本发明专利技术涉及利用畜禽血液制备碳氧血红蛋白的方法。该方法包括以下操作步骤：（１）原血抗凝与血细胞分离，（２）红细胞破碎，（３）血红蛋白一氧化碳（ＣＯ）配位反应，（４）碳氧血红蛋白色素冷冻干燥。本发明专利技术利用肉类加工业主要副产物——畜禽血液，采用离心分离、高剪切乳化破碎、ＣＯ配位反应和冷冻干燥新工艺方法，制备出安全性高、色价优、性质稳定的食品级天然肉制品色素，可替代传统的亚硝酸盐类肉制品发色剂。本发明专利技术技术的应用将对提高肉制品食用安全性，促进畜禽资源清洁化加工与增值，改善肉制品色泽品质等具有重要的作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及畜禽屠宰、加工
，具体涉及利用畜禽加工副产品血液制备色 素，该色素可用于肉制品加工。
技术介绍
色泽是肉制品重要的感官品质，直接影响消费者的购买意向。硝酸盐、亚硝酸盐是 最早使用，也是目前普遍采用的肉制品发色剂。但是此类发色剂中的亚硝酸根离子会与蛋 白降解物中的胺类物质发生反应，形成致癌的亚硝胺，有诱发癌症的风险。因此亚硝酸盐发 色的安全性如今已成为公众关注的一个焦点。有学者研究利用V。、Ve等来降低亚硝酸根离 子的残留量，以减少亚硝胺的生成量，但并不能从根本上阻断致癌物质的生成。目前，生产 上已有利用红曲红等天然色素来替代亚硝酸盐类发色剂，提高了肉制品的安全性，但发色 不够均一、自然。内源性血红蛋白、肌红蛋白为肉制品中的主要呈色物质，但其对热、光、氧等不稳 定，导致肉制品色泽不稳定。如何稳定肉制品的内源性色素，是肉制品加工业面临的一个技 术难题。畜禽血液是肉类加工业的主要副产物，内含丰富的血红蛋白。利用畜禽血液制备 食用安全、色泽稳定的肉制品色素，来替代传统的亚硝酸盐类发色剂，是目前解决肉制品发 色及色泽稳定问题的一条有效途径。钱瑞生等研究报道，以猪血作为原料，采用CO增色反 应一离心一沉淀一冷冻干燥的工艺方法，制备新型肉制品色素。但是上述方法存在配位反 应底物(血红细胞)纯度不高而导致产品色价低的技术缺陷。
技术实现思路
为了解决现有技术的配位反应底物(血红细胞)纯度不高的问题，提高畜禽资源 的加工增值水平，本专利技术提供一种利用畜禽血液、制备天然肉制品色素的新方法，即利用畜 禽血液制备碳氧血红蛋白的方法。本专利技术的具体技术方案如下1、，包括以下操作步骤(1)原血抗凝与血细胞分离取新鲜畜禽血液，加入浓度0. 6-0. 8% W/V的柠檬酸钠抗凝，混合均勻、过滤；滤液 在温度4-10°C、转速3500-4000rpm条件下离心分离10-12min，得到红细胞液；将红细胞液 以1. 5-2. 5倍V/V的生理盐水洗涤，在温度4-10°C、转速3500-4000rpm离心分离，除去洗涤 液；按上述条件重复洗涤、离心分离1次，除去洗涤液，得到较为纯净的红细胞；(2)红细胞破碎在温度4-10°C、转速13000-15000rpm条件下，高剪切破碎所述红细胞l-3min，过滤，得到血红蛋白液；(3)血红蛋白一氧化碳(CO)配位反应用0.001mol/L的盐酸(HCl)或0. 001mol/L的氢氧化钠(NaOH)调节pH值为6. 5-8. 0，向血红蛋白液中通入一氧化碳(CO)进行配位反应，在温度20-30°C、转速IOOOrpm 条件下连续搅拌反应1小时，停止通气，静置15min，得到碳氧血红蛋白色素溶液；(4)碳氧血红蛋白色素冷冻干燥将上述冻结的碳氧血红蛋白色素溶液置于真空度0. 010-0. 012mbar冷冻干燥机 中，在温度-20 -18°C下、冻干18-24h，得到红色或紫红色的粉末状。所述新鲜畜禽血液为新鲜猪血、新鲜牛血、新鲜鸡血、新鲜鸭血或新鲜鹅血。所述生理盐水为浓度0. 9%的生理盐水。通过紫外-可见吸收光谱检测，见图1和图2，应用本专利技术工艺技术制备的产品在 417-420纳米、540-542纳米、571-573纳米处有特征吸收峰，表明产品为碳氧血红蛋白色 素。