【技术实现步骤摘要】
本申请涉及植物育种，尤其涉及一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法。
技术介绍
1、万寿菊（ tagetes erectal.）是菊科万寿菊属一年生草本植物。万寿菊原产墨西哥，中国各地均有栽培。色素万寿菊含有丰富的叶黄素，叶黄素可作为食品、饲料、医药的原料，同时色素万寿菊通常为头状花序，花色以橙色为主，花朵较大，花瓣层次分明，形状独特，因而具有很高的观赏和药用价值。
2、在色素万寿菊杂交种（f1）实际生产中，花粉吸取设备常用于采集恢复系的花粉。然而，由于空气中存在散落的可育系花粉，即花粉收集区域有其他花粉源（例如雄性可育株），导致花粉交叉污染，这势必会造成种子纯度的下降，还存在着核心种质资源泄露的风险；同时，色素万寿菊通常在3月份开始播种，4月份进行移栽，6月份开始收集花粉。从播种到收集花粉大约需要130天，生产周期较长。此外，6月份云南已进入雨季，空气相对潮湿，不利于花粉的收集，还会大大缩短花粉储存寿命，降低花粉活力，从而影响授粉效果。因此，花粉的收集、贮藏和授粉受季节限制较为明显。此外在雨季，万寿菊较易受到灰霉病、褐斑病、叶枯病和蚜虫等多种因素的影响，导致植物长势衰弱，花粉产量减少等问题。
3、基于此，近些年以来，随着植物组织培养技术的发展，采用组织培养对具有优良品种特性的色素万寿菊进行快速繁殖，可以在短期内生产出大量整齐均匀的健壮种苗。然而，申请人发现，在利用组织培养技术培养色素万寿菊的过程中，经过初代培养以后的植株在继代时花粉活力常常会出现下降
技术实现思路
1、为解决或部分解决相关技术中存在的问题，本申请提供一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，该方法快速简单，基于组织培养短期内获取得到大量整齐均匀且纯度一致的种苗，从而便于快速高效的收集花粉，且在继代培养时，得到的花粉活力依然较高，从而保证了花粉活力，该方法提高了育种进程，有利于种质资源的保存和优良品种的推广。
2、本申请中的色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，包括以下步骤：
3、（1）种子预处理
4、将色素万寿菊恢复系种子于太阳下晾晒后，对种子进行消毒，无菌水冲洗，备用；
5、（2）无菌苗的获取
6、将步骤（1）中得到的备用种子在超净工作台中平铺于萌发培养基上，封口后移入培养室培养，得到无菌苗；
7、（3）不定芽诱导培养
8、将获取得到的无菌苗的叶片分切后接种到不定芽诱导培养基上，培养基经密封后移入培养室，先在光照强度为500lx条件下培养一周，再移入光照强度为2500-3000lx条件下培养直至得到再生不定芽；其中，不定芽诱导培养基的配方为：ms粉末4.4g/l、6-ba10mg/l、iaa 1mg/l、硝酸银2mg/l、琼脂8g/l、糖30g/l；
9、（4）不定芽开花、花粉收集
10、将诱导得到的再生不定芽在超净台内切下接种至增殖培养基，密封后移入培养室进行生根培养至开花，即可进行花粉的收集；
11、（5）将已收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行继代培养，让其继续开花同时收集花粉；
12、所述继代培养的培养基配方为： ms粉末4.4g/l、tdz 0.2mg/l、iba 0.1mg/l、琼脂8g/l、糖30g/l；
13、继代培养的条件为：光照强度为2500-3000lx下进行培养；培养温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
14、可选的，在一些实施方式中，所述步骤（3）中培养室条件为培养温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
15、可选的，在一些实施方式中，所述步骤（1）中晾晒具体操作为：晾晒的时间为3d，种子摊铺厚度不超过0.5mm，晾晒温度为18-28℃。
16、可选的，在一些实施方式中，所述步骤（2）中的萌发培养基配方为：ms粉末4.4g/l、tdz 0.3mg/l、iba 0.1mg/l、琼脂8g/l、糖30g/l。
17、可选的，在一些实施方式中，所述步骤（4）中的增殖培养基配方为：ms粉末4.4g/l、tdz 0.2mg/l、iba 0.1mg/l、琼脂8g/l、糖30g/l。
18、本申请提供的技术方案可以包括以下有益效果：
19、（1）利用本申请中的方法，由传统制种130 d的生产周期缩短至80d左右，大大缩短了花粉成熟所需时间，避免了花粉产量及活力易受季节影响以及收集花粉之前植株的病虫害及其他突发天气导致的花粉产量降低的问题，使花粉的生产可以不受季节时间限制，充分保证了制种的进程，有利于种质资源的保存和优良品种的推广。
20、（2）本申请中的色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，在经过初代培养以后，通过特定的继代培养基进行继代培养，在已开花采取了部分花粉的基础上，继续高频地诱导出大量地色素万寿菊再生芽和在原来的分枝开花，从而在短时间内获取得到大量的花粉。同时利用本申请中的方法在进行继代培养时，可以有效规避玻璃化苗的产生，保证继代培养时组培苗的质量，进而保证所得花粉的活力。
21、（4）利用本申请中的方法，杜绝了花粉交叉污染的情况，保证了杂交种的纯度，避免了色素万寿菊恢复系基因型不纯合，使杂交种颜色不一的问题，降低了核心种质资源泄露的风险。
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1.一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（3）中培养室培养条件为温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
3.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（1）中晾晒具体操作为：晾晒的时间为3d，种子摊铺厚度不超过0.5mm，晾晒温度为18-28℃。
4.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（1）中消毒的具体操作为：用2%次氯酸钠震荡消毒10min，再用0.1%升汞震荡消毒10min。
5.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（2）中的萌发培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.3mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。
6.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（4
7.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（3）中不定芽诱导培养基的配方为：MS粉末4.4g/L、6-BA10 mg/L、IAA1mg/L、硝酸银2mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L；不定芽诱导培养的培养条件为：先在光照强度为500lx下培养一周，再移入光照强度为2500-3000lx下进行培养；培养温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
...【技术特征摘要】
1.一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（3）中培养室培养条件为温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
3.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（1）中晾晒具体操作为：晾晒的时间为3d，种子摊铺厚度不超过0.5mm，晾晒温度为18-28℃。
4.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（1）中消毒的具体操作为：用2%次氯酸钠震荡消毒10min，再用0.1%升汞震荡消毒10min。
5.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（2）中的...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄望启，张艺萍，陈秀华，牛善策，孟超，许凤，王丽花，钱绍方，雷正松，杨秀梅，蒋亚莲，张丽芳，苏艳，赵阿香，邹凌，
申请(专利权)人：云南省农业科学院花卉研究所，
类型：发明
国别省市：
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