【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物组织培养，具体涉及一种利用滇黄精薄层细胞的组织培养方法及其应用。
技术介绍
1、滇黄精(polygonatum kingianum coll.et hemsl.)为百合科(liliaceae)黄精属(polygonatum)多年生草本植物，主要分布在云南省、广西壮族自治区等地，生长在海拔2000～3900m的阴湿林地和灌木丛中，其根状茎、种子等器官均可作为外植体。由于对滇黄精的过度开采，野生资源越来越匮乏。传统的滇黄精繁殖方法有种子繁殖、根茎繁殖和组培繁殖，但因种子和根茎繁殖周期较长，耗材量大，成活率低等缺点，无法满足市场需求，而组织培养可以解决这一问题，不仅培养周期短，繁殖率高，且不受季节的影响。因此，采用组织培养方法对滇黄精快速繁殖是解决资源短缺的有效方法之一。
2、近几年兴起的滇黄精组织培养技术，虽然很好地解决了种子繁殖和根茎繁殖方式所面对的种子萌发率低、育苗生长周期长、根茎繁殖系数低、成本高的问题，但大多程序复杂，依然存在繁殖速度慢、成活率低等问题。例如，申请号为201510420973.5，专利技术名称为一种滇黄精种子一步成苗的组培方法的中国专利，选取8成熟果实，置于4℃冰箱中7天；将经处理的种子接种于盛有ms+ba 0.5mg/l培养基的培养瓶中，在温度为25℃±2℃，光照时间为12～14h/天，光照强度为150lx条件下培养至黄精种子萌发2片真叶时，将培养瓶置于培养温度为25℃±2℃，光照时间为12h/天，光照强度为1500lx条件下继续培养至生根。该滇黄精组培方法从种子接种一步培养成
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供弥补现有技术的不足，缩短滇黄精的育苗时间，提高滇黄精的组培苗的成活率和成苗率。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供了一种滇黄精的组织培养方法，包括如下步骤：
3、利用萌发培养基对滇黄精外植体切片进行预培养，将预培养所得不定芽切成单芽后转接于诱导培养基中进行诱导培养，生成新的不定芽；
4、将新的不定芽转接于新的萌发培养基中进行成苗培养，得到滇黄精组培苗；
5、所述滇黄精外植体切片厚度为1mm；
6、所述预培养的温度为23～27℃、光照强度为1500～2000lx，每天光照时间为16h；
7、所述诱导培养的温度为23～27℃、光照强度为1500～2000lx，每天光照时间为16h；
8、所述成苗培养的温度为23～27℃、光照强度为1500～2000lx，每天光照时间为16h；
9、所述诱导培养基以ms培养基为基础培养基，包括如下浓度的成分：iba 1mg/l、蔗糖20g/l、植物凝胶3g/l和活性炭1g/l；
10、所述萌发培养基以ms培养基为基础培养基，不包括植物生长调节剂，包括如下浓度的成分：蔗糖20g/l、植物凝胶3g/l和活性炭1g/l。
11、优选的，所述诱导培养基还包括6-ba 1mg/l。
12、优选的，所述滇黄精外植体切片的制备包括：沿主生长点垂直切线方向横向切割，得到所述滇黄精外植体切片。
13、优选的，所述滇黄精外植体包括去除种子、胚芽和胚根后的滇黄精类圆球茎。
14、优选的，对消毒后的滇黄精种子进行萌发培养，得到所述滇黄精类圆球茎。
15、优选的，所述萌发培养的条件为：25℃黑暗培养。
16、优选的，所述消毒的方式包括：体积浓度为75％的乙醇溶液消毒30s后，用体积浓度为2％的nadcc消毒20min。
17、本专利技术还提供了上述技术方案所述的组织培养方法在滇黄精种植中的应用。
18、优选的，所述应用包括：将上述技术方案所述的组织培养方法得到的滇黄精组培苗移栽至育苗基质中培养。
19、优选的，所述育苗基质包括腐殖土、红土和珍珠岩；
20、所述腐殖土、红土和珍珠岩的质量比为1：1：1。
21、有益效果：
22、本专利技术依次对厚度为1mm的滇黄精外植体切片(含有薄层细胞)进行预培养、诱导培养和成苗培养，通过控制预培养、诱导培养和成苗培养的培养条件，诱导培养15～20d即可产生新的不定芽，出芽率达到76％，继续成苗培养2个月即可获得生长状态良好的滇黄精幼苗，将所述滇黄精组培苗移栽至育苗基质后生长良好，植株成活率达到90％以上。本专利技术组织培养方法极大地缩短了滇黄精的育苗时间，成苗率高、成活率。
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1.一种滇黄精的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于，所述诱导培养基还包括6-BA1mg/L。
3.根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于，所述滇黄精外植体切片的制备包括：沿主生长点垂直切线方向横向切割，得到所述滇黄精外植体切片。
4.根据权利要求1或3所述的组织培养方法，其特征在于，所述滇黄精外植体包括去除种子、胚芽和胚根后的滇黄精类圆球茎。
5.根据权利要求4所述的组织培养方法，其特征在于，对消毒后的滇黄精种子进行萌发培养，得到所述滇黄精类圆球茎。
6.根据权利要求5所述的组织培养方法，其特征在于，所述萌发培养的条件为：25℃黑暗培养。
7.根据权利要求5所述的组织培养方法，其特征在于，所述消毒的方式包括：体积浓度为75％的乙醇溶液消毒30s后，用体积浓度为2％的NaDCC消毒20min。
8.权利要求1～7任一项所述的组织培养方法在滇黄精种植中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用包括：将权利要求1
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述育苗基质包括腐殖土、红土和珍珠岩；
...【技术特征摘要】
1.一种滇黄精的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于，所述诱导培养基还包括6-ba1mg/l。
3.根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于，所述滇黄精外植体切片的制备包括：沿主生长点垂直切线方向横向切割，得到所述滇黄精外植体切片。
4.根据权利要求1或3所述的组织培养方法，其特征在于，所述滇黄精外植体包括去除种子、胚芽和胚根后的滇黄精类圆球茎。
5.根据权利要求4所述的组织培养方法，其特征在于，对消毒后的滇黄精种子进行萌发培养，得到所述滇黄精类圆球茎。
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【专利技术属性】
技术研发人员：贾艳霞，郑国伟，于梦雯，陈佳，李文春，徐萍，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：
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