【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物制药，尤其涉及一种动物igg抗体冻干粉制剂及其制备工艺。
技术介绍
1、igg属哺乳动物体内的多功能免疫球蛋白，也是再次免疫应答的主要抗体。在生物技术及体外诊断行业，动物igg应用较为广泛。作为免疫沉淀(ip)、免疫共沉淀(co-ip)、染色质免疫沉淀(chip)、免疫组化、免疫荧光等抗体相关实验的特定抗体的对照igg时，可以排除igg本身和特定目的蛋白或其他特定生物分子的非特异性结合；作为参考抗原或大多数免疫分析实验中稳定剂；作为阻断剂，可以结合所有交叉反应性抗体，如hamaigg、类风湿因子和ha等。
2、目前大多数动物igg产品均是液体形式。然而以液体制剂的形式储存的蛋白，容易发生理化反应，同时在长途运输中，剧烈震荡会使蛋白质容易变性。而真空冷冻干燥(冻干)是指先通过低温把水分冻结，然后在真空条件下升华干燥，除去冻结的自由水，待升华结束后再进行解析干燥，除去部分结合水的干燥方法。由于冻干后药品呈多孔状，能长时间稳定贮存，并且重新复溶于水，能保持活性，因此冷冻干燥技术广泛应用于生物制药行业。
3、目前的冻干制剂还存在以下缺陷，一是冻干制剂中采用了牛血清和人人血白蛋白，可能会存在引入源病毒，存在安全性的问题；二是冻干制剂中加入了右旋糖酐冻干保护剂，使得冻干制剂的复溶时间较长。因此，需要一种安全性高且复溶时间短的冻干制剂。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提出了无需牛血清和人人血白蛋白，且复溶时间短的动物igg抗体冻干粉制剂及其制备方
2、本专利技术的技术方案是这样实现的：一方面，本专利技术提供了一种动物igg抗体冻干粉制剂，包括igg抗体和冻干保护剂，所述冻干保护剂的组分包括糖类、聚肌氨酸、甲氧基果胶和表面活性剂。
3、糖类为多羟基亲水化合物，其羟基能替代水分子与蛋白质分子表面部分结合，并能填充到蛋白质分子的空隙中，有效地限制蛋白质分子内部的结构发生变化，在冻干时保护蛋白，防止蛋白变质失活，提高蛋白的稳定性。
4、聚肌氨酸和甲氧基果胶替代了牛血清和人人血白蛋白，增加了抗体的安全性，同时也起到骨架支撑作用，提高了抗体的稳定性。
5、此外，甲氧基果胶和聚肌氨酸所带电荷发生静电作用，形成亲水性复合物，能避免igg抗体蛋白聚合，复溶时igg抗体蛋白能均匀的分散，可以缩短冻干制剂的溶解时间，同时由于静电的相互作用防止复溶时沉淀和浑浊的发生。
6、同时聚肌氨酸在冷冻过程中具有调节ph值的能力，能稳定igg抗体蛋白质的结构，保持蛋白活性；聚肌氨酸与糖类、甲氧基果胶和igg抗体蛋白的相容性好，可以加快冻干制剂的溶解。
7、在以上技术方案的基础上，优选的，按照重量份数计算，所述冻干保护剂的组分包括糖类20～50份、聚肌氨酸3～5份、甲氧基果胶5～8份和表面活性剂3～5份。
8、在以上技术方案的基础上，优选的，所述冻干保护剂还包括1～3重量份数的甘油葡萄糖苷。
9、甘油葡萄糖苷是一种由葡萄糖基和甘油通过糖苷键连接而成的糖苷化合物，可以形成一层保护膜，覆盖在蛋白质颗粒表面，防止蛋白质在高温下发生变性和降解，增加igg抗体的耐高温性；同时甘油葡萄糖苷还可以保持冻干粉的含水量，避免长时间保存时出现结块和吸潮的现象。
10、另一方面，甘油葡萄糖苷的加入可以降低冻干时糖类结晶的形成，减少颗粒之间的相互作用力，从而减少冻干粉储藏期间结块的发生。
11、在以上技术方案的基础上，优选的，所述冻干保护剂还包括3～5重量份数的亚氨基二琥珀酸盐。
12、亚氨基二琥珀酸盐可以维持冻干粉中的ph稳定性，延长保存期和抗体的活性，有效降低了igg抗体的损失；同时亚氨基二琥珀酸盐可以螯合冻干保护剂中的金属离子，减少长期保存后冻干制剂复溶时沉淀和浑浊的情况发生。
13、在以上技术方案的基础上，优选的，所述糖类为蔗糖、海藻糖和普鲁兰多糖中的一种或多种组合；所述表面活性剂为n-十二烷基肌氨酸钠盐或吐温。
14、另一方面，本专利技术还提供了一种动物igg抗体冻干粉制剂的制备工艺，将冻干保护剂各组分溶解于pbs缓冲液，无菌过滤后灌装获得冻干保护液；然后将igg抗体和冻干保护液混合，放入冷冻干燥机中经过预冻、循环升华干燥和循环解析干燥后得到动物igg冻干粉制剂。
