一种耐高温漆酶突变体及其基因、工程菌、制备方法与应用技术

技术编号:41135051 阅读:47 留言:0更新日期:2024-04-30 18:06
本发明专利技术属于生物工程技术领域,具体涉及通过重叠PCR技术进行定点突变获得耐高温的漆酶突变体及其制备与应用。所述漆酶突变体是在SEQ ID NO.1所示野生型漆酶基础上,发生包含D221Y、E231D、Y441H或Y441F突变中的至少一种获得的,相对于野生型,突变体酶活以及在80℃下热稳定性均有不同程度的提高,有利于拓展在降解木质纤维素、纸浆漂白等工业领域中的应用。

【技术实现步骤摘要】

:本专利技术属于生物工程,具体涉及通过重叠pcr技术进行定点突变获得耐高温的漆酶突变体及其制备与应用。


技术介绍

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技术介绍

1、漆酶是一种多酚氧化酶,可以催化酚类、胺类、芳香族等化合物,其结构和功能与抗坏血酸氧化酶、血浆铜蓝蛋白有相似之处,是多铜氧化酶(mcos)家族中的一员;19世纪末,benfield第一次将其以生漆固化的活性物质分离出来并命名为漆酶;漆酶包含四个铜原子,在铜的作用下,能够进行电子传递反应并且不生成其他副产物。因此,漆酶被广泛应用于降解木质纤维素、纸浆漂白、食品工业等工业领域。

2、漆酶的氧化还原电位较低,能够直接氧化一些酚类的底物,但无法直接氧化氧化还原电位较高的非酚类底物。因此,为了扩大漆酶氧化的范围,需要添加某些特定小分子量的化合物(介体)来辅助。介体在循环中被漆酶氧化成自由基形式,自由基作为电子载体与酚类和其他化合物反应,将其氧化,这种反应体系被称为漆酶-介体系统(lms)。

3、漆酶的来源比较广泛,自然界中的漆酶主要来源于植物、昆虫、微生物。其中植物漆酶主要从漆树、茶树、棉花、水稻、梨本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种漆酶突变体,其特征在于,所述漆酶突变体是在SEQ ID NO.1所示野生型漆酶基础上,发生包含D221Y、E231D、Y441H或Y441F突变中的至少一种获得的。

2.如权利要求1所述的一种漆酶突变体,其特征在于,

3.权利要求1或2所述漆酶突变体的编码基因。

4.包含权权利要求3所述突变体编码基因的重组质粒或重组菌株。

5.权利要求4所述重组质粒或重组菌株在生产权利要求1或2所述漆酶突变体中的应用。

6.权利要求1或2所述漆酶突变体的应用。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,是在降解木质纤维素、纸浆...

【技术特征摘要】

1.一种漆酶突变体,其特征在于,所述漆酶突变体是在seq id no.1所示野生型漆酶基础上,发生包含d221y、e231d、y441h或y441f突变中的至少一种获得的。

2.如权利要求1所述的一种漆酶突变体,其特征在于,

3.权利要求1或2所述漆酶突变体的编码基因。

4.包含权权利要求3所述突变体编码基因的重组质粒或重组菌株。

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【专利技术属性】
技术研发人员:刘逸寒杨文华马向阳路福平
申请(专利权)人:天津科技大学
类型:发明
国别省市:

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