剂选自氧化胺和季铵。
7、[2]如项目1所述的方法，其中，上述复数种细菌群同时包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和至少1种以上的革兰氏阴性细菌。
8、[3]如项目1或2所述的方法，其中，上述表面活性剂为1种或2种以上的氧化胺。
9、[4]如项目3所述的方法，其中，上述氧化胺为n,n-二甲基十二烷胺n-氧化物(ddao)。
10、[5]如项目3或4所述的方法，其中，与上述样本处理时的溶液中的上述氧化胺的浓度为0.01质量％～0.2质量％。
11、[6]如项目1或2所述的方法，其中，上述表面活性剂为1种或2种以上的季铵盐。
12、[7]如项目6所述的方法，其中，上述季铵盐为苯扎氯铵。
13、[8]如项目6或7所述的方法，其中，与上述样本处理时的溶液中的上述季铵盐的浓度为0.005质量％～0.08质量％。
14、[9]如项目1～8中任一项所述的方法，其中，上述溶菌性酶为溶葡球菌酶。
15、[10]如项目9所述的方法，其中，与上述样本处理时的溶液中的上述溶葡球菌酶的浓度为0.01μg/ml～5.0μg/ml。
16、[11]如项目1～10中任一项所述的方法，其中，上述革兰氏阳性细菌至少包含葡萄球菌属(staphylococcus)的细菌。
17、[12]如项目1～11中任一项所述的方法，其中，上述包含表面活性剂和溶菌性酶的溶液包含选自红、蓝和绿中的任一种色素。
18、[13]如项目1～12中任一项所述的方法，其用于通过免疫层析法检测样本中的至少1种以上的细菌。
19、[14]一种检测方法，其为样本中的复数种细菌群的检测方法，其包括：
20、通过项目1～13中任一项所述的方法，对样本中的复数种细菌群进行溶菌的工序；和
21、对于从溶菌后的细菌群排出的细菌的抗原，使用与该抗原产生抗原抗体反应的抗体进行检测的工序。
22、[15]如项目14所述的方法，其中，作为上述检测对象的样本中的复数种细菌群同时包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和至少1种以上的革兰氏阴性细菌。
23、[16]如项目14或15所述的方法，其中，上述检测的工序通过免疫层析法进行。
24、[17]如项目14～16中任一项所述的方法，其中，通过上述进行溶菌的工序排出的细菌的抗原为l7抗原。
25、[18]一种溶菌试剂盒，其为项目1～13中任一项所述的方法中使用的、用于对样本中的包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和/或革兰氏阴性细菌的复数种细菌群进行溶菌的溶菌试剂盒，其包含表面活性剂和溶菌性酶。
26、[19]一种细菌检测试剂盒，其用于对样本中的包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和/或革兰氏阴性细菌的复数种细菌群进行检测，
27、上述细菌检测试剂盒包括：
28、项目1～13中任一项所述的方法中使用的表面活性剂和溶菌性酶；和
29、免疫层析检测装置，上述免疫层析检测装置包括
30、以下的：
31、(a)标记用抗体附着部件，其附着有标记用抗体，上述标记用抗体通过抗原抗体反应与对象细菌来源抗原形成第1复合体；和
32、(b)具有检测区域的试纸条，其固定有通过抗原抗体反应与第1复合体形成第2复合体的捕捉用抗体。
33、[20]一种用于检测样本中的细菌的有无和/或存在量的方法，上述方法包括：
34、(i)通过项目1～13中任一项所述的方法对样本中的细菌进行溶菌的工序；
35、(ii)通过样本、与固相载体固定的捕捉用抗体、以及具有检测用标记的标记用抗体的抗原抗体反应，捕捉样本中的细菌来源的抗原，并且标记样本中的细菌来源的抗原的工序；和
36、(iii)基于检测用标记检测样本中的细菌的工序，
37、捕捉用抗体和标记用抗体中的一者为与包含细菌的5种以上的属的细菌来源的抗原产生抗原抗体反应的1种或2种以上的通用性抗体，捕捉用抗体和标记用抗体中的另一者为与1种或2种以上的属的细菌产生抗原抗体反应的1种或2种以上的特异性抗体。
38、[21]如项目20所述的方法，其中，在单一的捕捉用抗体固定部位检测样本中的2种以上的细菌。
39、专利技术的效果
40、根据本专利技术，通过使用表面活性剂和溶菌性酶进行溶菌，能够同时对复数个属的细菌(复数种细菌群)进行溶菌，能够实现溶菌处理的高效化、迅速化。由此，使用了细菌的细胞内抗原等的复数个属的细菌检测等也能够高效化、迅速化。
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1.一种溶菌方法，其是样本中的包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和/或革兰氏阴性细菌的复数种细菌群的溶菌方法，所述方法包括用包含表面活性剂和溶菌性酶的溶液对样本进行处理的工序，所述表面活性剂选自氧化胺和季铵。
