【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开涉及医学领域，具体地，涉及血液学领域。
技术介绍
1、膜联蛋白a5(annexin a5)属于膜联蛋白家族，是一组在进化过程中高度保守的蛋白。它们在结构上是同源的，被认为是受ca2+调控的膜结合元件。膜联蛋白a5对暴露在外质膜小叶的磷脂酰丝氨酸(ps)具有高度亲和性。除此之外，膜联蛋白a5还可以与几乎所有微小形式的膜囊泡(如血小板、外泌体、甚至纳米结构的脂质体)的任何含有ps的磷脂双分子层结合。众所周知，膜联蛋白a5在医学上具有广泛的用途，可以提供直接的治疗效果。膜联蛋白a5的用途的例子包括，如wo2012120130中所述，预防镰状细胞病患者的血管闭塞性危象；如wo2005099744中所述，用于预防动脉粥样硬化血栓形成和/或斑块破裂；如wo2009077764中所述，用于治疗血管功能障碍、减轻缺血性疼痛和/或血管疾病破裂；如wo2009103977所述预防或治疗术后再狭窄；如wo 2010/069605所述，用于抑制氧化心磷脂(oxcl)的活性，以及用于治疗、预防和/或降低发生心血管疾病、自身免疫性疾病或炎症的风险；以及预防和/或减少手术干预后的围手术期或术后并发症，如wo2012136819所述的血管手术，特别是外周血管手术后的并发症。因此，膜联蛋白a5是一种具有很高治疗价值和潜力的蛋白。最近的研究表明，血红素在溶血过程中与膜联蛋白a5结合，并阻止其与细胞膜磷脂酰丝氨酸的相互作用。因此，这些结果表明，在溶血条件下，膜联蛋白a5的治疗效果可能会减弱。
技术实现思路
0、专
1、本专利技术由权利要求书限定。具体地，本专利技术涉及突变的膜联蛋白a5多肽及其在治疗目的中的用途。
2、专利技术详述：
3、主要定义：
4、本专利技术中所用术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可交换使用，是指任何长度的氨基酸的聚合物。该术语还包括已被修饰的氨基酸聚合物；例如，二硫键形成、糖基化、脂化、磷酸化或与标记组分结合。当在基因治疗的上下文中讨论时，多肽是指各自完整的多肽、或其任何片段或基因工程衍生物，其保留了完整蛋白质的所需生化功能。
5、本专利技术中所用术语“多核苷酸”是指任何长度的核苷酸的聚合形式，包括脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸或其类似物。多核苷酸可以包含修饰的核苷酸，例如甲基化的核苷酸和核苷酸类似物，并且可以被非核苷酸组分中断。如果存在的话，可以在聚合物组装之前或之后对核苷酸结构进行修饰。本专利技术中所用术语多核苷酸是指可互换地指双链和单链分子。除非另有说明或需要，在本专利技术中所述的任何实施例中多核苷酸包括双链形式和已知或预测能够构成双链形式的两个互补单链形式中的每一个。
6、本专利技术中所用表述“衍生自”是指第一组分(例如，第一多肽)或来自该第一组分的信息，被用于分离、衍生或制备不同的第二组分(例如，与第一多肽不同的第二多肽)的过程。
7、本专利技术中所用术语“膜联蛋白a5”具有其在本领域中的一般含义，指的是属于膜联蛋白家族并且以钙依赖性方式结合外部的磷脂酰丝氨酸的多肽。该术语也被称为锚定蛋白cii、膜联蛋白v、膜联蛋白5n钙结合蛋白i(cbp-i)、内毒素ii、脂皮质素v、胎盘抗凝蛋白4(pp4)、胎盘抗凝蛋白i(pap-i)、凝血活酶抑制剂和血管抗凝剂-α(vac-α)。膜联蛋白a5的示例性氨基酸序列如seq id no：1所示。
8、seq id no：1>np_001145.1膜联蛋白a5[智人]
9、maqvlrgtvtdfpgfderadaetlrkamkglgtdeesilltltrsnaqrqeisaafktlfgrdllddlkseltgkfeklivalmkpsrlydayelkhalkgagtnekvlteiiasrtpeelraikqvyeeeygssleddvvgdtsgyyqrmlvvllqanrdpdagideaqveqdaqalfqagelkwgtdeekfitifgtrsvshlrkvfdkymtisgfqieetidretsgnleqlllavvksirspaylaetlyamkgagtdddhtlirvmvsrseidlfnirkefrknfatslysmikgdtsgdykkallllcgedd
10、本专利技术中所用术语“同一性百分比”是指在两个序列间序列共享的相同位置数量的函数(即同一性％＝相同位置的数量/总位置数×100)，考虑到间隙的数量和每个间隙的长度，为了实现两序列优选的对齐方式，需要引入这些间隙数量和每个间隙的长度。序列的比较和两个序列之间的同一性百分比的确定可以使用如下所述的数学算法来完成。两个氨基酸序列之间的同一性百分比可以使用needleman和wunsch算法来确定(needleman,saulb.&wunsch,christian d.(1970)."a general method applicable to the search forsimilarities in the amino acid sequence of two proteins".journal of molecularbiology.48(3):443–53.)。所述两个核苷酸或氨基酸序列之间的同一性百分比也可以使用例如emboss needle(成对比对；可在www.ebi.ac.uk获得)的算法来确定。例如，embossneedle可以与blosum62矩阵、10的“间隙开放惩罚”、0.5的“间隙延伸惩罚”、错误的“末端间隙惩罚”、10的“末端间隙开放惩罚”和0.5的“末端间隙延长惩罚”一起使用。一般来说，所述“同一性百分比”是匹配位置数除以比较位置数再乘以100的函数。例如，如果比对后两个比较序列之间10个序列位置中有6个相同，则同一性为60％。同一性％通常是在执行分析的查询序列的全长上测定的。具有相同初级氨基酸序列或核酸序列的两个分子是相同的，不考虑任何化学和/或生物修饰如何。根据本专利技术，第一氨基酸序列与第二氨基酸序列具有至少90％的同一性是指第一序列与第二氨基酸序列具有90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性。
