【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及工艺优化，具体为一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法。
技术介绍
1、干酪乳杆菌是一种常见的益生菌，这是一种常见于人类与动物肠道的革兰氏阳性菌，能对宿主身体产生多种显著的有益作用，也广泛应用于食品实际生产中。
2、干酪乳杆菌作为益生菌的常见种类之一，是畜牧生产及应用的关键之一。随着畜禽生产规模化的上升，动物疾病的发生也越来越频繁，但长期用药则会使动物机体免疫力下降，因此，用益生菌来代替抗生素已成必然。
3、由于益生菌分类广，种类数量大，导致对于益生菌高密度培养的研究数量整体比较多，按其菌种详细划分后每种益生菌的研究仍旧较少。虽然研究对象有所不同，但研究思路较为相似。
技术实现思路
1、本部分的目的在于概述本专利技术的实施方式的一些方面以及简要介绍一些较佳实施方式。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。
2、因此，本专利技术的目的是提供一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，在单因素试验的基础上，筛选出响应面法的四个影响因素，利用四因素三水平的响应面法对复合冻干保护剂的配方进行优化。
3、为解决上述技术问题，根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了如下技术方案：
4、一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其包括：
5、s1、以干酪乳杆菌为研
6、s2、在单因素试验的基础上，筛选出响应面法的四个影响因素，利用四因素三水平的响应面法对复合冻干保护剂的配方进行优化。
7、作为本专利技术所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法的一种优选方案，其中，所述菌种存活率的测定步骤如下：
8、称取0.1g在无菌环境中溶于0.9ml无菌水中，充分混合均匀备用；
9、将获得的菌悬液用无菌水分别进行梯度稀释，稀释后使用涂布棒将菌液均匀涂布在固体培养基上，放入温度为37℃的恒温培养箱中进行恒温培养48h，培养结束后取出进行计数。
10、作为本专利技术所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法的一种优选方案，其中，所述菌种保护率计算方法为：
11、
12、其中，m为冷冻干燥后测得的活菌数量，m0为冻干燥前测得的活菌数量。
13、作为本专利技术所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法的一种优选方案，其中，对冷冻保护剂进行单因素试验的具体步骤如下：
14、选择蔗糖、海藻糖、甘油作为试验对象,将三种材料分别与蒸馏水按照相同浓度混合成单一成分保护剂，混合浓度为10％，保护剂制作完成后与菌体充分混合并摇匀，置于-20℃环境下预冷冻,在预冷冻完成后放入-80℃超低温冰箱中，最后放入冷冻干燥机，设置真空度为3.08pa、温度为-85℃进行冷冻干燥操作。
15、作为本专利技术所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法的一种优选方案，其中，对抗氧化剂进行单因素试验的具体步骤如下：
16、选择硫代硫酸钠、维生素e、蛋白胨作为试验对象，将三种材料分别与蒸馏水按照相同浓度混合成单一成分保护剂，混合浓度为1％，保护剂制作完成后与菌体充分混合并摇匀，置于-20℃环境下预冷冻，在预冷冻完成后放入-80℃超低温冰箱中，最后放入冷冻干燥机进行冷冻干燥操作。
17、作为本专利技术所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法的一种优选方案，其中，对填充剂进行单因素试验的具体步骤如下：
18、选择甘露醇、乳糖、明胶作为试验对象，将三种材料分别与蒸馏水按照相同浓度混合成单一成分保护剂，混合浓度为10％，保护剂制作完成后与菌体充分混合并摇匀，置于-20℃环境下预冷冻，在预冷冻完成后放入-80℃超低温冰箱中，最后放入冷冻干燥机进行冷冻干燥操作。
19、作为本专利技术所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法的一种优选方案，其中，对酸碱调整剂进行单因素试验的具体步骤如下：
20、选择磷酸、氨基酸、山梨醇作为试验对象，将三种材料分别与蒸馏水按照相同浓度混合成单一成分保护剂，混合浓度为1％，保护剂制作完成后与菌体充分混合并摇匀，置于-20℃环境下预冷冻，在预冷冻完成后放入-80℃超低温冰箱中，最后放入冷冻干燥机进行冷冻干燥操作。
21、与现有技术相比，本专利技术具有的有益效果是：本专利技术可以在单因素试验的基础上，筛选出响应面法的四个影响因素，利用四因素三水平的响应面法对复合冻干保护剂的配方进行优化，提高复合冻干保护剂的配方的质量。
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1.一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，所述菌种存活率的测定步骤如下：
3.根据权利要求2所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，所述菌种保护率计算方法为：
4.根据权利要求1所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，对冷冻保护剂进行单因素试验的具体步骤如下：
5.根据权利要求1所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，对抗氧化剂进行单因素试验的具体步骤如下：
6.根据权利要求1所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，对填充剂进行单因素试验的具体步骤如下：
7.根据权利要求1所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，对酸碱调整剂进行单因素试验的具体步骤如下：
【技术特征摘要】
1.一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，所述菌种存活率的测定步骤如下：
3.根据权利要求2所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，所述菌种保护率计算方法为：
4.根据权利要求1所述的一种针对干酪乳杆菌高保护效率的冻干保护剂筛选方法，其特征在于，对冷冻保护剂进行单...
【专利技术属性】
技术研发人员：周丽娜，吴洪博，刘媛媛，周雷进雨，李锦生，姜海龙，孔丽娟，李松，王君，刘春慧，姜玲，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：
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