2.如权利要求1所述的方法，其中，所述复数种细菌群同时包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和至少1种以上的革兰氏阴性细菌。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述表面活性剂为1种或2种以上的氧化胺。
4.如权利要求3所述的方法，其中，所述氧化胺为N,N-二甲基十二烷胺N-氧化物DDAO。
5.如权利要求3或4所述的方法，其中，与所述样本处理时的溶液中的所述氧化胺的浓度为0.01质量％～0.2质量％。
6.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述表面活性剂为1种或2种以上的季铵盐。
7.如权利要求6所述的方法，其中，所述季铵盐为苯扎氯铵。
8.如权利要求6或7所述的方法，其中，与所述样本处理时的溶液中的所述季铵盐的浓度为0.005质量％～0.08质量％。
9.如权利要求1～8中任一项所
10.如权利要求9所述的方法，其中，与所述样本处理时的溶液中的所述溶葡球菌酶的浓度为0.01μg/mL～5.0μg/mL。
11.如权利要求1～10中任一项所述的方法，其中，所述革兰氏阳性细菌至少包含葡萄球菌属(Staphylococcus)的细菌。
12.如权利要求1～11中任一项所述的方法，其中，所述包含表面活性剂和溶菌性酶的溶液包含选自红、蓝和绿中的任一种色素。
13.如权利要求1～12中任一项所述的方法，其用于通过免疫层析法检测样本中的至少1种以上的细菌。
14.一种检测方法，其为样本中的复数种细菌群的检测方法，其包括：
15.如权利要求14所述的方法，其中，作为所述检测对象的样本中的复数种细菌群同时包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和至少1种以上的革兰氏阴性细菌。
16.如权利要求14或15所述的方法，其中，所述检测的工序通过免疫层析法进行。
17.如权利要求14～16中任一项所述的方法，其中，通过所述进行溶菌的工序排出的细菌的抗原为L7抗原。
18.一种溶菌试剂盒，其为权利要求1～13中任一项所述的方法中使用的、用于对样本中的包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和/或革兰氏阴性细菌的复数种细菌群进行溶菌的溶菌试剂盒，其包含表面活性剂和溶菌性酶。
19.一种细菌检测试剂盒，其用于对样本中的包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和/或革兰氏阴性细菌的复数种细菌群进行检测，
20.一种用于检测样本中的细菌的有无和/或存在量的方法，所述方法包括：
21.如权利要求20所述的方法，其中，在单一的捕捉用抗体固定部位检测样本中的2种以上的细菌。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种溶菌方法，其是样本中的包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和/或革兰氏阴性细菌的复数种细菌群的溶菌方法，所述方法包括用包含表面活性剂和溶菌性酶的溶液对样本进行处理的工序，所述表面活性剂选自氧化胺和季铵。
2.如权利要求1所述的方法，其中，所述复数种细菌群同时包含至少1种以上的革兰氏阳性细菌和至少1种以上的革兰氏阴性细菌。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述表面活性剂为1种或2种以上的氧化胺。
4.如权利要求3所述的方法，其中，所述氧化胺为n,n-二甲基十二烷胺n-氧化物ddao。
5.如权利要求3或4所述的方法，其中，与所述样本处理时的溶液中的所述氧化胺的浓度为0.01质量％～0.2质量％。
6.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述表面活性剂为1种或2种以上的季铵盐。
7.如权利要求6所述的方法，其中，所述季铵盐为苯扎氯铵。
8.如权利要求6或7所述的方法，其中，与所述样本处理时的溶液中的所述季铵盐的浓度为0.005质量％～0.08质量％。
9.如权利要求1～8中任一项所述的方法，其中，所述溶菌性酶为溶葡球菌酶。
10.如权利要求9所述的方法，其中，与所述样本处理时的溶液中的所述溶葡球菌酶的浓度为0.01μg/ml～5.0μg/ml。
11.如权利要求1～10中任一项所述的方法，其中，所述革兰氏阳性细菌至少包含葡萄球...
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