【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及卵母细胞冷冻，具体为一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法与应用。
技术介绍
1、猪成熟卵母细胞冷冻对种质资源库建立及生物医学研究均具有重要意义。早在1958年就出现哺乳动物的卵母细胞保存，一直到20多年后，在老鼠的卵母细胞开展低温生物研究，并且冷冻与解冻后产生了活的后代，后来就相继在其它的物种中实现，虽然取得了巨大的突破，但是在临床上的成功率还是很低。猪卵母细胞的玻璃化冷冻保存指的是在超低温环境下抑制猪卵母细胞的新陈代谢活动，使卵母细胞能够长期的保存却不失去活性的一种保存技术。猪卵母细胞冷冻保存方法主要为程序化冷冻方法和玻璃化冷冻方法。在实验研究中表明，猪卵母细胞的玻璃化冷冻方法优于程序化冷冻方法。
2、目前，猪卵母细胞冷冻存活率较低，不同实验室冻存效率差异较大(10％-70％)，冷冻效率无法满足生产需要，仍停留在科研阶段，亟需开发有效的超低温保存方法。
3、为此，我们提出一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法与应用。
技术实现思路
1、为了弥补...
【技术保护点】
1.一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于，该方法包含以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于：所述步骤S1中的培养液为TL﹣HEPES﹣0.3％BSA液，所述培养液中添加450μM的苯乙双胍。
3.根据权利要求2所述的一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于：所述步骤S1中预处理的时间为1h。
4.根据权利要求1所述的一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于：所述步骤S2中平衡液由常规培养液、胎牛血清、维生素B12、叶酸、乙二醇、二甲基亚砜和海藻
【技术特征摘要】
1.一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于，该方法包含以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于：所述步骤s1中的培养液为tl﹣hepes﹣0.3％bsa液，所述培养液中添加450μm的苯乙双胍。
3.根据权利要求2所述的一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于：所述步骤s1中预处理的时间为1h。
4.根据权利要求1所述的一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于：所述步骤s2中平衡液由常规培养液、胎牛血清、维生素b12、叶酸、乙二醇、二甲基亚砜和海藻糖组成。
5.根据权利要求4所述的一种显著提高猪雌性生殖细胞冷冻效果的方法，其特征在于：所述平衡液中各组份含量为：胎牛血清的体积浓度为10％、维生素b12的浓度为2mg/ml、叶酸的浓度为100μm、乙二醇的体积浓度为7.5％、二甲基亚砜的体积浓度为7.5％、海藻糖的浓度为0.25m、染料木黄酮的浓度为10μm，所述常规培养液为dmem培养液、tcm199培养液、m16或mem培养液。
...【专利技术属性】
技术研发人员：朱向星，唐冬生，严爱芬，刘连，冯娟，张晓莉，张利刚，李继霞，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：
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