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来自海洋的短小芽孢杆菌4sp5其产蛋白酶的方法与用途技术

技术编号:41124096 阅读:5 留言:0更新日期:2024-04-30 17:50
本发明专利技术是一种来自海洋的短小芽孢杆菌4sp5,属于微生物技术领域。菌株4sp5的菌种保藏号为CGMCC No.29030。本发明专利技术还涉及菌株4sp5的产蛋白酶的方法与用途。短小芽孢杆菌4sp5在20~40℃,pH 6~10,盐度0~6%条件下均可生长,通过产酶方法可以获得优秀的蛋白酶,蛋白酶最适作用温度为60℃,pH为8.0,在温度20~40℃,pH 8~10时均保持较高酶活。在50℃时,保温1 h可以保留58%的酶活力。保藏在pH 6.0条件下,酶活保存较高。还具有以下特征:Na+、K+在10 mM时可以促进酶活,而Fe3+、Zn2+和Cu2+等离子在10 mM时可以抑制蛋白酶的活性,且蛋白酶可以水解原肌球蛋白,具有广范的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种微生物,特别是一种分离自中国江苏省连云港海域的海洋细菌。本专利技术还涉及该菌株产蛋白酶的方法与产品及其用途。


技术介绍

1、蛋白酶 (protease,ec 3.4.2.1)根据水解多肽的方式不同分为内肽酶和外肽酶,在食品、洗涤剂、医药、丝绸、皮革等方面具有广泛的应用。蛋白酶具有底物特异性,针对不同的蛋白资源,选择适宜的蛋白酶,有利于蛋白质的开发利用。海洋低温、低氧、高盐和高渗透压的特殊环境,使海洋微生物具有不同于陆地微生物的独特性质。因此,从海洋中筛选产蛋白酶菌株,其产生的蛋白酶具有新颖的特性。

2、水产品中的钙结合蛋白和原肌球蛋白可引起部分消费者产生过敏。其中原肌球蛋白是甲壳类引起过敏的致敏原。原肌球蛋白是一种酸性糖蛋白,可控制脊椎动物和无脊椎动物肌肉或非肌肉细胞的肌肉收缩,相对分子质量在32 kda至40 kda之间,是虾、蟹等甲壳类动物引起人类过敏的主要抗原。消除原肌球蛋白的致敏的方法有热处理、辐照、超高压和酶解法等。其中,酶解法具有特异性强、去除率高、加工条件温和、设备投入少的优势。


技术实现思路

1、本专利技术所要解决的问题是针对现有技术的不足,提供一种新的能产蛋白酶的海洋细菌短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5。

2、本专利技术所要解决的另一个技术问题是提供上述短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5产蛋白酶方法与产品及该酶在降解原肌球蛋白中的应用。

3、本专利技术所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本专利技术是一种来自海洋的短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5,其菌种保藏号:cgmcc no. 29030。

4、本专利技术中所涉及的海洋菌株短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5是从中国连云港海虾中分离到的,其菌种保藏号:cgmcc no. 29030。该菌株于2023年11月16日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

5、本专利技术所述的来自海洋的短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5,其进一步优选的技术方案是:短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5的培养条件是:麸皮2 g/l、大豆蛋白胨10 g/l、ph 8,30℃。

6、本专利技术还公开了一种用以上技术方案所述的短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5产产蛋白酶的方法,其特点是:在40℃条件下培养32 h;产酶培养基为:糊精3 g/l、豆粕10 g/l、nacl 10 g/l、初始ph 8.0。

7、本专利技术还公开了一种如所述的产产蛋白酶方法所产蛋白酶,其特点是:蛋白酶在温度20~40℃和ph 8~10条件下稳定,na+、k+在1 mm和10 mm时可以促进酶活。所述的蛋白酶最优作用温度为60℃、最佳ph为9.0。

8、本专利技术一种如以上所述蛋白酶的用途,其特点是:所述的用途为将蛋白酶用于水解原肌球蛋白。

9、与现有技术相比,本专利技术具有以下有益效果:

10、本专利技术提供了一种新的新的能产蛋白酶的海洋细菌短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5。该菌具有优选的特征:最适生长条件为:麸皮2 g/l、大豆蛋白胨10 g/l、ph 8.0,摇床180 r/min, 温度30℃培养,在20~40℃,ph6~10, 盐度0~6%条件下均可生长。

11、短小芽孢杆菌( bacillussp.)4sp5通过产酶方法可以获得优秀的蛋白酶,具有以下特征:最适作用温度为60℃,ph为8.0,在温度20~40℃,ph8~10时均保持较高酶活。在50℃时,保温1 h 可以保留58%的酶活力。保藏在ph 6.0条件下,酶活保存较高。还具有以下特征:na+、k+在10 mm时可以促进酶活,而fe3+、zn2+和cu2+等离子在10 mm时可以抑制蛋白酶的活性,且蛋白酶可以水解原肌球蛋白,具有广范的应用前景。

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【技术保护点】

1.一种来自海洋的短小芽孢杆菌(Bacillussp.)4sp5,其特征在于:其菌种保藏号:CGMCC No. 29030。

2.根据权利要求1所述的来自海洋的短小芽孢杆菌(Bacillussp.)4sp5,其特征在于:短小芽孢杆菌(Bacillussp.)4sp5的培养条件是:麸皮2 g/L、大豆蛋白胨10 g/L、pH 8,30℃。

3.一种用权利要求1或2所述的短小芽孢杆菌(Bacillussp.)4sp5产产蛋白酶的方法,其特征在于:在40℃条件下培养32 h;产酶培养基为:糊精3 g/L、豆粕10 g/L、NaCl 10 g/L、初始pH 8.0。

4.一种如利要求3所述的产产蛋白酶方法所产蛋白酶,其特征在于:蛋白酶在温度20~40℃和pH 8~10条件下稳定,Na+、K+在1 mM和10 mM时可以促进酶活。

5.根据权利要求4所述的蛋白酶,其特征在于:蛋白酶作用温度为60℃、pH为9.0。

6.一种如权利要求根据权利要求4所述蛋白酶的用途,其特征在于:所述的用途为将蛋白酶用于水解原肌球蛋白。

【技术特征摘要】

1.一种来自海洋的短小芽孢杆菌(bacillussp.)4sp5,其特征在于:其菌种保藏号:cgmcc no. 29030。

2.根据权利要求1所述的来自海洋的短小芽孢杆菌(bacillussp.)4sp5,其特征在于:短小芽孢杆菌(bacillussp.)4sp5的培养条件是:麸皮2 g/l、大豆蛋白胨10 g/l、ph 8,30℃。

3.一种用权利要求1或2所述的短小芽孢杆菌(bacillussp.)4sp5产产蛋白酶的方法,其特征在于:在40℃条件下培养3...

【专利技术属性】
技术研发人员:王淑军白玥吴一卓章均哲周俊栏吕明生张磊亢新鑫
申请(专利权)人:江苏海洋大学
类型:发明
国别省市:

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