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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及荧光探针制备的,尤其涉及一种双发射荧光纳米共组装体及其制备方法与在atp检测中的应用。
技术介绍
1、三磷酸腺苷(atp)是生物体中细胞内必需的能量储存货币,参与调节细胞代谢活动和生化途径,包括能量转移、酶催化、生物合成等。同时,atp分子也可以在调节神经传递、离子通道和细胞运动方面发挥信号介导的作用。因此,atp的合成和消耗过程总是在生物体中不断发生,以协调信号转导,维持能量稳态。血液中atp浓度水平可作为人类健康的重要指标;一些疾病,如帕金森病、阿尔茨海默病、心血管病、结肠炎、恶性肿瘤,都与atp浓度的异常波动密切相关。考虑到atp对人类健康的普遍影响,高效检测atp在健康筛查、疾病诊断中具有重要意义。
2、因此,对atp进行快速、灵敏和特异性检测非常重要。现有技术中测定atp浓度的方法有多种,例如电化学法、高效液相色谱法、比色法等,但这些检测方法灵敏度低、干扰较严重、程序复杂。因此需要提供一种方案改善以上问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种双发射荧光纳米共组装体及其制备方法与在atp检测中的应用,以两亲性tpe衍生物为能量供体,两亲性咪唑化合物为阴离子受体,和荧光素钠形成双发射荧光纳米共组装体,并可发生明显的能量传递现象以显示出荧光素钠的强荧光,当荧光素钠被待测物取代后,能量供体恢复强荧光发射的同时,荧光素钠的光被猝灭,从而能够快速准确进行定性定量检测s。
2、第一方面,本专利技术提供的一种双发射荧光纳米共组装体,包括两
3、所述两亲性咪唑化合物的结构式如式i所示:
4、
5、所述两亲性tpe衍生物的结构式如式ii所示:
6、
7、本专利技术提供的一种双发射荧光纳米共组装体,向两亲性tpe衍生物中引入聚乙二醇链和烷基链,使得两亲性tpe衍生物具有良好的水溶性,同时向两亲性咪唑化合物中引入双电荷咪唑盐和烷基链,使得两亲性咪唑化合物对阴离子具有良好的识别力。
8、双发射荧光纳米共组装体的检测原理为:两亲性咪唑化合物与具有强荧光发射的荧光素钠形成组装体后,再与两亲性tpe衍生物进行共组装,在能量供体两亲性tpe衍生物激发光照下发生能量传递现象,从而两亲性tpe衍生物荧光被猝灭,被传递的能量受体——荧光素钠荧光增强;当加入被测物后能够对荧光素钠进行置换,因此打断了两亲性tpe衍生物激发光照下的能量传递现象,从而两亲性tpe衍生物的荧光恢复,荧光素钠的荧光猝灭,从而完成对被测物的定性检测。
9、可选地,所述两亲性咪唑化合物、所述荧光素钠和所述两亲性tpe衍生物的摩尔比为1∶1∶10。
10、可选地,所述两亲性咪唑化合物的制备方法包括以下步骤:
11、在溶剂环境中,将间苯二甲酸与1-(3-氨丙基)咪唑在第一催化剂、脱水剂下反应后分离提纯得化合物一;
12、在溶剂、碱性环境中,将十四胺与溴乙酰溴反应后分离提纯得化合物二;
13、在溶剂环境中,将化合物一与化合物二在第二催化剂下反应后分离提纯得两亲性咪唑化合物。
14、可选地,将间苯二甲酸与1-(3-氨丙基)咪唑在第一催化剂、脱水剂下反应后分离提纯得化合物一的过程中,包括以下步骤:
15、将间苯二甲酸、1-(3-氨丙基)咪唑、第一催化剂、脱水剂溶解在第一溶剂中制得第一混合液;
16、将第一混合液在75-80℃下回流反应12-15h后,分离提纯得化合物一。
17、可选地,将间苯二甲酸、1-(3-氨丙基)咪唑、第一催化剂、脱水剂溶解在第一溶剂的过程中,所述间苯二甲酸、1-(3-氨丙基)咪唑、第一催化剂、脱水剂的摩尔比为1∶2∶(1.5-2)∶(1.5-2)。
18、可选地,在溶剂、碱性环境中,将十四胺与溴乙酰溴反应后分离提纯得化合物二的过程中,包括以下步骤:
19、将第一碱性促进剂、十四胺、溴乙酰溴溶解在第二溶剂中制得第二混合液;
20、将第二混合液在20-30℃下搅拌反应4-5h后,分离提纯得化合物二。
21、可选地,将第一碱性促进剂、十四胺、溴乙酰溴溶解在第二溶剂的过程中,所述第一碱性促进剂、所述十四胺、所述溴乙酰溴的摩尔比为(1-2)∶1∶(1.2-1.5)。
22、可选地,将化合物一与化合物二在第二催化剂下反应后分离提纯得两亲性咪唑化合物的过程中,包括以下步骤:
23、将化合物一、化合物二、第二催化剂溶解在第三溶剂中制得第三混合液;
24、将第三混合液在75-85℃下回流反应8-10h后,分离提纯得两亲性咪唑化合物。
25、可选地,将化合物一、化合物二、第二催化剂溶解在第三溶剂的过程中,所述化合物一、所述化合物二、所述第二催化剂的摩尔比为1∶(2.2-2.6)∶(0.8-1)。
26、可选地,所述两亲性咪唑化合物的制备反应式如下所示:
27、
28、可选地,所述两亲性tpe衍生物的制备方法包括以下步骤:
29、在溶剂、碱性环境中,将原料一与十六烷基溴反应后分离提纯得化合物三;所述原料一为[1-(4-溴苯基)-2,2-二(4-羟基苯基)]乙烯;
30、在溶剂、碱性环境中,将化合物三与对羟基苯硼酸在第三催化剂下反应后分离提纯得化合物四;
31、在溶剂、碱性环境中,将化合物四与原料二反应后分离提纯得两亲性tpe衍生物;所述原料二为对甲苯磺酸2-甲氧基聚乙酯。
32、可选地,在溶剂、碱性环境中,将原料一与十六烷基溴反应后分离提纯得化合物三的过程中,包括以下步骤:
33、将第二碱性促进剂、原料一与十六烷基溴溶解在第四溶剂中制得第四混合液;
34、将第四混合液在85-90℃下回流反应16-20h后,分离提纯得化合物三。
35、可选地,将第二碱性促进剂、原料一与十六烷基溴溶解在第四溶剂的过程中,所述第二碱性促进剂、所述原料一、所述十六烷基溴的摩尔比为(1-2)∶1∶(2.2-3.0)。
