【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体是桑叶多糖在制备治疗或预防hcmv药物中的应用。
技术介绍
1、人巨细胞病毒(hcmv)属于β疱疹病毒家族，是一种含有包膜的双链dna病毒，基因组大小为235kb，编码至少165种蛋白质。hcmv保持在潜伏期或低水平状态，在临床上是无法检测到，所以hcmv感染呈现无症状形式。但是hcmv感染在一些特定的高危人群中具有严重危险性，特别是在免疫功能低下的患者中，包括hiv感染者和器官移植受体患者以及老年人。同时，hcmv感染是导致新生儿缺陷的主要因素之一，也是引起感音神经性听力损失和神经功能障碍的主要原因。另外，hcmv感染也是动脉粥样硬化、冠状动脉再狭窄和炎症性肠病等疾病的重要因素。
2、目前，尽管在hcmv疫苗方面取得了一些进展，但是临床上还没有上市的疫苗可用。更昔洛韦，膦甲酸和西多福韦等是临床上常用的抗hcmv药物，它们都是作为病毒dna聚合酶抑制剂用于抗hcmv的感染。但是随着耐药毒株的出现，严重降低了这些药物使用的有效性，而且这些药物还会产生明显的不良反应，如骨髓抑制、肾毒性、中性粒细胞减少、血小板减少、电解质紊乱等。因此，对人巨细胞病毒感染者进行积极有效的治疗，是提高出生人口素质和提高免疫功能低下个体生活质量的重要手段。
3、桑(morus alba l.)是桑科桑属落叶乔木植物，原产我国中部，现东北至西南各省均有栽培。《本草纲目》记载“桑可以祛风湿，治风寒湿痹、脚气、浮肿，肌体风痒；根皮可以泻肺平喘、利水消肿，治肺热咳嗽、水肿喘息、小便不利”。但是到目前为止，桑叶包括
技术实现思路
1、为了解决上述现有技术中的不足，本专利技术的目的是进行系列生物学实验，提供一种毒副作用小，安全有效的抑制hcmv的药物。
2、本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：
3、本专利技术提供了桑叶多糖在制备治疗和/或预防hcmv药物中的应用。
4、所述桑叶多糖的制备方法包括如下步骤：
5、1)取桑叶细粉加入到三颈烧瓶中，加入石油醚，在水浴锅中加热，在70℃下回流脱脂1-2次，每次回流一小时，然后过滤干燥；回流完毕后，用布氏漏斗抽滤，将滤饼抽干，并在低温下，放入烘干箱中烘干；
6、2)取经过前处理后的桑叶细粉，加入蒸馏水进行提取，在90℃下提取两次；第一次提取一个半小时，第二次提取一小时，在90℃的恒温提取过程中需要用搅拌器不断搅拌，并用保鲜膜封住烧杯口；待提取液体冷却后，过滤；将过滤后的液体用旋转蒸发仪加热蒸发浓缩，浓缩至原体积的十分之一左右；将浓缩液装入500da的透析袋中浓缩样品，将透析袋中的浓缩液进行过滤、浓缩、醇沉，将滤饼放入研钵中用红外灯烘干并称重。
7、所述的应用，步骤1)中桑叶细粉与石油醚的重量体积比为1:5。
8、所述的应用，步骤1)中烘干箱的温度为45℃。
9、所述的应用，步骤2)中桑叶细粉与蒸馏水的重量体积比为1:30。
10、所述的应用，步骤2)中醇沉时使用乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:4。
11、桑叶多糖通过抑制hcmv立即早期蛋白ie1/2，早期蛋白p52的表达以及立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数的方式抑制hcmv复制。
12、本专利技术生物学实验的研究结果表明：
13、1、桑叶多糖mp单独处理hcmv宿主细胞wi-38，在1.5625μg/ml、3.125μg/ml、6.25μg/ml、12.5μg/ml浓度梯度对wi-38没有表现出明显的细胞毒性，当桑叶多糖mp的浓度达到25μg/ml和50μg/ml时具有细胞毒性，100μg/ml时细胞毒性极大。
14、2、桑叶多糖mp在5μg/ml、10μg/ml的浓度都能明显缓解hcmv引起的wi-38细胞病变效应，浓度为2.5μg/ml时，对hcmv感染引起的细胞病变效应缓解不明显，其中10μg/ml桑叶多糖mp处理的效果与200μg/ml的阳性药物pfa效果相当。
15、3、桑叶多糖mp在5μg/ml、10μg/ml的浓度都能够显著抑制hcmv立即早期蛋白ie1/2以及早期蛋白p52在wi-38中的表达。显示桑叶多糖具有明显的抗hcmv作用。
16、4、桑叶多糖mp在5μg/ml、10μg/ml的浓度可以显著降低hcmv立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数。显示桑叶多糖具有明显的抗hcmv作用。
17、本专利技术所述的药物还包括药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂。
18、本专利技术所述的药物的制剂为液体制剂、固体制剂或半固体制剂，例如，片剂、粉末剂、胶囊、溶液、分散液、混悬剂、糖浆、喷雾、凝胶、乳状液、凝胶、贴片等。
19、本专利技术的有益效果如下：本专利技术通过系列生物学实验发现并证明，桑叶多糖mp对hcmv立即早期蛋白ie1/2，早期蛋白p52以及立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数都有显著的抑制作用，对hcmv感染具有显著的预防和治疗作用，毒副作用小，安全有效，可以用于hcmv的感染，具有良好的应用前景。
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1.桑叶多糖在制备治疗或预防HCMV药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于桑叶多糖通过对HCMV立即早期蛋白IE1/2，早期蛋白p52以及立即早期基因UL123、早期基因UL44和晚期基因UL32的DNA拷贝数的抑制来抑制HCMV。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物还包括药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物的制剂为液体制剂、固体制剂或半固体制剂。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述桑叶多糖的制备方法包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于步骤1）中桑叶细粉与石油醚的重量体积比为1:5。
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于步骤1）中烘干箱的温度为45℃。
8.如权利要求5所述的应用，其特征在于步骤2）中桑叶细粉与蒸馏水的重量体积比为1:30。
9.如权利要求5所述的应用，其特征在于步骤2）中醇沉时使用乙醇，浓缩液与乙醇的体积比为1:4。
【技术特征摘要】
1.桑叶多糖在制备治疗或预防hcmv药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于桑叶多糖通过对hcmv立即早期蛋白ie1/2，早期蛋白p52以及立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数的抑制来抑制hcmv。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物还包括药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物的制剂为液体制剂、固体制剂或半固体制剂。
<...【专利技术属性】
技术研发人员：毛根祥，王三应，张忠山，林萍，苏慧丽，孙川，张婧，吴辛娜，周叙强，
申请(专利权)人：浙江医院，
类型：发明
国别省市：
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