有关脑膜炎球菌的已有观念是抗血清群Ａ、Ｃ、Ｗ１３５和Ｙ的免疫应该基于四种不同的夹膜多糖，而抗血清群Ｂ的免疫不应该基于夹膜多糖。与此不同的是，本发明专利技术利用多肽抗原和／或ＯＭＶ进行抗血清群Ａ、Ｃ、Ｗ１３５和Ｙ（特别是抗血清群Ｙ）的免疫。血清群Ｂ多肽也可以产生这种保护作用，因此一种多肽疫苗就可用于诱导产生抗所有血清群Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｗ１３和Ｙ的保护作用。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于免疫学和疫苗学领域。更具体地说，本专利技术涉及脑膜炎奈瑟氏球菌(Neisseria meningitidis)(脑膜炎球菌)来源的抗原及其在免疫接种中的应用。
技术介绍
脑膜炎奈瑟氏球菌(N.meningitidis)是一种不动的革兰氏阴性人类致病菌，寄生在咽部，可导致脑膜炎(偶尔在无脑膜炎的情况下也会导致败血病)。它既可以引起地方病，也可以引起流行病。在引入了抗流感嗜血杆菌的组合疫苗以后，脑膜炎奈瑟氏球菌在美国就成了细菌性脑膜炎的主要致病菌。 根据微生物的夹膜多糖确定了脑膜炎奈瑟氏球菌的不同血清群。血清群A是撒哈拉以南非洲地区流行病的主要致病原。血清群B和C是美国和大多数发达国家的主要致病原。血清群W135和Y是美国和发达国家其他病例的主要致病原。在确定血清群后，进一步的分类包括血清型、血清亚型和免疫型，标准术语表为血清群、血清型、血清亚型和免疫型，其中由冒号分开，如B4P1.15L3，7，9。在血清群B内，某些谱系常常可引起疾病(超侵袭性的)，某些谱系所导致的疾病比其他谱系更严重(超毒力的)，而另外一些谱系却根本不致病。现在已知有7种具有超毒力的谱系，分别是亚群I、II、III和IV-1、ET-5复合物、ET-37复合物、A4簇和谱系3。这些谱系已通过多位点酶电泳(MLEE)方法确定，但是也可以用多位点序列分型(MLST)方法对脑膜炎球菌进行分类。 目前，抗血清群A、C、W135和Y的疫苗以其夹膜多糖为抗原。一种获准上市的抗这4种血清群的人多糖疫苗已被使用许多年。最近的研究热点依然集中在糖上，但是这些糖一般都会连接上载体蛋白。抗血清群C的组合疫苗已被批准用于人类，其中包括MenjugateTM、MeningitecTM和NeisVac-CTM。来自于血清群A+C的组合疫苗混合物已为大家所了解，来自于血清群A+C+W135+Y的组合疫苗混合物也有报道。 来自于血清群B的夹膜多糖不能用作疫苗，因为它是人类的自身抗原。有人报道了经化学修饰的血清群B多糖，但是还没有用于临床。也有人试验过基于外膜囊泡的疫苗，但是这些疫苗所形成的保护作用一般只限于用于制备疫苗所用的株。血清群A和B的基因组序列已被报道出来，其中血清群B的序列已被用于鉴定疫苗抗原。有人对候选抗原进行了改造以提高其异源表达的能力。 对于脑膜炎球菌来说，已有的观念就是抗血清群A、C、W135和Y的免疫基于四种不同的夹膜多糖，而抗血清群B的免疫基础不在夹膜多糖。 专利技术概述 与这个观念所不同的是，本专利技术的专利技术人发现，抗血清群A、C、W135和Y的免疫(特别是抗血清群Y的免疫)可以通过使用多肽抗原来实现。而且，他们还发现血清群B多肽可以形成这种保护作用，因而单纯使用多肽疫苗就可以形成抗血清群A、B、C、W135和Y的保护作用。 因此，本专利技术提供了免疫受试者使其能够抵抗脑膜炎奈瑟氏球菌血清群Y感染的方法，该方法包括给予受试者包含一种或多种免疫原性多肽的组合物。同样，本专利技术还提供了一种或多种免疫原性多肽在制造用于免疫受试者使其能够抵抗脑膜炎奈瑟氏球菌血清群Y感染的药物中的应用。 本专利技术还提供了免疫受试者使其能够抵抗脑膜炎奈瑟氏球菌血清群Y感染的方法，该方法包括给予受试者包含脑膜炎球菌OMV的组合物。同样，本专利技术还提供了脑膜炎球菌OMV在制造用于免疫受试者使其能够抵抗脑膜炎奈瑟氏球菌血清群Y感染的药物中的应用。 本专利技术的方法及用途优选用于免疫受试者，使其能够抵抗血清群Y以及血清群A、B、C和W135中至少一种的感染。其中的受试者被免疫使其能够抵抗给定的脑膜炎球菌血清群的感染，组合物最好不包含来自该血清群的夹膜多糖(组合的或非组合的疫苗)。