具有改进的PAM特异性的新型小RNA可编程核酸内切酶系统及其用途技术方案

本文描述的是使用新型M‑SmallCas9核酸酶及其变体用于靶向、编辑或操纵细胞中DNA的新型系统。M‑SmallCas9核酸酶来源于野生型或亲本小II型CRISPR Cas9核酸内切酶，与亲本II型CRISPR Cas9酶结合简单的PAM序列相比表现出提高的保真度，并且是小的核酸内切酶尺寸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本公开内容一般涉及分子生物学领域，具体涉及用于基因编辑的新型核酸酶。

技术介绍

1、在过去几年中，使用crispr(成簇规律间隔短回文重复序列)-cas(crispr相关蛋白)的rna引导的dna靶向原理编辑基因组已被广泛应用。已经描述了三种类型的crispr-cas系统(i型、ii型和iib型、iii型和v型)。用于基因组编辑的crispr-cas的大多数用途都是使用ii型系统。细菌ii型crispr-cas系统提供的主要优势在于对可编程dna干扰的最低要求：由可定制的双rna结构引导的核酸内切酶cas9。如在化脓性链球菌(streptococcuspyogenes)的原始ii型系统中最初证明的那样，反式激活的crispr rna(tracrrna)与前体crispr rna(pre-crrna)的不可变重复序列(invariable repeat)结合，以形成双rna，该双rna对于在cas9存在下通过rnase iii的rna共成熟和通过cas9切割入侵dna都是必需的。如在化脓性链球菌中所证明的，cas9在成熟激活tracrrna和靶向crrna之本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多肽，其选自：

2.一种多肽，其选自：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ IDNO:5。

3.一种多肽，其选自：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5。

4.根据SEQ ID NO:5所述的多肽。

5.一种组合物，其包含

6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述工程化的DNA靶向区段在其3'末端与PAM序列直接相邻，或者这样的PAM序列在其3’部分是DNA靶向序列的一部分。

7.在细胞中或体外的一个或多个位置靶...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种多肽，其选自：

2.一种多肽，其选自：seq id no:1、seq id no:2、seq id no:3、seq id no:4和seq idno:5。

3.一种多肽，其选自：seq id no:3、seq id no:4和seq id no:5。

4.根据seq id no:5所述的多肽。

5.一种组合物，其包含

6.根据权利要求5所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·科宁，F·里奇特，A·尼林克斯，
申请(专利权)人：拜耳公司，
类型：发明
国别省市：