【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物制剂，具体涉及米曲霉jaas-32及其在制备黑水虻虫浆蛋白肽中的应用。
技术介绍
1、抗生素的滥用，导致病原菌抗药性增强，催生“超级耐药菌”，抗生素耐药性与安全性已被世界卫生组织列为全球公共卫生的威胁之一。因此，寻找绿色安全高效的抗生素替代品成为行业迫切所需。
2、抗菌肽通常是由多个氨基酸残基组成的小分子多肽，具有较强的热稳定性、水溶性以及广谱高效的抗菌活性。抗菌肽的抗菌机理与抗生素不同，不易产生耐药性菌株。其中，昆虫源抗菌肽因具有良好的抑菌活性、稳定性及安全性，被认为是潜在的抗生素替代品之一，已然成为热点。
3、黑水虻（hermetia illucens），是一种双翅目水虻科扁角水虻属的昆虫，其幼虫可将餐厨垃圾、畜禽粪便、废弃农作物等有机固废转化成富含蛋白及脂肪。黑水虻幼虫是一种优质蛋白资源，富含多种动物所需的氨基酸，也是各种养殖动物及宠物的良好饲料添加剂；如中国专利cn112544783a等很多专利均有报道。黑水虻含有丰富的具有生物活性成分的天然物质，其中包括抗菌肽、抗氧化剂以及免疫调节因子等。
4、因此，如何提升黑水虻虫浆中抗菌肽的含量及其抑菌性能，是黑水虻幼虫成为抗生素替代品的核心竞争力。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供米曲霉jaas-32及其在制备黑水虻虫浆蛋白肽中的应用，通过米曲霉jaas-32发酵样品对黑水虻虫浆的处理，可提高黑水虻虫浆蛋白肽的含量及抑菌性能。
3、本专利技术的第一方面在于，提供米曲霉jaas-32，所述米曲霉jaas-32已于2023年8月10日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，分类命名为 aspergillus oryzae，保藏编号为gdmcc no：63725。
4、本专利技术的第二方面在于，提供一种采用米曲霉jaas-32制备黑水虻虫浆蛋白肽的方法，包括如下步骤：（1）制备黑水虻虫浆；米曲霉jaas-32发酵获得米曲霉发酵样品；（2）将所述的黑水虻虫浆与所述的米曲霉发酵样品混合均匀并进行酶解发酵，得到黑水虻虫浆酶解发酵液。
5、优选地，步骤（1）中，将黑水虻幼虫与水按照质量比5:4~15:4混合匀浆，制备得到黑水虻虫浆。
6、更优选地，将黑水虻幼虫与水按照质量比5:2混合匀浆，即称取黑水虻幼虫200.0g，加入80.0 ml去离子水，在匀浆机中匀浆。
7、更优选地，所述的黑水虻虫为黑水虻幼虫，更优选五日龄期的黑水虻幼虫。
8、优选地，步骤（1）中，挑取米曲霉jaas-32单菌落接入pda液体培养基，培养温度为30～40 ℃，搅拌转速100～200 rpm，培养时间为48～96 h，得到米曲霉种子液；将所述的米曲霉种子液以体积比5%～20%的接种量接种至装有pda液体培养基的发酵罐，培养温度为30～40 ℃，搅拌转速100～400 rpm，空气通气量为0.2～2 vvm，培养时间为48～96 h，获得米曲霉发酵样品。此时米曲霉发酵样品中米曲霉的浓度为1×107~1×108 cfu/ml。
9、优选地，步骤（2）中，每100 g黑水虻虫浆中，加入3~10 ml的米曲霉发酵样品；和/或所述酶解发酵的发酵温度为25~35 ℃，发酵时间为20~40 h。
10、更优选地，每100 g黑水虻虫浆中，加入5 ml的米曲霉发酵样品。
11、本专利技术的第三方面在于，提供上述的方法制备得到的黑水虻虫浆蛋白肽。
12、优选地，所述的黑水虻虫浆蛋白肽的分子量＜10 kda。
13、更优选地，所述的黑水虻虫浆蛋白肽的分子量在1~10 kda范围，更优选3~10 kda范围。
14、本专利技术的第四方面在于，提供上述的黑水虻虫浆蛋白肽在制备抗氧化和/或抑菌产品中的应用。
15、优选地，所述的抑菌包括对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和溶藻弧菌的抑制。
16、优选地，所述的抗氧化和/或抑菌产品包括但不限于饲料添加剂。
17、本专利技术的第五方面在于，提供上述米曲霉jaas-32在提高黑水虻虫浆蛋白肽的含量及抑菌性能中的应用。
18、本专利技术的有益效果在于：
