胶原蛋白含量检测试剂盒及检测方法技术

本申请涉及生物技术领域，具体提供一种胶原蛋白含量检测试剂盒及检测方法。该检测试剂盒中含有试剂B，试剂B为含有磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、氯化镁、氯化钾和碱性阴离子交换树脂的水溶液。该检测试剂盒明显改善了胶原蛋白与天狼星红结合的稳定性，显著提高了胶原蛋白含量检测特别是对于水生胶原蛋白含量检测的准确度和精确度。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物，具体提供一种胶原蛋白含量检测试剂盒及检测方法。

技术介绍

1、目前医药行业对于医用胶原蛋白含量的检测方法主要有3种，一种是凯氏定氮法，这种方法检测的实际上是蛋白质的含量，需要进一步确认其中杂蛋白的比例才能推算出胶原蛋白含量，而杂蛋白的含量较低，表征难度较大，结果存在不确定性；另一种是通过氨基酸含量间接计算的，如羟脯氨酸含量的测定，但不同物种来源提取的胶原蛋白在羟脯氨酸含量等方面存在较大差异，特别是对于水生胶原蛋白而言，缺乏相关的经验数值，检测结果误差度很大；最后一种是利用天狼星红与胶原蛋白的特异性结合，通过吸光度值来定量计算。具体为先利用天狼星红结合胶原蛋白后形成沉淀，离心分离去上清；加入酸性溶液清洗未结合的天狼星红后，再次离心分离去上清；后用碱性溶液溶解沉淀，测定吸光度，以此间接测定胶原蛋白含量。

2、天狼猩红与胶原蛋白结合的特异性具有较高的实用度，但检测方法也存在着明显问题。例如，检测过程的离心分离去上清的步骤中，胶原蛋白与天狼星红结合形成的沉淀较为松散，易随上清一同被去除，导致检测结果出现偏差。特别是对于鱼源等水生生物的胶本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种胶原蛋白含量检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括：试剂A、试剂B和试剂C；

2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂B中磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、氯化镁、氯化钾的浓度分别为29g/L、4g/L、36g/L、24g/L、26g/L，所述碱性阴离子交换树脂的浓度为10g/L；

3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂C中碱性水溶液为氢氧化钠和/或氢氧化钾的水溶液，浓度为0.5～1mol/L，优选为0.5mol/L。

4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂A、试剂B和试剂C的使用体积比为1...

【技术特征摘要】

1.一种胶原蛋白含量检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括：试剂a、试剂b和试剂c；

2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂b中磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、氯化镁、氯化钾的浓度分别为29g/l、4g/l、36g/l、24g/l、26g/l，所述碱性阴离子交换树脂的浓度为10g/l；

3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂c中碱性水溶液为氢氧化钠和/或氢氧化钾的水溶液，浓度为0.5～1mol/l，优选为0.5mol/l。

4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂a、试剂b和试剂c的使用体积比为1:2:2。

5.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫言，黄兆辉，傅维擎，郭立英，
申请(专利权)人：中国医学科学院整形外科医院，
类型：发明
国别省市：