【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学，特别是涉及一种百日咳人源igg抗体参考血清及其制备方法。
技术介绍
1、人源igg抗体是一种在人体免疫系统中发挥关键作用的蛋白质，具有与抗原结合并触发免疫反应的能力。人源igg抗体参考血清是一种用于研究和诊断目的的特殊血清，其中包含了明确定量的人源igg抗体。这种血清通常被用于生物医药研究领域，以帮助科学家们了解人类免疫系统的反应和功能。人源igg抗体参考血清具有多种应用，其中最常见的是用于酶联免疫吸附试验（elisa）免疫学试验中，以检测和定量样品中的igg抗体。由于这种血清来自人类，因此它能够代表人类免疫系统的真实反应，并且与来自其他动物来源的抗体相比，具有更高的交叉反应性和兼容性。
2、除了在免疫学研究中的使用，人源igg抗体参考血清还可以用于研究和诊断一些疾病，例如自身免疫性疾病、感染性疾病和癌症等。通过使用这种血清，科学家们可以更好地了解这些疾病的发病机制和病理生理过程，并开发出更好的诊断方法和治疗策略。
3、总之，人源igg抗体参考血清是一种重要的生物试剂，在生物医药领域的研究和诊断中发挥着至关重要的作用。由于其独特的人类来源和优秀的性能，它已经成为免疫学研究和疾病诊断的重要工具之一。
4、百日咳是一种由百日咳杆菌引起的急性呼吸道传染病，主要通过飞沫传播。百日咳的传染性极强，可以通过飞沫传播，也可通过接触污染物体表面传播。而且百日咳的病程较长，通常需要数周甚至数月才能痊愈。在这期间，患者需要忍受长期的咳嗽和不适，给生活和工作带来很大的不便。同时，由于百日咳的
5、百日咳人源igg抗体参考血清是一种用于检测百日咳杆菌感染的血清学方法。通过检测血清中的igg抗体水平，可以判断患者是否感染了百日咳杆菌，以及感染的时间和病情的严重程度。因此，专利技术一种百日咳人源igg抗体参考血清对于及时诊断百日咳具有重要的参考价值。
技术实现思路
1、为达到上述目的，本专利技术提出了一种百日咳人源igg抗体参考血清的制备方法，包括：
2、将人源血清依次进行热灭活和反复冻融后，经粗筛检测后，分为待调配组和稀释用人源血清组；所述反复冻融具体为先将血清冷冻4小时以上后，取出置于室温缓冻至血清完全溶解，震荡混匀后重复此操作，重复10-20次；
3、含百日咳igg抗体的人源血清分为调配组和稀释液组；
4、将所述调配组和所述稀释液组按适当比例混合后，获得所述百日咳人源igg抗体参考血清。
5、优选的，所述调配组和所述稀释液组混合时，所述调配组的添加量x和所述稀释液组的添加量y通过以下方程式计算：
6、；
7、其中，h表示所述调配组的浓度，浓度单位为iu/ml；l表示所述稀释液组的浓度，浓度单位为iu/ml；m表示所述调配组和所述稀释液组的总体积；1表示所述百日咳人源igg抗体参考血清的浓度为1 iu/ml。
8、优选的，将含百日咳igg抗体浓度较高的血清相混合，获得所述调配组，将含百日咳igg抗体浓度较低的血清相混合，获得所述稀释液组。
9、优选的，将所述调配组和所述稀释液组混合后，获得所述百日咳人源igg抗体参考血清，包括：
10、将所述调配组和所述稀释液组混合后，获得待检样品；
11、获得所述待检样品的吸光度值，利用所述吸光度对所述待检样品进行标准评判，获得标准评判结果；
12、根据所述标准评判结果判断是否需要对所述待检样品进行浓度调整；
13、当判断结果为不需要对所述待检样品进行浓度调整时，所述待检样品即为所述百日咳人源igg抗体参考血清；
14、当判断结果为需要对所述待检样品进行浓度调整时，对所述待检样品进行浓度调整后获得所述百日咳人源igg抗体参考血清。
15、优选的，在获得所述待检样品的吸光度值，利用所述吸光度对所述待检样品进行标准评判，获得标准评判结果时，包括：
16、将所述待检样品按照浓度梯度进行稀释，获得若干稀释样品；
17、将标准品pt-igg按照浓度梯度进行稀释，获得若干标准品，所述标准品pt-igg的浓度梯度与所述待检样品的浓度梯度相同；
18、通过elisa方法检测获取若干所述稀释样品和若干所述标准品的吸光度值，分别对若干所述稀释样品和若干所述标准品的吸光度值进行直线拟合和/或曲线拟合，根据拟合结果对所述待检样品进行标准评判；
19、其中，若干所述稀释样品和若干所述标准品的cv≤10%。
20、优选的，所述直线拟合的方法为平行线拟合法，所述曲线拟合的方法为curve曲线拟合法。
21、优选的，所述平行线拟合法具体为：
22、若干所述标准品的吸光度值中应至少4个点满足线性拟合，且r2≥0.99；
23、若干所述稀释样品的吸光度值中应至少4个点满足线性拟合，且r2≥0.99；
24、由所述稀释样品与所述标准品拟合的直线方程应平行，y=kx+b，k值相等；
25、所述curve曲线拟合法具体为：
