一种快速筛选鸡矢藤中降尿酸物质的方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种快速筛选鸡矢藤中降尿酸物质的方法及应用，方法包括：将鸡矢藤提取物与XO孵育后，生物亲和超滤将配体‑受体复合物与未结合的复合物分离，随后通过UPLC‑ESI‑QTrap‑MS/MS和HPLC‑DAD方法分析识别和量化配体‑受体复合物释放的配体化合物。该筛选过程只需借助合适孔径的滤膜完成，无固定化，实验步骤简单，实验条件温和，可控制受体和配体的孵育温度，实现了高通量、高效筛选。此外，分子对接分析揭示了筛选出的潜在XO抑制剂与XO相互作用的活性机制，为制备降尿酸的天然药物或保健品提供了理论和技术支持，有利于鸡矢藤的进一步开发利用，具有极大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于化学检测分析，涉及一种快速筛选鸡矢藤中降尿酸物质的方法及应用。

技术介绍

1、造成这种现象的主要原因是尿酸的过量产生和/或代谢异常。高尿酸血症可能引起一系列代谢性疾病，如痛风、糖尿病、高血压、心血管疾病、慢性肾脏疾病等，从而对人类健康造成危害。黄嘌呤氧化酶(xo)催化黄嘌呤产生尿酸，因此，抑制xo活性对于高尿酸血症和痛风等疾病的治疗是必要的。别嘌呤醇(1966年批准)、非布司他(2009年批准)和托匹司他(2013年批准)在临床上常用于治疗高尿酸血症和痛风等疾病，但它们会对人体健康产生危害。有研究表明，天然黄酮类物质可以通过抑制xo活性来降低尿酸水平，从而减少肾脏损害和不良反应，从植物中筛选出的酶抑制剂因比较安全而受到了广泛的关注，然而，由于植物组成的复杂性，并不容易筛选出xo抑制剂。

2、传统的分离生物活性物质的方法主要有薄层层析法、高效液相色谱法、气相色谱法等。薄层色谱法是将适宜的固定相涂布形成匀薄层，经过点样、展开后，根据比移值与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值作对比，以进行鉴别、杂质检查或含量测定，该方法的缺陷有不能本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种快速筛选鸡矢藤中降尿酸物质的方法，包括：将鸡矢藤提取物与XO孵育后，生物亲和超滤将配体-受体复合物与未结合的复合物分离，随后通过UPLC-ESI-QTrap-MS/MS和HPLC-DAD方法分析识别和量化配体-受体复合物释放的配体化合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将浓度为0.5mg/mL的鸡矢藤提取物样品与5U/mL的XO按照体积比1：1依次加入到分子量为30kDa的超滤管中，在37℃下孵育10min，12000rpm离心10min，随后加入PBS洗去除未结合的化合物，重复3～5次，再加入甲醇从复合物中分离出XO特异性结合配体。</p>

3.根据...

【技术特征摘要】

1.一种快速筛选鸡矢藤中降尿酸物质的方法，包括：将鸡矢藤提取物与xo孵育后，生物亲和超滤将配体-受体复合物与未结合的复合物分离，随后通过uplc-esi-qtrap-ms/ms和hplc-dad方法分析识别和量化配体-受体复合物释放的配体化合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将浓度为0.5mg/ml的鸡矢藤提取物样品与5u/ml的xo按照体积比1：1依次加入到分子量为30kda的超滤管中，在37℃下孵育10min，12000rpm离心10min，随后加入pbs洗去除未结合的化合物，重复3～5次，再加入甲醇从复合物中分离出xo特异性结合配体。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，抑制剂和xo的生物亲和度(bd)根据下式计算：

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，提取液中的主要化合物使用acquityuplchss t3柱进行分离，分别采用0.1％甲酸-水(a)和乙腈(b)作为流动相，梯度洗脱方法如下：0～0.5min，15％b，0.5～10min，2～50％b，10～13min，50～95％b，13～15min，95～2％b；柱培养箱温度为40℃，注射体积为2μl，流速为0.4ml/m...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪瑞敏，刘余亿，杨德瑞，郭权，薛辉，张家超，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：