一种烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，公开了一种烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体及其应用。本发明专利技术将烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶的氨基酸序列进行了以下位点单点突变或组合突变得到：(1)第97位丝氨酸S突变为丙氨酸A；(2)第10位谷氨酰胺Q突变为丙氨酸A；(3)第119位苯丙氨酸F突变为色氨酸W。本发明专利技术提供的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体活性、催化效率均较野生型都有显著的提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，尤其涉及一种烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体及其应用。

技术介绍

1、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad)是一种重要的辅酶，在所有活细胞中是至关重要的分子，与其磷酸化和还原形式(nadp，nadh和nadph)在生命体中可以接受和供给氢化物，充当电子载体，参与各种酶促氧化-还原反应，在细胞代谢和能量生产中发挥这种要的作用，并作为nad依赖信号转导的底物。

2、l-草铵膦(l-ppt)是世界范围内使用较多的广谱灭生性除草剂，具有作用范围广、低毒、高效率和环境相容性好等特点。通过外源添加nad，逐步参与反应进行多酶级联催化ppo可以进行l-ppt的高效生产。

3、nad的合成方法有化学法和生物法，化学合成法有较多的不足，如：工艺繁琐，反应周期长，纯化操作复杂，产物纯化率低，收率低。而且化学操作过程还有很多过硅胶柱和色谱柱的操作，时间成本大，在工业应用上会收到一定的限制。

4、nad的生物合成方法包括酵母发酵法和酶法合成法。申请公布号为cn112322511a的中国专利，公开了湖州颐盛生物科技有限公司以产nad本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体，其特征在于：由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶进行以下位点单点突变或组合突变得到：(1)第97位丝氨酸S突变为丙氨酸A；(2)第10位谷氨酰胺Q突变为丙氨酸A；(3)第119位苯丙氨酸F突变为色氨酸W。

2.如权利要求1所述烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体的编码基因。

3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于：核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

4.携带权利要求2所述的编码基因的重组表达载体。

5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体为质粒...

【技术特征摘要】

1.一种烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体，其特征在于：由氨基酸序列如seq id no.1所示的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶进行以下位点单点突变或组合突变得到：(1)第97位丝氨酸s突变为丙氨酸a；(2)第10位谷氨酰胺q突变为丙氨酸a；(3)第119位苯丙氨酸f突变为色氨酸w。

2.如权利要求1所述烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体的编码基因。

3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于：核苷酸序列如seq id no.4所示。

4.携带权利要求2所述的编码基因的重组表达载体。

5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体为质粒、噬菌体或病毒载体。

6.携带权利要求2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹树平，谢金燕，薛亚平，沈其，程峰，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：