19、本专利技术筛选得到一株米曲霉jaas-32，保藏编号为gdmcc no：63725。将米曲霉jaas-32对黑水虻虫浆进行酶解发酵处理20~40 h，其蛋白多肽（<10 kda）含量是未处理组的1.53倍，游离氨基酸的含量是未处理组的1.41倍，总抗氧化活性是未处理组的1.35倍；对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和溶藻弧菌的抑菌圈直径分别是未处理组的1.62倍，1.17倍和1.45倍。该菌株易培养、生长快、适应性强，基于该菌株，可建立一种低成本、操作简便、高效的提高黑水虻虫浆抗菌性能的工艺。
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1.米曲霉JAAS-32，所述米曲霉JAAS-32已于2023年8月10日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，分类命名为Aspergillus oryzae，保藏编号为GDMCC No：63725。
2.一种采用权利要求1所述的米曲霉JAAS-32制备黑水虻虫浆蛋白肽的方法，包括如下步骤：（1）制备黑水虻虫浆；米曲霉JAAS-32发酵获得米曲霉发酵样品；（2）将所述的黑水虻虫浆与所述的米曲霉发酵样品混合均匀并进行酶解发酵，得到黑水虻虫浆酶解发酵液。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，将黑水虻幼虫与水按照质量比5:4~15:4混合匀浆，制备得到黑水虻虫浆。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，挑取米曲霉JAAS-32单菌落接入PDA液体培养基，培养温度为30～40 ℃，搅拌转速100～200 rpm，培养时间为48～96 h，得到米曲霉种子液；将所述的米曲霉种子液以体积比5%～20%的接种量接种至装有PDA液体培养基的发酵罐，培养温度为30～40 ℃，搅拌转速100～400 rpm，空气通气量为0.2～2vv
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，每100 g黑水虻虫浆中，加入3~10 mL的米曲霉发酵样品；和/或所述酶解发酵的发酵温度为25~35 ℃，发酵时间为20~40h。
6.权利要求2~5任意一项所述的方法制备得到的黑水虻虫浆蛋白肽。
7.根据权利要求6所述的黑水虻虫浆蛋白肽，其特征在于，所述黑水虻虫浆蛋白肽的分子量＜10 kDa。
8.权利要求6所述的黑水虻虫浆蛋白肽在制备抗氧化和/或抑菌产品中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的抑菌包括对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和溶藻弧菌的抑制。
10.权利要求1所述的米曲霉JAAS-32在提高黑水虻虫浆蛋白肽的含量及抑菌性能中的应用。
...【技术特征摘要】
1.米曲霉jaas-32，所述米曲霉jaas-32已于2023年8月10日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，分类命名为aspergillus oryzae，保藏编号为gdmcc no：63725。
2.一种采用权利要求1所述的米曲霉jaas-32制备黑水虻虫浆蛋白肽的方法，包括如下步骤：（1）制备黑水虻虫浆；米曲霉jaas-32发酵获得米曲霉发酵样品；（2）将所述的黑水虻虫浆与所述的米曲霉发酵样品混合均匀并进行酶解发酵，得到黑水虻虫浆酶解发酵液。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，将黑水虻幼虫与水按照质量比5:4~15:4混合匀浆，制备得到黑水虻虫浆。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，挑取米曲霉jaas-32单菌落接入pda液体培养基，培养温度为30～40 ℃，搅拌转速100～200 rpm，培养时间为48～96 h，得到米曲霉种子液；将所述的米曲霉种子液以体积比5%～20%的接...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭亭，袁霜霜，孙铭楠，叶小梅，杜静，王聪，朱飞，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：
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