【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于农业微生物，涉及一种产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌及其应用。
技术介绍
1、蛋白酶是指能够将蛋白质降解成小肽和氨基酸的水解酶，占整个工业酶市场的60％以上。蛋白酶是工业生物酶的主要来源之一，在食品工业、医药、制革工业、酿造、饲料加工等领域得到广泛应用。蛋白酶主要来源于微生物、动物内脏、植物，可分为微生物蛋白酶、动物蛋白酶和植物蛋白酶。微生物蛋白酶由于具有生产周期短、产量高、成本低、不受时间和空间的限制、经济效益高、易于管控、应用范围大的诸多优点，逐渐受到工业生产的青睐。因此，筛选出性能稳定且高产蛋白酶的菌株具有重要意义。
2、随着蛋白酶的重要性提升，越来越多的国内外学者不断从各区域环境下挖掘具有产蛋白酶的各种不同优势菌株。董文华等从醋醅中筛选出无致病性且同时兼具产酶活性的葡萄球菌(staphylococcus)d-6，研究菌株相关特性，对菌株产蛋白酶条件进行优化，提高菌株蛋白酶产量，为之后醋的风味改良提供思路，对探究醋醅中产酸菌株、提升食醋风味具有积极作用。吕明生等筛选到一种海洋细菌virgibacillus sp.sp2，该菌株可生产蛋白酶，能有效降解鱼类过敏原小清蛋白，该菌株所产的蛋白酶偏好切割含glu-、asp-、lys-、leu-和phe-的肽键，对有机溶剂具有良好的耐受性，本专利技术产蛋白酶的方法在食品行业、医药行业和健康行业有较好的应用前景。keshapaga ur等分离得到的高产半胱氨酸蛋白酶的枯草芽孢杆菌a4，添加到通用洗涤剂中，半胱氨酸蛋白酶有显著去除织物污渍效果，还助于
3、但目前对产蛋白酶的副黄假单胞菌属的研究还较少，尤其是兼具产蛋白酶和其他多种性能的副黄假单胞菌属的研究鲜少，因此，分离筛选出更多具有分泌蛋白酶的副黄假单胞菌对工业蛋白酶生产具有十分重要的意义。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌及其应用。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌，所述产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌命名为副黄假单胞菌(pseudomonas parafulva)yc15菌株，保藏编号为gdmcc no:64249，保藏日期为2024年01月05日。
4、本专利技术从广东省韶关市马市镇烟草根际土中分离获得并保藏了一株新的能够分泌蛋白酶和嗜铁素且具有抗植物病原菌性能的副黄假单胞菌，将其命名为副黄假单胞菌(pseudomonas parafulva)yc15菌株，该菌株具有产蛋白酶能力，在常见发酵培养基中培养均能产生蛋白酶，在lb培养基中的酶活能达到87.29u/ml，能用于蛋白酶的制备；其次，该菌具有产嗜铁素能力，在嗜铁素培养基中培养能产生橙红色圈，能用于植物促生的制备；同时，该菌株还具有广谱的抑菌作用，对多种植物病原真菌：烟草疫霉菌、烟草赤星菌、烟草靶斑菌和水稻纹枯病菌具有显著的抑制效果，能够作为生防菌防治多种植物病害。本专利技术丰富了蛋白酶以及生防菌的菌种资源，且该菌株未经遗传改造，可应用于工业蛋白酶生产和生物农药的开发。
5、第二方面，本专利技术提供一种产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌发酵液，所述发酵液的制备方法包括：将活化后的第一方面所述的副黄假单胞菌(pseudomonas parafulva)yc15菌株接种于培养基中在25-30℃(例如25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃等)下培养12-36h(例如12h、14h、16h、18h、20h、24h、28h、32h、36h等)。上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
6、所述培养基可以选择lb培养基，培养基配方示例性地可以为：酪蛋白8-12g，酵母提取物3-7g，胰蛋白胨8-12g，nacl 8-12g，水1000ml，ph 7.2，在121℃下灭菌10-25min。
7、第三方面，本专利技术提供第一方面所述的副黄假单胞菌或第二方面所述的副黄假单胞菌发酵液在制备蛋白酶中的应用。
8、第四方面，本专利技术提供一种制备蛋白酶的方法，所述方法包括：在培养基中接种第一方面所述的副黄假单胞菌进行发酵培养生产蛋白酶。
9、第五方面，本专利技术提供第一方面所述的副黄假单胞菌或第二方面所述的副黄假单胞菌发酵液在制备嗜铁素中的应用。
10、第六方面，本专利技术提供一种制备嗜铁素的方法，所述方法包括：在培养基中接种第一方面所述的副黄假单胞菌进行发酵培养生产嗜铁素。
11、第七方面，本专利技术提供第一方面所述的副黄假单胞菌或第二方面所述的副黄假单胞菌发酵液在防治由植物病原菌引起的植物病害中的应用。
12、优选地，所述植物病原菌包括烟草疫霉菌(phytophthora nicotianae)、烟草赤星菌(alternaria alternata(fr)keissler)、烟草靶斑菌(rhizoctonia solani kühn)或水稻纹枯病菌(rice sheath blight)中的任意一种或至少两种的组合。
