海蓬子提取物抑制酪氨酸酶活性的应用制造技术

本发明专利技术涉及海蓬子提取物抑制酪氨酸酶活性的应用。本发明专利技术所述的海蓬子提取物，是指海蓬子水提物、海蓬子醇提物、超声波水提物、超声波醇提物，分别经蒸馏浓缩和旋转蒸发仪蒸发浓缩所得浓缩物，提供了其对酪氨酸合成酶活性的抑制作用研究结果。结果表明，蒸馏浓缩和旋转蒸发仪蒸发浓缩对提取物的抑制率几乎没有影响。这四种提取物对以酪氨酸为底物的酪氨酸酶抑制作用存在显著性差异。抑制率分别为：水提物３２．４８％，醇提物６２．３７％，超声波水提物４３．５６％，超声波醇提物７５．８１％。其中海蓬子超声波醇提物表现出最好的抑制作用。为预防和治疗色素沉着疾病提供依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及海蓬子提取物在抑制酪氨酸酶活性中的应用。
技术介绍
由于酪氨酸酶是合成黑色素的关键，因此目前的大多数皮肤美白产品都是在化妆 品中添加了酪氨酸酶抑制剂，通过破坏酪氨酸酶活性，从而达到减少皮肤中黑色素的目的。对苯二酚因为价格便宜，效果好，曾是最广泛使用的美白剂之一。对苯二酚和维甲 酸的混合配方，对消除紫外线和激素导致的黑色素沉积颇为有效。不过后来有研究表明，对 苯二酚会诱发白血病。自从2001年起，欧洲已经禁止在美白化妆品中添加对苯二酚。曲酸、壬二酸、乙二醇酸、烟酰胺、熊果素等化学物都可以抑制酪氨酸酶，也被用于 美白化妆品中。有些酪氨酸酶抑制剂发挥作用时，需要借助汞(即水银)做催化剂，因此有 些美白化妆品中还含有一定量的汞。化妆品公司不仅推出各种“纯天然”新产品，还不断尝 试一些“高新”技术。比如2007年，法国某公司研制出一种含有反义寡聚核苷酸的美白产 品。反义寡聚核苷酸可以特异性抑制靶基因表达，近年来多用于基因治疗。该公司研究人 员发表的论文称，将反义寡聚核苷酸的美白产品外敷在皮肤上，可以抑制皮肤细胞中酪氨 酸酶基因的表达，美白效果达到30%多。不过，反义寡聚核苷酸一般不容易进入细胞，在基 因治疗中，需要注射进入人体。所以，这种外敷的“基因治疗”法，其真实效果不免令人怀疑。美白产品除了外敷的化妆品，还有内服的药剂，目前比较常见的是一种叫做谷胱 甘肽的有机物，在体内与铜离子结合后，可以抑制酪氨酸酶活性。随着酪氨酸酶抑制剂在美白型化妆品中的不断开发及应用，以及“纯天然化妆品” 回归主流的趋势下，天然产物酪氨酸酶抑制剂的开发研究越来越得到重视。酪氨酸合成酶 抑制剂在医药领域用于治疗和预防黑色素瘤、黄褐斑等色素沉着性疾病，在化妆品领域用 于人体肌肤的美白，在食品工业领域用于预防果蔬因褐变而失鲜变质，在农业领域因酪氨 酸合成酶是昆虫赖以生存的关键酶而成为最有前景的生物杀虫药剂之一，因而酪氨酸合成 酶抑制剂的开发有着广阔的应用前景。海蓬子为黎科茎肉质化真盐生植物，利用海水灌溉，基本无需喷洒农药，种植管理 简单、不生病虫害。海蓬子营养价值极高，是上佳的无公害绿色保健食品。除作为蔬菜之外 还具有药用、保健及制造建材等价值。现代研究证明海蓬子中含有黄酮类物质，黄酮类化 合物具有广泛的生物活性，如抗氧化、抗衰老、减少自由基的产生和清除自由基的作用。这 与抑制酪氨酸合成酶活性有一定的联系。海蓬子(SH)被一些居住在沿海地区的人用作民 间医药蔬菜。以往的研究表明，植物可刺激细胞因子和一氧化氮释放，并表现出免疫调节 作用。另据报道，在小鼠电感试验中，海蓬子具有预防高脂饮食引起的高血糖和高血脂症 作用。在海蓬子所有药理作用研究中，抗氧化作用是研究最广泛的。例如，通过用海蓬子提 取物分解新的绿原酸的反应中可以发现海蓬子具有强大的抗氧化活性，并能有效保护质粒 DNA。同时海蓬子的某种酶的诱导抗氧化和抗凝作用也被广泛研究。在一个卵巢切除诱导 的氧化应激模型中，海蓬子提取物能够抑制肝脏炎症和肝硬化。近来，具有皮肤再生作用的海蓬子提取物的饮料和绿色食品已经制定，然而海蓬子对皮肤的药理作用尚未调查。黑色素起着保护皮肤免受太阳辐射的紫外线对人体皮肤的有害影响，并具有清除 有毒药物和化学品的重要作用。黑色素生物合成的前两个步骤是L_酪氨酸的羟基转化为 3，4-二羟基-苯丙氨酸(L-多巴)和L-多巴氧化成ο-多巴醌。这种ο-苯醌是非常被动 的，自发形成黑色素沉着，造成了严重的人类审美的问题。多功能的酪氨酸酶是含有铜元素 的活性酶，分子量在60-70KDa之间。抑制L-酪氨酸的羟基转化成L-多巴，并抑制L-多巴 氧化成ο-多巴醌，并作为已知合成的关键酶。据报道称抗氧化剂通过氧化酪氨酸酶来抑制 其活性，抑制化学反应产生黑色素，它们改变了形成黑色素的结构，并展现出美白的效果。 研究表明由于海蓬子的抗氧化活性物质在其组织中，研究其提取物的潜能，可用来作为皮 肤的抗氧化剂和美白剂。因为，肌肤的美白主要是受黑色素含量和酪氨酸酶活性的影响。
