一种抑制链孢霉生长的杀菌剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种链孢霉杀菌剂，该链孢霉杀菌剂是通过液体培养恶臭假单胞菌种，菌液离心取上清液得到。本发明专利技术的链孢霉杀菌剂具有杀菌效果好、安全等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物领域，具体地说涉及是一种抑制链孢霉生长的杀菌剂及其制备 方法。
技术介绍
链孢霉是一种顽强、速生的气生霉，主要危害各种食用菌菌种，也发生在栽培过程 中，危害食用菌的菌丝体和子实体，极难防治，目前虽有化学药剂防治，但效果不佳，且毒性 大，目前尚未发现能有效抑制链孢霉生长的微生物或其代谢物。链孢霉广泛分布在自然界的土壤中、禾本科植物以及富含淀粉的食物上，能产生 大量的分生孢子，靠气流传播。培养室环境不卫生；菌袋高压灭菌不彻底；棉塞受潮、过松； 菌袋破漏，均是链孢霉侵染的主要途径。菌袋一旦受侵染后，所产生新的分生孢子，是再侵 染的主要来源。在高温高湿条件下，能在1-2天内传遍整个培养室。链孢霉是菌种生产期间危害最严重的一种病害之一。菌袋一经污染很难彻底清 除，常引起整批菌种或菌袋报废，经济上损失很大。目前常用的链孢霉杀菌剂为百菌清和多菌灵，但这两种杀菌剂存在如下缺陷毒 性强，对生产种危害大，污染环境，对链孢霉杀菌作用不强。
技术实现思路
本专利技术的目的首先在于提供一种链孢霉杀菌剂。本专利技术所提供的一种链孢霉杀菌剂，是通过将恶臭假单胞菌种进行液体培养，所 得到的上清液。所述的链孢霉杀菌剂，是通过如下方法制备得到的 液体培养恶臭假单胞菌种；菌液离心取上清液，即为杀菌剂。优选的方式为菌液离心取上清液后，再进行过滤。所述的过滤为用0. 22 μ m微孔滤膜进行过滤。所述的链孢霉杀菌剂，其是通过如下方法制备得到的制备液体培养基牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，NaC 15 g，琼脂20 g，水1000 mL, pH7. 0-7. 2 ；按照5%的接种量将恶臭假单胞菌种接入液体培养基，放入37°C恒温摇床培养，转 速120 rmp/min，振荡培养4天；将振荡培养后的菌液4000 rmp/min离心15分钟，取上清液，重复3次后，取上清 液真空过滤；将获得的上清液，用0.22 ym微孔滤膜过滤。优选的链孢霉杀菌剂是通过如下制备方法得到的制备液体培养基牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，NaC 15 g，琼脂20 g，水1000 mL, pH7. 0-7. 2 ；按照5%的接种量将恶臭假单胞菌种接入液体培养基，放入37°C恒温摇床培养，转速 120 rmp/min，振荡培养4天；将振荡培养后的菌液4000 rmp/min离心15分钟，取上清液，重复3次后，取上清液真 空过滤；将获得的上清液，用10 μ m微孔滤膜过滤，45°C旋转蒸发仪浓缩至菌液OD值为0. 1， 再用0. 22 μ m微孔滤膜过滤，4°C密封保存。本专利技术还提供了制备上述链孢霉杀菌剂的方法，该方法为 液体培养恶臭假单胞菌种；菌液离心取上清液，即得杀菌剂。本专利技术所用的恶臭假单胞菌种O^e^/oMwas /^iiiZa SK_10)其来源为上海 农科院保藏菌种，编号SK-10。本专利技术所提供的链孢霉杀菌剂具有具有杀菌效果好、安全等特点。既能有效防治 链孢霉污染，又对环境无污染，同时制备简单、使用方便，可以达到生物防治链孢霉的目的。具体实施例方式实施例1制备链孢霉杀菌剂1并检测杀菌活性制备液体培养基牛肉膏3 g，蛋白胨10 g, NaC15 g，琼脂20 g，水1000 mL, pH 7. 0-7. 2 ；按照5%的接种量将恶臭假单胞菌种接入液体培养基，放入37°C恒温摇床培养，转 速120rmp/min，振荡培养4天；将振荡培养后的菌液4000 rmp/min离心15分钟，取上清液， 重复3次后，取上清液真空过滤，作为杀菌剂1。4°C密封保存。将杀菌剂1划线于90mm LB平皿离中心2cm的两侧，于中心分别接种白色链孢霉 菌盘和红色链孢霉菌盘，于28°C培养3天，观察链孢霉生长情况，并与空白对照比较。实施例2制备链孢霉杀菌剂2并检测其杀菌活性将实施例1制备的链孢霉杀菌剂1用0. 22 μ m微孔滤膜过滤，4°C密封保存，作为杀菌 剂2。IOOml PDA溶解后加Ilml的杀菌剂2( 10%);每IOOmlPDA倒六皿，分别接种红色链 孢霉、白色链孢霉、空白对照；无任何处理PDA平皿接种红色链孢霉(R)和白色链孢霉(W)。实施例3制备链孢霉杀菌剂3并检测其杀菌活性将实施例1制备的链孢霉杀菌剂1用10 μ m微孔滤膜过滤，45°C旋转蒸发仪浓缩至菌 液OD值为0. 1，用0. 22 μ m微孔滤膜过滤，4°C密封保存，作为杀菌剂3。80ml PDA溶解后加20ml的杀菌剂3 (20%);每IOOmlPDA倒六皿，分别接种红色链 孢霉、白色链孢霉、空白对照；无任何处理PDA平皿接种红色链孢霉(R)和白色链孢霉(W)。实施例1、实施例2和实施例3的杀菌剂均可有效的杀灭链孢霉，其对红色链孢霉 和白色链孢霉的杀菌率如下表所示。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种链孢霉杀菌剂，其特征在于其是通过将恶臭假单胞菌种进行液体培养，所得到的上清液。

【技术特征摘要】
一种链孢霉杀菌剂，其特征在于其是通过将恶臭假单胞菌种进行液体培养，所得到的上清液。2.根据权利要求1所述的链孢霉杀菌剂，其特征在于是通过如下方法制备得到的液体培养恶臭假单胞菌种；菌液离心取上清液，即为杀菌剂。3.根据权利要求2所述的链孢霉杀菌剂，其特征在于菌液离心取上清液后，进行过滤。4.根据权利要求3所述的链孢霉杀菌剂，其特征在于所述的过滤为用0.22 u m微孔滤 膜进行过滤。5.根据权利要求1-4任一项所述的链孢霉杀菌剂，其特征在于其是通过如下方法制备 得到的制备液体培养基牛肉膏3 g，蛋白胨10 g, NaCl 5 g，琼脂20 g，水1000 mL, pH 7. 0-7. 2 ；按照5%的接种量将恶臭假单胞菌种接入液体培养基，放入37°C恒温摇床培养，转速 120 rmp/min，振荡培养4天；将振荡培养后的菌液4000 rmp/min离心15分钟，取上...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭倩，林娓娓，李玉，周峰，于海龙，王瑞娟，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，上海国森生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]