因此，优选的组合物不包含来自血清群Y的夹膜多糖，也可以不包含来自于血清群A、B、C和/或W135的一种夹膜多糖。 用于本专利技术的组合物可利用已知的技术制备，如参考文献15-24所描述的制备脑膜炎球菌多肽抗原的技术，或者参考文献34-38所描述的制备OMV的已知技术。纯化的多肽抗原优选外膜囊泡。 抗致病原体如乙型肝炎病毒、白喉和破伤风的疫苗一般包含单一的蛋白抗原(如HBV表面抗原或破伤风毒素)。而百日咳疫苗一般包含至少三种百日咳蛋白，PrevenarTM肺炎球菌疫苗包含7种不同的结合多糖抗原。其他疫苗如细胞性百白二联疫苗、麻疹活疫苗、灭活的脊髓灰质炎疫苗(IPV)以及脑膜炎球菌OMV疫苗都是其大量抗原的天然混合物。单一抗原、几种特定抗原或非特定抗原的混合物是否能激发保护作用取决于多种因素。 免疫原性多肽 在某些实施方式中，本专利技术包括给予受试者至少一种免疫原性多肽以提供抗脑膜炎奈瑟氏球菌感染的保护作用。一般来说，这些免疫原性多肽包含脑膜炎球菌的氨基酸序列，如血清群B株所具有的氨基酸序列，例如已测序的MC58株。 有几种特定的抗原可以使用。由于不是包含单一抗原，因此，本专利技术的组合物优选包含10种或更少(如9、8、7、6、5、4、3、2)纯化抗原的混合物，更优选的是组合物不包含复合物或非特定抗原的混合物，如组合物中最好不包含外膜囊泡。 优选用于本专利技术的免疫原性多肽是参考文献24所描述的那些(1)“NadA”蛋白；(2)“741”蛋白；(3)“936”蛋白；(4)“953”蛋白；以及(5)“287”蛋白。这些蛋白在本文中被称为“5种基本抗原”。本专利技术使用这些抗原中的1、2、3、4种或全部5种。 NadA蛋白 脑膜炎奈瑟氏球菌血清群B来源的“NadA”(奈瑟菌粘附素A)在参考文献17中被称为蛋白“961”(SEQ IDs 2943 & 2944)，在参考文献13中被称为“NMB1994”(参见GenBank登录号11352904 & 7227256)。有关该蛋白的详细描述见于参考文献25。在血清群A的基因组中无相应的蛋白，但NadA+血清群A株曾被报道过。 按照本专利技术的描述被使用时，NadA可有不同的形式。NadA的优选形式是截短的或缺失的变体，如参考文献21到23所描述的那些形式。更特殊的是，无C端膜锚定蛋白的NadA是优选的(如，对于2996株来说，缺失残基351-405)，在本文中有时用“C”上标来加以区分，如NadA(C)。无膜锚定区的NadA(如SEQ IDNO1)在大肠杆菌内表达可导致蛋白分泌到培养物上清中，同时其23聚的前导肽被去除(如，对于2996株来说，剩下的是一个327聚的多肽)。无前导肽的多肽在本文中有时用“NL”上标来加以区分，如NadA(NL)或NadA(C)(NL)。 优选的NadA序列与SEQ ID NO2具有50％或更高的(如60％、70％、80％、90％、95％、99％或更高)序列一致性。这包括NadA变体(如等位基因变体、同源物、直向同源物、横向同源物、突变株等)。NadA的等位基因形式描述于参考文献26的图9中。 其他优选的NadA序列包含SEQ ID NO1的至少n个连续氨基酸，其中的n是7或更大(如8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250或更大)。优选的片段包含NadA来源的表位。其他的优选片段缺失SEQ ID NO1C端和/或N端的一个或多个氨基酸(如本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种免疫受试者使其能够抵抗脑膜炎奈瑟氏球菌血清群Ｙ感染的方法，该方法包括给予受试者包含一种或多种免疫原性多肽的组合物。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：M肯托尼，M朱利亚尼，M皮扎，
申请(专利权)人：诺华疫苗和诊断有限公司，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]
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