所得产品外观为紫红色粉末，易溶于水，水溶液呈鲜红色。外观红色或紫红色粉末，水溶性(25C) > 25. 0g/100ml 蒸馏水，蛋白质65% 75%，水分<5.0%，色价E1%lcm(412nm) 35 65，菌落总数(cfu/g)< 10000，大肠杆菌(MPN/100g):< 30。色价E1%lc;m(412nm)测定方法称取样品0. Ig (精确至0. OOlg)，用水溶解并定容 至1000ml，摇勻。取此溶液置于Icm比色皿中，以水为参比溶液，用分光光度法在最大吸收 波长412nm处测其吸光度。则色价E1 %-(412^1)可由下式给出Ewlcm (412nm) = 4τχΤ οA 吸光度；G 样品质量；V 溶液稀释后体积。本专利技术利用肉类加工业主要副产物——畜禽血液，采用离心分离、高剪切乳化破 碎、CO配位反应和冷冻干燥新工艺方法，制备出安全性高、色价优、性质稳定的食品级天然 肉制品色素，可替代传统的亚硝酸盐类肉制品发色剂。本专利技术技术的应用将对提高肉制品 食用安全性，促进畜禽资源清洁化加工与增值，改善肉制品色泽品质等具有重要的作用。附图说明图1为血红蛋白与碳氧血红蛋白吸收光谱图(375-475nm)，图2为血红蛋白与碳氧血红蛋白吸收光谱图(500-600nm)。具体实施例方式下面结合附图，通过实施例对本专利技术作进一步地说明。实施例1 1.收集检疫合格的新鲜猪血，加入浓度0. 8% W/V的柠檬酸钠抗凝，混合均勻、过 滤；滤液在温度4°C、转速3500rpm条件下离心分离lOmin，弃去上清液，得初分离的红细胞 液。以2倍体积的浓度0. 9 %的生理盐水洗涤，在温度4°C、转速3500rpm条件下离心分离 lOmin，除去洗涤液；按上述条件重复洗涤、离心分离1次，除去洗涤液，得到较为纯净的血 细胞。2.在温度4°C、转速13000rpm条件下，对所得血细胞高剪切破碎2min，过滤，得到血红蛋白溶液。3.用0. 001mol/L的盐酸(HCl)调节血红蛋白溶液的pH值调至6. 5，向其内通入 一氧化碳(CO)进行配位反应，在温度20°C、转速IOOOrpm条件下连续搅拌反应Ih ；停止通 气，静置15min，得到碳氧血红蛋白色素溶液。4.对步骤3所得的碳氧血红蛋白色素溶液，在避光、真空度0.012mbar、温 度-20 _18°C条件下冷冻干燥20h，得到紫红色的碳氧血红蛋白粉末。5.产品主要指标外观紫红色粉末，水溶性(25C) > 35. 0g/100ml 蒸馏水，蛋白质>75%，水分<5.0%，色价E1%lem(412nm) :> 65，菌落总数(cfu/g)< 10000，大肠杆菌(MPN/100g):< 30。实施例21.收集检疫合格的新鲜牛血，加入浓度0. 7% W/V的柠檬酸钠抗凝，混合均勻、过 滤；滤液在温度10°C、转速3800rpm条件下离心分离lOmin，弃去上清液，得初分离的红细胞 液。以2. 5倍体积的浓度0. 9%的生理盐水洗涤，在温度10°C、转速3800rpm条件下离心分 离lOmin，除去洗涤液；按上述条件重复洗涤、离心分离1次，除去洗涤液，得到较为纯净的 血细胞。2.在温度8°C、转速13000rpm条件下，对所得血细胞高剪切破碎2min，得到血红蛋 白溶液。3.用0. 001mol/L的氢氧化钠(NaOH)调节血红蛋白溶液的pH值为7. 5，向其内通 入一氧化碳(CO)进行配位反应，在温度30°C、转速IOOOrpm条件下连续搅拌反应Ih ；停止 通气后，静置15min，得到碳氧血红蛋白色素溶液。4.将碳氧血红蛋白色素溶液，在避光、真空度O.OlOmbar、温度-20 _18°C条件下 冷冻干燥24h，可得到紫红色的碳氧血红蛋白粉末。5.产品主要指标水溶性(250C) > 30g/100ml 蒸馏水，蛋白质本文档来自技高网...