13、本专利技术所涉及的yc15菌株对多种植物病原真菌具有显著的抑制性，对烟草疫霉菌、烟草赤星菌、烟草靶斑菌和水稻纹枯病菌具有广谱抑菌效果，能够作为生防菌防治多种植物病害。
14、第八方面，本专利技术提供一种防治由植物病原菌引起植物病害的菌剂，所述菌剂中的菌株包括第一方面所述的副黄假单胞菌(pseudomonas parafulva)yc15菌株。
15、第九方面，本专利技术提供一种防治植物病害的方法，所述方法包括：向未感染或已感染植物病原菌的植物施用第八方面所述的菌剂。
16、优选地，所述植物病原菌包括烟草疫霉菌(phytophthora nicotianae)、烟草赤星菌(alternaria alternata(fr)keissler)、烟草靶斑菌(rhizoctonia solani kühn)或水稻纹枯病菌(rice sheath blight)中的任意一种或至少两种的组合。
17、相对于现有技术，本专利技术具有以下有益效果：
18、本专利技术从广东省韶关市马市镇烟草根际土中分离获得并保藏了一株新的能够分泌蛋白酶和嗜铁素且具有抗植物病原菌性能的副黄假单胞菌，将其命名为副黄假单胞菌(pseudomonas parafulva)yc15菌株，该菌株具有产蛋白酶能力，在常见发酵培养基中培养均能产生蛋白酶，在lb培养基中的酶活能达到87.29u/ml，能用于蛋白酶的制备；其次，该菌具有产嗜铁素能力，在嗜铁素培养基中培养能产生橙红色圈，能用于植物促生的制备；同时，该菌株还具有广谱的抑菌作用，对多种植物病原真菌：烟草疫霉菌、烟草赤星菌、烟草本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌，其特征在于，所述产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌命名为副黄假单胞菌(Pseudomonasparafulva)YC15菌株，保藏编号为GDMCC No:64249，保藏日期为2024年01月05日。
2.一种产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌发酵液，其特征在于，所述发酵液的制备方法包括：将活化后的权利要求1所述的副黄假单胞菌(Pseudomonasparafulva)YC15菌株接种于培养基中在25-30℃下培养12-36h。
3.权利要求1所述的副黄假单胞菌或权利要求2所述的副黄假单胞菌发酵液在制备蛋白酶中的应用。
4.一种制备蛋白酶的方法，其特征在于，所述方法包括：在培养基中接种权利要求1所述的副黄假单胞菌进行发酵培养生产蛋白酶。
5.权利要求1所述的副黄假单胞菌或权利要求2所述的副黄假单胞菌发酵液在制备嗜铁素中的应用。
6.一种制备嗜铁素的方法，其特征在于，所述方法包括：在培养基中接种权利要求1所述的副黄假单胞菌进行发酵培养生产嗜铁素。p>
7.权利要求1所述的副黄假单胞菌或权利要求2所述的副黄假单胞菌发酵液在防治由植物病原菌引起的植物病害中的应用；
8.一种防治由植物病原菌引起植物病害的菌剂，其特征在于，所述菌剂中的菌株包括权利要求1所述的副黄假单胞菌(Pseudomonas parafulva)YC15菌株。
9.一种防治植物病害的方法，其特征在于，所述方法包括：向未感染或已感染植物病原菌的植物施用权利要求8所述的菌剂。
10.根据权利要求9所述的防治植物病害的方法，其特征在于，所述植物病原菌包括烟草疫霉菌、烟草赤星菌、烟草靶斑菌或水稻纹枯病菌中的任意一种或至少两种的组合。
...【技术特征摘要】
1.一种产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌，其特征在于，所述产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌命名为副黄假单胞菌(pseudomonasparafulva)yc15菌株，保藏编号为gdmcc no:64249，保藏日期为2024年01月05日。
2.一种产蛋白酶和嗜铁素且抗植物病原菌的副黄假单胞菌发酵液，其特征在于，所述发酵液的制备方法包括：将活化后的权利要求1所述的副黄假单胞菌(pseudomonasparafulva)yc15菌株接种于培养基中在25-30℃下培养12-36h。
3.权利要求1所述的副黄假单胞菌或权利要求2所述的副黄假单胞菌发酵液在制备蛋白酶中的应用。
4.一种制备蛋白酶的方法，其特征在于，所述方法包括：在培养基中接种权利要求1所述的副黄假单胞菌进行发酵培养生产蛋白酶。
5.权利要求1所述的副黄假...
【专利技术属性】
技术研发人员：王寒，刘建春，罗思维，张玺，高卫锴，刘丽，战磊，王玉胜，黄嘉杰，翟生，古政坤，舒灿伟，李淮源，刘小雪，廖思思，刘明伟，孙思，
申请(专利权)人：广东中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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