一种同时测定尿液中醛固酮，18-羟皮质酮，四氢醛固酮含量的方法技术

一种同时测定尿液中醛固酮、18‑羟皮质酮、四氢醛固酮含量的方法涉及检验领域。该方法首先在尿液样本中加入内标物，然后加入硫酸锌甲醇溶液进行蛋白沉淀，再加入磷酸溶液稀释，涡旋，离心后得到预处理样本；使用固相萃取法对预处理样本进行富集。使用超高效液相色谱‑串联质谱法对富集后的样本进行检测。为了实现结构相似三种物质的分离，基于色谱速率理论(van Deemter方程)，优选使用具有出色分辨率和选择性的核壳结构CORTECS C18+色谱柱，通过优化流动相，A相为乙酸铵水溶液，B相为甲醇，梯度洗脱，实现了三者最佳分离。电喷雾质谱条件为：电离源‑负模式，多反应监测模式。该发明专利技术操作简便，灵敏度高，特异性强，测定结果准确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检验，特别涉及一种同时测定尿液中醛固酮、其前体物18-羟皮质酮和代谢物四氢醛固酮含量的方法。

技术介绍

1、醛固酮(aldosterone，ald)是主要由肾上腺皮质球状带分泌的类固醇激素之一，它是血液中的胆固醇经过一系列的酶促反应合成，是医学实验室检测的核心指标之一。ald在循环中与蛋白质松散结合，其余呈游离状态。ald可作用于肾脏远曲小管和集合管，增加对钠离子的重吸收和促进钾离子的排泄，也可作用于下丘脑促使垂体释放抗利尿激素，进行肾小管对水分的重吸收作用。人体85％的ald在肝脏与葡萄糖醛酸结合被灭活。通过人体内各类型醛固酮的含量可以识别ald代谢与机体功能状态。

2、实验室目前广泛使用放射性免疫法和化学发光发作为醛固酮等小分子激素的检测方法，但放射性免疫法存在放射性污染的问题。化学发光发法提高了精密度，增宽了分析测量范围。但由于抗体和其他的类固醇激素或代谢物发生的交叉反应，使得免疫法容易出现假阳性。气相色谱-质谱法(gc-ms)测定醛固酮需要衍生化，耗时长且步骤繁琐，不适用于实验室。随着电喷雾-质谱(esi-ms)技术的发展本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种使用液相色谱串联质谱同时检测尿液中醛固酮，18-羟皮质酮，四氢醛固酮含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，内标物为醛固酮和18-羟皮质酮的氘代同位素，所述同位素内标为醛固酮-7d，18-羟皮质酮-4d。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，固相萃取的具体过程为：

4.根据权利要求1所述的方法，其中，固相萃取板为MAX固相萃取板。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，流动相流速为0.2～0.5mL/min。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，三种目标化合物的电喷雾电离源电离模式-负模...

【技术特征摘要】

1.一种使用液相色谱串联质谱同时检测尿液中醛固酮，18-羟皮质酮，四氢醛固酮含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，内标物为醛固酮和18-羟皮质酮的氘代同位素，所述同位素内标为醛固酮-7d，18-羟皮质酮-4d。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，固相萃取的具体过程为：

4.根据权利要求1所述的方法，其中，固相萃取板为max固相萃取板。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，流动相流速为0.2～0.5ml/min。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，三种目标化合物的电喷雾电离源电离模式-负模式...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜振霞，胡滨，董浩航，陈宝荣，周剑峰，陈建春，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：