基于RPA技术野外快速检测鳄雀鳝的引物探针组合、试剂盒及方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体公开了基于RPA技术野外快速检测鳄雀鳝的引物探针组合、试剂盒及方法。本发明专利技术创新设计方法，筛选出三种优势鳄雀鳝RPA引物探针组合，结合环境DNA技术和侧流层析试纸条检测法，建立了一种鳄雀鳝的RPA‑LFD检测方法。该方法操作简便、灵敏性高、特异性强、短时间内实现结果可视，且不需要精密仪器，在38℃、50min内即可得到检测结果，适合野外快速监测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，涉及一种入侵物种初期监测的方法，具体为基于rpa技术野外快速检测鳄雀鳝的引物探针组合、试剂盒及方法。

技术介绍

1、鳄雀鳝本是北美特有的淡水鱼，因其特别的长相和凶猛的习性被引入国内作为观赏鱼。由于随意放生，鳄雀鳝在中国淡水水体中已频繁现身。作为肉食性鱼类及顶级捕食者，鳄雀鳝会大量捕食其入侵水体流域中的各种鱼类，导致本地种群退化，造成生物多样性的损失。长此以往，水体中的物种分布会发生变化，原有水体生态系统的稳定性将被打破，会威胁人类健康及社会经济。目前，鳄雀鳝在国内无法通过生物防治的方法清除。传统的入侵物种检测和监测方法(如视觉调查法和个体计数法)需要耗费大量时间和人力，无法满足快速大批量监测的需求，无法在物种入侵初期达到监测目的和有效预防。

2、环境dna(environmental dna，简称edna)技术是一种基于生物体在环境中释放的dna片段进行检测和分析的新兴技术，生物体通过蜕皮、粪便、尿液、孢子、鳃腔粘液等方式，在环境中释放dna片段，这些dna片段称为环境dna。聚合酶链式反应(polymerase chain本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.基于RPA技术野外快速检测鳄雀鳝的引物探针组合，其特征在于：选自以下三组之一：

2.基于RPA技术野外快速检测鳄雀鳝的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的基于RPA技术野外快速检测鳄雀鳝的引物探针组合。

3.基于RPA技术野外快速检测鳄雀鳝的方法，其特征在于：包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的基于RPA技术野外快速检测鳄雀鳝的方法，其特征在于：步骤S3中，RPA扩增的反应体系为：10μM的上下游引物各2μL、10μM的探针0.6μL、干粉反应管、buffer A 29.4μL、buffer B 2.5μL、DNA模板2μL、无酶无菌水11...

【技术特征摘要】

1.基于rpa技术野外快速检测鳄雀鳝的引物探针组合，其特征在于：选自以下三组之一：

2.基于rpa技术野外快速检测鳄雀鳝的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的基于rpa技术野外快速检测鳄雀鳝的引物探针组合。

3.基于rpa技术野外快速检测鳄雀鳝的方法，其特征在于：包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的基于rpa技术野外快速检测鳄雀鳝的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晨虹，李舒意，林晓龙，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：