一种用于制备天然组织来源的骺软骨连骨脱细胞材料的试剂盒和脱细胞方法技术

本发明专利技术涉及一种用于制备天然组织来源的骺软骨连骨脱细胞材料的试剂盒和脱细胞方法；所述的试剂盒包括脱细胞液A、脱细胞液B、脱细胞溶液C、脱细胞溶液D及脱细胞溶液E；所述脱细胞液A的溶质为丙酮，脱细胞液B中的溶质为Triton X‑100，所述脱细胞液C的溶质为HTHOPS,所述脱细胞液D的溶质为SDS，脱细胞溶液E的溶质为DNaseⅠ及RNase。本发明专利技术试剂盒对骺软骨连骨生物材料进行脱细胞处理时，操作简单，成本低，且能彻底地清除细胞及其内容物，在完全除去具有免疫原性的细胞及细胞内容物成分的同时，最大程度地保留了骺软骨连骨ECM的完整性，能调控细胞的黏附、迁移和增殖。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及组织工程材料领域，更特别地，涉及一种用于制备天然组织来源的骺软骨连骨脱细胞材料的试剂盒和脱细胞方法。

技术介绍

1、因感染、创伤和关节退行性改变等因素引起的关节炎可以对患者造成持续性疼痛和活动受限，严重影响患者运动功能及生活质量。据世界卫生组织估计，60岁以上的男性有9.6％，女性有18.0％患有症状性骨关节炎，80％的患者活动受限，25％的患者不能进行日常主要活动。关节软骨的愈合能力差，骨关节炎或软骨缺损后透明软骨自然愈合能力有限，而这些缺损可导致灾难性的退行性关节炎。关节炎的本质是因软骨退变或软骨缺损导致关节持续摩擦，导致软骨细胞死亡及其细胞外基质的退变及崩解，进而产生大量炎症介质，从而产生恶性循环。虽然现在已知它是一种复杂的疾病，影响到整个关节，包括软骨、软骨下骨、滑膜和韧带，关节软骨的机械性退化和软骨下骨的交替在其发病机制中起着关键作用。关节软骨和软骨下骨紧密连接，关节软骨的营养供应除了来自关节液以外，软骨下骨的支持也同样重要。软骨下骨的作用不仅仅一种机械支持的作用。最近的证据表明，软骨和软骨下骨之间的相互作用要复杂得多。软骨下骨产生本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于骺软骨连骨生物材料的脱细胞处理的试剂盒，其特征在于：包括脱细胞液A、脱细胞液B、脱细胞溶液C、脱细胞溶液D及脱细胞溶液E组成，其中所述脱细胞液A为体积分数为10-30％的丙酮溶液，脱细胞液B为含有体积分数1-2％的Triton X-100的PBS缓冲液，所述脱细胞液C为含有质量分数为1-2％的3-烯丙氧基-2-羟基-1-丙烷磺酸钠盐的PBS缓冲液,所述脱细胞液D为含有质量分数为1-3％的十二烷基硫酸钠的PBS缓冲液，脱细胞试剂E为含有浓度为0.01-0.10mg/ml的DNaseⅠ及RNase的PBS缓冲液。

2.根据权利要求1所述的一种用于骺软骨连骨生物材料的脱...

【技术特征摘要】

1.一种用于骺软骨连骨生物材料的脱细胞处理的试剂盒，其特征在于：包括脱细胞液a、脱细胞液b、脱细胞溶液c、脱细胞溶液d及脱细胞溶液e组成，其中所述脱细胞液a为体积分数为10-30％的丙酮溶液，脱细胞液b为含有体积分数1-2％的triton x-100的pbs缓冲液，所述脱细胞液c为含有质量分数为1-2％的3-烯丙氧基-2-羟基-1-丙烷磺酸钠盐的pbs缓冲液,所述脱细胞液d为含有质量分数为1-3％的十二烷基硫酸钠的pbs缓冲液，脱细胞试剂e为含有浓度为0.01-0.10mg/ml的dnaseⅰ及rnase的pbs缓冲液。

2.根据权利要求1所述的一种用于骺软骨连骨生物材料的脱细胞处理的试剂盒，其特征在于：在所述脱细胞液a中，所述丙酮溶液体积分数为20％。

3.根据权利要求1所述的一种用于骺软骨连骨生物材料的脱细胞处理的试剂盒，其特征在于：在所述脱细胞液b中，所述triton x-100的体积分数为1％，pbs缓冲液的浓度为0.01m。

4.根据权利要求1所述的一种用于骺软骨连骨生物材料的脱细胞处理的试剂盒，其特征在于：在所述脱细胞溶液c中，所述hthops的质量分数为1％，pbs缓冲液的浓度为0.01m。

5.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：张琪，金可可，陈雷，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：