一种用于多磷酸化肽段特异性富集系统及应用技术方案

本发明专利技术公开了一种用于多磷酸化肽段特异性富集系统及应用，包括制备管和收集管，制备管内部从上到下依次设置有填料、滤膜和筛板，制备管的顶部和顶部分别设置有加样口和出液口；制备管可拆卸嵌套在收集管中。本发明专利技术特定系统和方法对多磷酸肽具有高的特异性选择富集能力，即使在肽段混合物浓度只有40pm时对多磷酸肽仍然具有强的选择性富集性能，运用本发明专利技术系统抓取多磷酸肽整个操作过程实现了半自动化过程，完成多磷酸肽的抓取仅需1次洗脱，整个操作过程只需要不到30min，且可以连续重复4次其性能不发生任何变化，为后续质谱提供了方便，也减少了较大的试剂以及耗材成本，为生物医学实验室研究多磷酸蛋白生物功能奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种用于多磷酸化肽段特异性富集系统及应用。

技术介绍

1、蛋白质磷酸化修饰是生物体内最重要的翻译后修饰之一，调节着生命活动中许多重要过程，比如代谢、生长、增殖、分化、凋亡等。蛋白质磷酸化不仅包含单磷酸化修饰还包含多磷酸化修饰，其中多磷酸化修饰及其位点的鉴定对于蛋白质的生物活性影响更加显著。(biochemistry，2021，60:1347-13)比如，对于肿瘤细胞，抵抗凋亡是其主要特征之一，促使其凋亡是治疗肿瘤的一种重要手段。p53蛋白是最重要的肿瘤抑制因子之一，含有38个ser和22个thr残基。磷酸化修饰可以有效调控p53的活性机制进而发挥其诱导凋亡的作用。然而，对于p53蛋白，其结构中存在的潜在磷酸化位点众多，因为技术受限，已经发现的位点有限，某些尚未发现的位点是否存在其他调控机制还不清楚。(seminars in cell&developmental biology，2020，98:105-117)因此，多磷酸化蛋白及其磷酸化位点的有效鉴定能够明晰许多重要的生物学过程，为疾病治疗或者生物学行为研究提供坚实的依据本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于多磷酸化肽段特异性富集系统，其特征在于，包括制备管(1)和收集管(2)，所述制备管(1)内部从上到下依次设置有填料(3)、滤膜(4)和筛板(5)，所述制备管(1)的顶部和底部分别设置有加样口(6)和出液口(7)；所述制备管(1)可拆卸嵌套在收集管(2)中。

2.根据权利要求1所述的用于多磷酸化肽段特异性富集系统，其特征在于，所述制备管(1)其材质为聚乙烯对苯二甲酸脂(PET)、聚氯乙烯(PVC)或者聚丙烯(PP)，加样口(1)的直径范围0.5-1cm，出液口(2)的直径范围0.1-0.3cm，制备管(1)高度范围为2-3.5cm。

3.根据权利要求1所...

【技术特征摘要】

1.一种用于多磷酸化肽段特异性富集系统，其特征在于，包括制备管(1)和收集管(2)，所述制备管(1)内部从上到下依次设置有填料(3)、滤膜(4)和筛板(5)，所述制备管(1)的顶部和底部分别设置有加样口(6)和出液口(7)；所述制备管(1)可拆卸嵌套在收集管(2)中。

2.根据权利要求1所述的用于多磷酸化肽段特异性富集系统，其特征在于，所述制备管(1)其材质为聚乙烯对苯二甲酸脂(pet)、聚氯乙烯(pvc)或者聚丙烯(pp)，加样口(1)的直径范围0.5-1cm，出液口(2)的直径范围0.1-0.3cm，制备管(1)高度范围为2-3.5cm。

3.根据权利要求1所述的用于多磷酸化肽段特异性富集系统，其特征在于，所述收集管(2)其材质为聚乙烯对苯二甲酸脂(pet)、聚氯乙烯(pvc)或聚丙烯(pp)，直径范围为1-1.3cm，高度为3-5cm。

4.根据权利要求1所述的用于多磷酸化肽段特异性富集系统，其特征在于，所述填料(3)优选为对于多磷酸肽具有特异性富集性能的磷酸钙填料(cap填料)，填料量为1-100mg。

5.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘海龙，任芳坤，戴君勇，张静宜，李旭，史献冬，刘宝晴，杨悦，周家宏，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：