26、根据若干所述标准品的吸光度值在curveexpert软件中通过curve finder模块进行拟合曲线搜索，选择拟合度最高，且拟合曲线符合elisa抗原抗体结合反应规律的曲线作为拟合曲线；
27、输入若干所述稀释样品的吸光度值，根据所述拟合曲线计算若干所述稀释样品的浓度值；
28、选择符合稀释比例关系的样品点作为计算基准，反推所述待检样品的浓度。
29、优选的，选择符合稀释比例关系的样品点作为计算基准，反推所述待检样品的浓度后，包括：
30、当若干所述稀释样品和若干所述标准品的吸光度值的拟合曲线不重合时，对所述待检样品的浓度进行调整，直到若干所述稀释样品和若干所述标准品的吸光度值的拟合曲线重合，且总体cv值不大于10%，且若干所述标准品的吸光度值普遍大于若干所述稀释样品时，所述待检样品为所述百日咳人源igg抗体参考血清。
31、优选的，选择浓度≥150iu/ml的所述人源血清进行配伍作为所述待调配组，选择浓度≤20iu/ml的所述人源血清进行配伍作为所述稀释液组。
32、优选的，所述百日咳人源igg抗体参考血清的制备方法还包括：
33、获得所述百日咳人源igg抗体参考血清后，将所述百日咳人源igg抗体参考血清进行冻干，获得人源igg抗体参考血清冻干粉；
34、所述冻干的方法为：将所述本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，所述调配组和所述稀释液组混合时，所述调配组的添加量X和所述稀释液组的添加量Y通过以下方程式计算：
3.根据权利要求2所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，将所述调配组和所述稀释液组混合后，获得所述百日咳人源IgG抗体参考血清，包括：
4.根据权利要求3所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，在获得所述待检样品的吸光度值，利用所述吸光度对所述待检样品进行标准评判，获得标准评判结果时，包括：
5.根据权利要求4所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，所述直线拟合的方法为平行线拟合法，所述曲线拟合的方法为Curve曲线拟合法。
6.根据权利要求5所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，所述平行线拟合法具体为：
7.根据权利要求6所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，选择符合稀释比例
8.根据权利要求1所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，选择浓度≥150IU/mL的所述人源血清进行配伍作为所述待调配组，选择浓度≤20IU/mL的所述人源血清进行配伍作为所述稀释液组。
9.根据权利要求1所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法，其特征在于，所述百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法还包括：
10.一种人源IgG抗体参考血清，其特征在于，所述百日咳人源IgG抗体参考血清通过权利要求1-9任一项所述的百日咳人源IgG抗体参考血清的制备方法制备获得。
...【技术特征摘要】
1.一种百日咳人源igg抗体参考血清的制备方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的百日咳人源igg抗体参考血清的制备方法，其特征在于，所述调配组和所述稀释液组混合时，所述调配组的添加量x和所述稀释液组的添加量y通过以下方程式计算：
3.根据权利要求2所述的百日咳人源igg抗体参考血清的制备方法，其特征在于，将所述调配组和所述稀释液组混合后，获得所述百日咳人源igg抗体参考血清，包括：
4.根据权利要求3所述的百日咳人源igg抗体参考血清的制备方法，其特征在于，在获得所述待检样品的吸光度值，利用所述吸光度对所述待检样品进行标准评判，获得标准评判结果时，包括：
5.根据权利要求4所述的百日咳人源igg抗体参考血清的制备方法，其特征在于，所述直线拟合的方法为平行线拟合法，所述曲线拟合的方法为curve曲线拟合法。
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【专利技术属性】
技术研发人员：彭飞，刘薇，
申请(专利权)人：北京金源利恒生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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