36、可选地,在溶剂、碱性环境中,将化合物三与对羟基苯硼酸在第三催化剂下反应后分离提纯得化合物四的过程中,包括以下步骤:
37、将第三催化剂、化合物三、对羟基苯硼酸、第三碱性促进剂溶解在第五溶剂中制得第五混合液;
38、将第五混合液在85-90℃下反应23-25h后,分离提纯得化合物四。
39、可选地,将第三催化剂、化合物三、对羟基苯硼酸、第三碱性促进剂溶解在第五溶剂的过程中,所述第三催化剂、化合物三、对羟基苯硼酸和第三碱性促进剂的摩尔比为(0.1-0.5)∶1∶(1.5-2)∶(1-2)。
40、可选地,在溶剂、碱性环境中,将化合物四与原料二反应后分离提纯得两亲性t本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,包括两亲性咪唑化合物、荧光素钠和两亲性TPE衍生物,且所述两亲性咪唑化合物与所述荧光素钠相互络合,所述两亲性咪唑化合物与所述两亲性TPE衍生物相互组装;
2.根据权利要求1所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,所述两亲性咪唑化合物、所述荧光素钠和所述两亲性TPE衍生物的摩尔比为1:1:10。
3.根据权利要求1所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,所述两亲性咪唑化合物的制备方法包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,将间苯二甲酸与1-(3-氨丙基)咪唑在第一催化剂、脱水剂下反应后分离提纯得化合物一的过程中,包括以下步骤:
5.根据权利要求3所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,在溶剂、碱性环境中,将十四胺与溴乙酰溴反应后分离提纯得化合物二的过程中,包括以下步骤:
6.根据权利要求3所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,将化合物一与化合物二在第二催化剂下反应后分离提纯得两亲性咪唑化合物的过程中,包括以下步骤:
7.根
8.根据权利要求1所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,所述两亲性TPE衍生物的制备方法包括以下步骤:
9.根据权利要求8所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,在溶剂、碱性环境中,将原料一与十六烷基溴反应后分离提纯得化合物三的过程中,包括以下步骤:
10.根据权利要求8所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,在溶剂、碱性环境中,将化合物三与对羟基苯硼酸在第三催化剂下反应后分离提纯得化合物四的过程中,包括以下步骤:
11.根据权利要求8所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,在溶剂、碱性环境中,将化合物四与原料二反应后分离提纯得两亲性TPE衍生物的过程中,包括以下步骤:
12.根据权利要求8至11所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,所述两亲性TPE衍生物的制备反应式如下所示:
13.一种如权利要求1至12任一项所述双发射荧光纳米共组装体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
14.根据权利要求13所述的制备方法,其特征在于,所述组装溶液中包括4μmol/L的荧光素钠、4μmol/L的两亲性咪唑化合物和40μmol/L的两亲性TPE衍生物。
15.一种权利要求1至12任一项所述双发射荧光纳米共组装体的在ATP检测中的应用,其特征在于,所述双发射荧光纳米共组装体可对三磷酸腺苷进行定性定量检测。
...【技术特征摘要】
1.一种双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,包括两亲性咪唑化合物、荧光素钠和两亲性tpe衍生物,且所述两亲性咪唑化合物与所述荧光素钠相互络合,所述两亲性咪唑化合物与所述两亲性tpe衍生物相互组装;
2.根据权利要求1所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,所述两亲性咪唑化合物、所述荧光素钠和所述两亲性tpe衍生物的摩尔比为1:1:10。
3.根据权利要求1所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,所述两亲性咪唑化合物的制备方法包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,将间苯二甲酸与1-(3-氨丙基)咪唑在第一催化剂、脱水剂下反应后分离提纯得化合物一的过程中,包括以下步骤:
5.根据权利要求3所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,在溶剂、碱性环境中,将十四胺与溴乙酰溴反应后分离提纯得化合物二的过程中,包括以下步骤:
6.根据权利要求3所述的双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,将化合物一与化合物二在第二催化剂下反应后分离提纯得两亲性咪唑化合物的过程中,包括以下步骤:
7.根据权利要求3至6任一项所述双发射荧光纳米共组装体,其特征在于,所述两亲性咪唑化合物的制备反应式如下所示:
8.根据权利要求1所述的双发射荧光纳米共组装体,...
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