【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物分子生物学的领域，特别涉及一种激发果木群体免疫的方法及其应用。
技术介绍
1、果树、林木等果木常年受到病害侵袭，损失巨大。以柑橘为例，在柑橘的整个寿命周期期间，柑橘可能被柑橘黄龙病菌、柑橘裂皮病病毒、柑橘碎叶病病毒、柑橘衰退病病毒、温州蜜柑萎缩病病毒、柑橘黄脉明病病毒、柑橘褪绿矮缩病病毒、柑橘炭疽病菌、柑橘溃疡病菌和柑橘脚腐病菌等病原菌侵袭。其中柑橘黄龙病、柑橘衰退病以及柑橘裂皮病等，目前主要采用预防的防控方法，但是直接降低柑橘病树中病原体浓度的防控方法较少；柑橘炭疽病、柑橘溃疡病和柑橘脚腐病在目前通过化学农药进行防控，但是在产业上经常出现化学农药过量施用的问题。针对上述柑橘病害，急需开发绿色环保的柑橘病害防控方法。
2、以柑橘为例，已有报道称氨基寡糖素等植物免疫诱抗剂可以在单株柑橘上激发单个柑橘的免疫反应，从而提高单株柑橘对病原菌的抗病性，减少病害侵袭，但是现有植物免疫诱抗剂对柑橘免疫反应的激发一般只是激发单株植物的免疫反应，而无法在更大的种植内，在柑橘群体中激发群体免疫反应，因此急需开发可在更大的种植范围内，在柑橘群体中激发群体免疫的植物免疫诱抗剂。
3、非编码小分子rna(小rna)是一种大小约21-24个碱基的单链rna，广泛存在于植物中。大量的研究表明，小rna通过rna沉默作用参与植物生长发育过程中的重要基因，而小rna的短串联模拟靶标(sttm)序列可以抑制小分子rna的沉默作用，但是小rna的短串联模拟靶标(sttm)序列是否可以在柑橘群体中激发群体免疫，目前相关研究较少
技术实现思路
1、本专利技术的首要目的在于提供mesa在增强果木群体免疫反应中的应用。
2、本专利技术的再一目的在于提供一种核酸分子及其应用。
3、本专利技术的又一目的在于提供一种提激发果木群体免疫的方法及其应用。
4、本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
5、水杨酸甲酯(mesa)在增强果木群体免疫反应中的应用，以提高果木的抗病性。这是基于本专利技术首次发现内源表达或外源施用mesa，可以增强柑橘自身对黄龙病等病害的抗病性；而且，柑橘水杨酸羧基甲基转移酶(samt)的转基因植物能内源表达并释放大量mesa，或在部分植物上外源施用mesa，可以在更大种植范围内诱导植物群体免疫反应，提高柑橘黄龙病耐病性。从机制研究中可发现，该免疫反应并不限于柑橘，也不限于抗黄龙病病原菌。
6、本专利技术中所述的果木包含但不限于柑橘；优选为柑橘。下同。
7、本专利技术中所述的抗病性包含但不限于抗黄龙病病原菌；优选为抗黄龙病病原菌。下同。
8、抑制mir2977沉默功能在增强果木群体免疫反应中的应用。本专利技术首次发现mir2977可负向调控samt的表达，抑制mir2977沉默功能，能有效提高samt的表达，从而提高mesa的产量。
9、所述的抑制mir2977沉默功能是通过sttm技术实现；优选为使用mir2977-sttm转基因果木中实现。
10、所述的mir2977-sttm的序列如seq id no.1所示。
11、一种核酸分子，其名称为mir2977-sttm，核苷酸序列如seq id no.1所示。该核酸分子能用于构建sttm转基因植物，通过抑制mir2977沉默功能，有效提高samt的表达，从而提高mesa的产量。
12、一种重组载体，含有上述核酸分子。该重组载体转入柑橘组织后，能有效对上述核酸分子进行转录。
13、上述重组载体在增强果木群体免疫反应中的应用。
14、一种激发果木群体免疫的方法，包括如下方式中的至少一种：
15、(1)对部分果木植株外源施用mesa；
16、(2)将上述核酸分子或上述重组载体转入果木植株中。
17、方式(1)中所述的施用的方式为：在种植范围内的局部植物上每隔15天喷施一次mesa溶液，连续处理3个月以上；或者在种植范围内局部种植高水平表达mesa的转基因植株，通过其释放的mesa提高周边植物的群体免疫反应；或者将释放mesa的植物和普通植物种植在相对密闭的空间，通过提高空气中的mesa的相对含量，从而在更大的种植范围内诱导果木群体免疫反应。
18、所述的mesa溶液的浓度为0.1mmol/l以上，更优选为0.1～1mmol/l。
19、所述的处理的时间优选为6个月；更优选为12个月。
20、方式(2)中所述的转入的方式包括农杆菌转染和电转化转染方式。
21、一种增强果木抗病性的方法，是将普通果木与上述激发果木群体免疫的方法所产生的果木植株进行嫁接，从而增强被嫁接果木的抗病性。
22、所述的普通果木即不是用上述激发果木群体免疫的方法所产生的果木植株。
23、本专利技术现对于现有技术具有如下优点和有益效果：
24、本专利技术首次发现内源过表达samt，植株会释放mesa，诱导植物群体免疫反应；或部分植物上外源施用mesa，可以在更大种植范围内诱导植物群体免疫反应；最终提高柑橘黄龙病耐病性。
25、本专利技术首次发现mir2977可负向调控samt的表达，抑制mir2977沉默功能，能有效提高samt的表达和mesa的释放，最终提高柑橘黄龙病耐病性。
26、本专利技术还首次发现一系列具有免疫调节作用的小rna，从而获得一种小rna短串联模拟靶标。该短串联模拟靶标能增强植物的群体免疫反应，提高果木抗病性(包括提高柑橘对黄龙病耐病性)。
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1.水杨酸甲酯(MeSA)在增强果木群体免疫反应中的应用。
2.抑制miR2977沉默功能在增强果木群体免疫反应中的应用。
3.根据权利要求2所述的抑制miR2977沉默功能在增强果木群体免疫反应中的应用，其特征在于：所述的抑制miR2977沉默功能通过使用miR2977-STTM转基因果木中实现；
4.一种用于抑制miR2977沉默功能的核酸分子，其特征在于：所述的核酸分子的名称为miR2977-STTM，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
5.一种重组载体，其特征在于：含有权利要求4所述的核酸分子。
6.权利要求5所述的重组载体在增强果木群体免疫反应中的应用。
7.一种激发果木群体免疫的方法，其特征在于包括如下方式中的至少一种：
8.根据权利要求7所述的激发果木群体免疫的方法，其特征在于：
9.一种增强果木抗病性的方法，其特征在于：是将普通果木与权利要求7或8所述的激发果木群体免疫的方法所产生的果木植株进行嫁接，从而增强被嫁接果木的抗病性。
【技术特征摘要】
1.水杨酸甲酯(mesa)在增强果木群体免疫反应中的应用。
2.抑制mir2977沉默功能在增强果木群体免疫反应中的应用。
3.根据权利要求2所述的抑制mir2977沉默功能在增强果木群体免疫反应中的应用，其特征在于：所述的抑制mir2977沉默功能通过使用mir2977-sttm转基因果木中实现；
4.一种用于抑制mir2977沉默功能的核酸分子，其特征在于：所述的核酸分子的名称为mir2977-sttm，其核苷酸序列如seq id no...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵弘巍，程保平，徐乐，穆罕默德·萨奇布·比拉尔，黄清，周少霞，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：
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