技术实现思路
本专利技术的目的揭示海蓬子提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用，为预防和治疗色 素沉着疾病提供实验依据。本专利技术的技术方案分别制备海蓬子水提物、海蓬子醇提物、海蓬子超声波水提 物、海蓬子超声波醇提物，分别经蒸馏浓缩和旋转蒸发仪蒸发浓缩得到浓缩物，对酪氨酸合 成酶合成活性的抑制作用进行了研究。为化妆品行业提供新的天然酪氨酸合成酶抑制剂。本专利技术的有益效果当今研究和开发利用生长于广袤海岸荒漠和海滩上的盐生植 物，已成为当今世界农业的重大课题，在盐碱地上耕作是一种新的思维方式。因为海蓬子生 长在不毛之地的盐碱地上，土地费用比较低。另外，它无虫害，不需要用农药，也不需要锄 草，海蓬子种植管理费用不高。因而海蓬子提取物可以作为天然美白活性物质应用于美白 护肤品和功能食品，也可以作为预防和治疗黑色素瘤等色斑疾病的药物进行开发。为化妆 品行业提供了新的廉价的天然美白素材。附图说明图1实施例1中各种提取物对酪氨酸酶活性的抑制效果图。图2实施例2中不同浓缩方式对酪氨酸酶活性的抑制效果。图3实施例3中乙醇的配伍作用对海蓬子提取物抑制酪氨酸酶活性的效果。图4实施例4中对出芽短梗霉细胞酪氨酸酶活性的抑制率分析。图5实施例5中对出芽短梗霉细胞黑色素合成抑制的培养效果图。图6实施例5中对出芽短梗霉细胞黑色素合成的影响。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步说明，但实施例不限制本专利技术的保护范围。实施例1各种提取物对酪氨酸酶活性的抑制效果分析海蓬子水(醇)提物的制备 取研磨好的海蓬子粉末3g加入60mL蒸馏水(或60mL体积分数为60 %乙醇)浸 泡24h，回流提取Ih0海蓬子超声波水(醇)提物的制备取研磨好的海蓬子粉末3g加入60mL蒸馏水(或60mL体积分数为60 %乙醇)浸 泡半小时，煮沸30min，冷却至室温，用超声波(59kHz，500W，65°C )提取lh。酪氨酸合成酶活性抑制率的测定取上述海蓬子提取液2mL，加pH 6. 8的磷酸盐缓冲液ImL与2. Ommol/L的酪氨酸 溶液2mL，待混合均勻后在冰浴中迅速加入酪氨酸合成酶溶液lmL，混勻，37°C温育lOmin， 于412nm处测定吸光度。酪氨酸合成酶抑制率(1% )计算公式为I%= [(A-B)-(C-D)]/[A-B] X 100A 未加提取物样品的加酶混合液所测的吸光度；B 未加提取物样品亦未加酶的混合液所测的吸光度；C 加提取物样品和酶的混合液所测的吸光度；D 加提取物样品而未加酶的混合液所测的吸光度通过图1可以清晰地看到，由于乙醇的配伍作用，醇提物比水提物对酪氨酸合成 酶的抑制效果更显著；因为超声波破碎细胞的空化作用和强化传质的机械作用，从而更有 利于海莲子活性物的释出，表现为超声波的醇提物比超声波的水提物具有更强的抑制作 用。故最适宜选取超声波醇提方案来提取海蓬子中酪氨酸合成酶的抑制剂。实施例2不同浓缩方式对酪氨酸酶活性的抑制效果分析用蒸馏法浓缩提取液置于6000r/min离心4min，得上清液，置于沸水锅里，直至试管内的液体挥 发至大概5mL。用旋转蒸发法浓缩提取液置于旋转蒸发仪以60°C浓缩蒸发lh，混合液于6000r/min离心4本文档来自技高网...

【技术保护点】
根据权利要求１所述的海蓬子提取物在抑制酪氨酸酶活性中的应用，其特征是：本专利技术所述的海蓬子提取物，是指海蓬子水提物、海蓬子醇提物、超声波水提物、超声波醇提物。

【技术特征摘要】
根据权利要求1所述的海蓬子提取物在抑制酪氨酸酶活性中的应用，其特征是本发明所述的海蓬子提取物，是指海蓬子水提物、海蓬子醇提物、超声波水提物、超声波醇提物。2.根据权利要求2所述的海蓬子提取物，其特征是海蓬子水提物、海蓬子醇提物、超 声波水提物、超声波醇提物均分别经蒸馏浓缩和旋转蒸发仪蒸发浓缩所得浓缩物。3.根据权利要求3所述的海蓬子提取浓缩物，其特征是对酪氨酸合成酶活性的抑制 作用研究结果表明，蒸馏浓缩和旋转蒸发仪蒸发浓缩对提取物的抑制率几乎没有影响。4.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：余晓红，邵荣，陈洪兴，刘汉文，许伟，申玉香，郑清，张龙，
申请(专利权)人：盐城工学院，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]