11、本专利技术中所用术语“突变”具有其在本领域中的一般含义，是指取代、缺失或插入。具体地，术语“取代”是指去除特定位置的特定氨基酸残基并且将另一个氨基酸残基插入相同位置。在说明书中，所述突变是根据标准突变命名法参考的引用。
12、本专利技术中所用术语“磷脂酰丝氨酸”或“ps”具有其在本领域中的一般含义，是指作为细胞膜组分的磷脂。更具体地，ps是一种磷脂，更具体地是一种甘油磷脂，其由以酯键连接至甘油的第一和第二个碳的两个脂肪酸和通过磷酸二酯键连接至甘油的第三个碳的丝氨酸组成。
13、本专利技术中所用术语“血红素”是指卟啉(或其衍生物)的配位化合物和主要是二价或三价铁的化合物，也称为铁卟啉和血红素。在本专利技术中，对所使用的血红素没有特别的限制，并且可以使用天然血红素例如血红素a、血本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种突变的膜联蛋白A5多肽，所述突变的膜联蛋白A5多肽包含与如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列，其中第227位、第228位或第257位中的至少一个氨基酸发生突变。
2.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽，其中，所述第227位、第228位或第257位的氨基酸被取代。
3.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽，其中，所述第227位的氨基酸(R)被氨基酸(A)取代。
4.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽，其中，所述第228位的氨基酸(E)被氨基酸(A)取代。
5.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽，其中，所述第257位的氨基酸(Y)被氨基酸(A)取代。
6.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽，所述突变的膜联蛋白A5多肽包含与如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列，所述氨基酸序列包含选自由R227A、E228A和Y257A组成的组中的至少一个突变位点。
7.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽，所
8.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽，所述突变的膜联蛋白A5多肽包含如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列。
9.一种编码权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽的多核苷酸。
10.一种载体，所述载体包含权利要求9所述的多核苷酸。
11.一种宿主细胞，所述宿主细胞由权利要求9所述的多核苷酸或权利要求10所述的载体转化得到。
12.一种治疗有需求的受试者的方法，包括施用治疗有效剂量的权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽。
13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述受试者患有发生血管内溶血或溶血性贫血的疾病或病症。
14.根据权利要求12所述的方法，其用于预防血栓形成或降低血栓形成的风险。
15.根据权利要求12所述的方法，其用于治疗患有镰状细胞病的患者的血管闭塞疾病。
16.根据权利要求12所述的方法，其用于治疗患有病毒感染如SAR-CoV-2感染的患者的静脉血栓栓塞和动脉血栓形成。
17.一种药物组合物，其中，所述组合物包含一定量的如权利要求1所述的突变的膜联蛋白A5多肽。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种突变的膜联蛋白a5多肽，所述突变的膜联蛋白a5多肽包含与如seq id no：1所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列，其中第227位、第228位或第257位中的至少一个氨基酸发生突变。
2.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白a5多肽，其中，所述第227位、第228位或第257位的氨基酸被取代。
3.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白a5多肽，其中，所述第227位的氨基酸(r)被氨基酸(a)取代。
4.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白a5多肽，其中，所述第228位的氨基酸(e)被氨基酸(a)取代。
5.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白a5多肽，其中，所述第257位的氨基酸(y)被氨基酸(a)取代。
6.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白a5多肽，所述突变的膜联蛋白a5多肽包含与如seq id no：1所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列，所述氨基酸序列包含选自由r227a、e228a和y257a组成的组中的至少一个突变位点。
7.根据权利要求1所述的突变的膜联蛋白a5多肽，所述突变的膜联蛋白a5多肽包含与如seq id no：2、3或4所示的氨...
【专利技术属性】
技术研发人员：O·布兰布鲁特，L·罗曼尼纳，
申请(专利权)人：INSERM法国国家健康医学研究院，
类型：发明
国别省市：
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