System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种调控玉米雌穗发育和产量的方法技术_技高网
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一种调控玉米雌穗发育和产量的方法技术

技术编号:41126848 阅读:4 留言:0更新日期:2024-04-30 17:54
本发明专利技术实施例公开了一种调控玉米雌穗发育和产量的方法,其中,将玉米MiR827基因应用于调控玉米雌穗发育和产量。将miR827序列转入玉米中进行过量表达,具体步骤为:利用限制性内切酶Pacl和Mlul切割pZZ00026‑PM载体,回收载体后将包含miR827的序列片段UBI‑artificial插入至线性化的pZZ00026‑PM载体中,得到重组质粒pZZ00026‑amiR827;将重组质粒pZZ00026‑amiR827利用冻融法导入农杆菌菌株EHA105,获得含有目的片段的重组农杆菌;利用农杆菌侵染法将重组农杆菌转入玉米C01幼胚中,通过共培养、抗性筛选、愈伤组织诱导、继代、分化获得转基因玉米植株。本申请明确了miR827与玉米雌穗发育的关系,验证了该miRNA在玉米高产应用中的重要性,为miR827在玉米及其他植物上提高产量的应用提供了理论依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,尤其涉及一种调控玉米雌穗发育和产量的方法


技术介绍

1、玉米(zea may l.)是当今世界最重要的粮食、饲料、工业原料和能源作物。近年来我国玉米总产的增加依赖于种植面积的扩大,面对土地供给的刚性有限性,持续提升玉米产量具有实际意义和战略前景。

2、玉米产量是一个复杂的数量性状,由相互关联的多基因控制。在特定种植密度下,玉米单位面积产量由穗长、行粒数、百粒重、穗重和籽粒大小所决定。故挖掘调节玉米雌穗发育相关基因、研究其调节机制、培育高产的玉米新品种,是提高玉米产量的最有效途径。随着分子生物学的快速发展,挖掘、验证控制产量性状的基因并整合在植物体内是一种简捷、快速、高效的育种策略。

3、目前,植物microrna(mirna)在籽粒发育过程中的重要性引起了人们的广泛关注。植物mirna为内源性约20-24nt的小rna,其通过碱基互补配对结合靶基因,对靶基因进行剪切降解或抑制其翻译,进而调控植物发育,具有改善作物产量等复杂性状的潜力。近些年的研究表明,mir827家族在植物发育调控中具有重要作用,除了广泛参与植物的胁迫应答,还参与调控植物发育等一系列生理活动。基于小rna测序在玉米三个不同时期的雌穗发育进程中发现81个mirna的差异表达,其中包括mir827。高通量测序发现mir827在高产自交系玉米种子的表达量显著升高,说明mir827调控玉米雌穗和籽粒发育过程可能发挥作用,因此,mir827是潜在的重要雌穗和籽粒发育调节因子。然而目前关于mir827调控玉米的农艺性状未见报道,mir827与雌穗和籽粒发育是否相关还有待进一步验证。


技术实现思路

1、本专利技术实施例提供一种调控玉米雌穗发育和产量的方法。

2、一种玉米mir827基因的应用,用于调控玉米雌穗发育和产量。

3、一种调控玉米雌穗发育和产量的方法,包括:将玉米mir827序列转入玉米中进行过量表达,具体步骤为:

4、利用限制性内切酶pacl和mlul切割pzz00026-pm载体,回收载体后将含有mir827的序列片段ubi-artificial插入至线性化的pzz00026-pm载体中,得到重组质粒pzz00026-amir827;

5、将重组质粒pzz00026-amir827利用冻融法导入农杆菌菌株eha105,获得含有目的片段的重组农杆菌;

6、利用农杆菌侵染法将重组农杆菌转入玉米c01幼胚中,通过共培养、抗性筛选、愈伤组织诱导、继代、分化获得转基因玉米植株。

7、进一步地,还包括:对转基因纯合株系的鉴定,包括:

8、获得t0代种子后在大田进行种植和繁育,每代均采取严格套袋自交的方式连续自交,目的基因pcr检测,3代后获得稳定的纯合株系。

9、进一步地,用northern blot分析纯合株系中mir827的表达。

10、进一步地,目的基因pcr检测的引物为prou1-f、oe-amir-r1、prou2-f、sttm-r3、cas9-f和prou6.1-r。

11、本专利技术提供玉米mir827在调控雌穗和产量中的应用。首次明确了玉米mir827与植物雌穗和籽粒发育的关系,验证了该mirna在玉米雌穗和籽粒大小调控中的重要性,为mir827在提高玉米及其他植物产量的应用上提供了理论依据和利用价值。

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【技术保护点】

1.一种玉米MiR827基因的应用,其特征在于,用于调控玉米雌穗发育和产量。

2.一种调控玉米雌穗发育和产量的方法,其特征在于,包括:将玉米miR827序列转入玉米中进行过量表达,具体步骤为:

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,还包括:对转基因纯合株系的鉴定,包括:

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,用Northern blot分析纯合株系中miR827的表达。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,目的基因PCR检测的引物为ProU1-F、OE-amiR-R1、ProU2-F、STTM-R3、Cas9-F和ProU6.1-R。

【技术特征摘要】

1.一种玉米mir827基因的应用,其特征在于,用于调控玉米雌穗发育和产量。

2.一种调控玉米雌穗发育和产量的方法,其特征在于,包括:将玉米mir827序列转入玉米中进行过量表达,具体步骤为:

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,还包括:对转基因纯合株系的鉴定,包括:

【专利技术属性】
技术研发人员:刘琳陈磊
申请(专利权)人:深圳大学
类型:发明
国别省市:

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