【技术保护点】
利用畜禽血液制备碳氧血红蛋白的方法，其特征在于包括以下操作步骤： （１）原血抗凝与血细胞分离： 取新鲜畜禽血液，加入浓度０．６－０．８％Ｗ／Ｖ的柠檬酸钠抗凝，混合均匀、过滤；滤液在温度４－１０℃、转速３５００－４０００ｒｐｍ条件下离心分离１０－１２ｍｉｎ，得到红细胞液；将红细胞液以１．５－２．５倍Ｖ／Ｖ的生理盐水洗涤，在温度４－１０℃、转速３５００－４０００ｒｐｍ离心分离，除去洗涤液；按上述条件重复洗涤、离心分离１次，除去洗涤液，得到较为纯净的红细胞； （２）红细胞破碎： 在温度４－１０℃、转速１３０００－１５０００ｒｐｍ条件下，高剪切破碎所述红细胞１－３ｍｉｎ，过滤，得到血红蛋白液； （３）血红蛋白一氧化碳（ＣＯ）配位反应： 用０．００１ｍｏｌ／Ｌ的盐酸（ＨＣｌ）或０．００１ｍｏｌ／Ｌ的氢氧化钠（ＮａＯＨ）调节ｐＨ值为６．５－８．０，向血红蛋白液中通入一氧化碳（ＣＯ）进行配位反应，在温度２０－３０℃、转速１０００ｒｐｍ条件下连续搅拌反应１小时，停止通气，静置１５ｍｉｎ，得到碳氧血红蛋白色素溶液； （４）碳氧血红蛋白色素冷冻干燥：将上述冻结的碳氧血红蛋白色素溶液置于真空度０．０１０－０．０１２ｍｂａｒ冷冻干燥机中，在温度－２０～－１８℃下、冻干１８－２４ｈ，得到红色或紫红色的粉末状。...
【技术特征摘要】
利用畜禽血液制备碳氧血红蛋白的方法，其特征在于包括以下操作步骤(1)原血抗凝与血细胞分离取新鲜畜禽血液，加入浓度0.6 0.8％W/V的柠檬酸钠抗凝，混合均匀、过滤；滤液在温度4 10℃、转速3500 4000rpm条件下离心分离10 12min，得到红细胞液；将红细胞液以1.5 2.5倍V/V的生理盐水洗涤，在温度4 10℃、转速3500 4000rpm离心分离，除去洗涤液；按上述条件重复洗涤、离心分离1次，除去洗涤液，得到较为纯净的红细胞；(2)红细胞破碎在温度4 10℃、转速13000 15000rpm条件下，高剪切破碎所述红细胞1 3min，过滤，得到血红蛋白液；(3)血红蛋白一氧化碳(CO)配位反应用0.001mol/L的盐酸(HCl)或0.00...
【专利技术属性】
技术研发人员：周存六，王纪霞，陈从贵，丁亚兰，方红美，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：34[中国|安徽]
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