15、在以上技术方案的基础上，优选的，所述冻干保护剂：pbs缓冲液的重量比为1:(3～4)；所述igg抗体：冻干保护液的体积比为1:(2～3)。
16、在以上技术方案的基础上，优选的，所述预冻方法为：将样品放在冷冻干燥机中，设定温度为0～5℃，降温时间20～30min，预冻0.5～1h；继续降温至-45～-40℃，降温时间40～60min，维持4～6h。
17、在以上技术方案的基础上，优选的，所述循环升华干燥方法为：第一次升华干燥：冷冻干燥机保持真空，然后升温至-35～-30℃，升温时间40～60min，维持10～12h；第二次升华干燥：继续升温至-25～-20℃，升温时间40～60min，维持10～15h。
18、在以上技术方案的基础上，优选的，所述循环解析干燥方法为：第一次解析干燥：冷冻干燥机保持真空，然后升温至15～20℃，升温时间40～60min，维持4～5h进行解析干燥；第二次解析干燥：继续升温至25～30℃，升温时间5～10min，维持4～5h进行解析干燥。
19、本专利技术的一种动物igg抗体冻干粉制剂及其制备工艺相对于现有技术具有以下有益效果：
20、(1)聚肌氨酸和甲氧基果胶替代了牛血清和人人血白蛋白，增加了抗体的安全性，同时也起到骨架支撑作用，提高了抗体的稳定性。此外，甲氧基果胶和聚肌氨酸所带电荷发生静电作用，形成亲水性复合物，能避免igg抗体蛋白聚合，复溶时igg抗体蛋白能均匀的分散，可以缩短冻干制剂的溶解时间，同时由于静电的相互作用防止复溶时沉淀和浑浊的发生。本专利技术的动物igg抗体冻干粉制剂7-9s即可溶解，且溶解液清澈无沉淀，无浑浊。
21、(2)本专利技术冻干保护剂中的甘油葡萄糖苷可以形成一层保护膜，覆盖在蛋白质颗粒表面，防止蛋白质在高温下发生变性和降解，增加动物igg抗体的耐高温性。
22、(3)本专利技术冻干保护剂中的亚氨基二琥珀酸盐可以维持冻干粉中的ph稳定性，延长保存期和抗体的活性，有效降低了igg抗体的损失。
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1.一种动物IgG抗体冻干粉制剂，其特征在于：包括IgG抗体和冻干保护剂，所述冻干保护剂的组分包括糖类、聚肌氨酸、甲氧基果胶和表面活性剂。
2.如权利要求1所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂，其特征在于：按照重量份数计算，所述冻干保护剂的组分包括糖类20～50份、聚肌氨酸3～5份、甲氧基果胶5～8份和表面活性剂3～5份。
3.如权利要求2所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂，其特征在于：所述冻干保护剂还包括1-3重量份数的甘油葡萄糖苷。
4.如权利要求3所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂，其特征在于：所述冻干保护剂还包括3-5重量份数的亚氨基二琥珀酸盐。
5.如权利要求1所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂，其特征在于：所述糖类为蔗糖、海藻糖和普鲁兰多糖中的一种或多种组合；所述表面活性剂为N-十二烷基肌氨酸钠盐或吐温。
6.如权利要求1-4任一项所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂的制备工艺，其特征在于：将冻干保护剂各组分溶解于PBS缓冲液，无菌过滤后灌装获得冻干保护液；然后将IgG抗体和冻干保护液混合，放入冷冻干燥机中经过预
7.如权利要求6所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂的制备工艺，其特征在于：所述冻干保护剂：PBS缓冲液的重量比为1:(3～4)；所述IgG抗体：冻干保护液的体积比为1:(2～3)。
8.如权利要求7所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂的制备工艺，其特征在于：所述预冻方法为：将样品放在冷冻干燥机中，设定温度为0～5℃，降温时间20～30min，预冻0.5～1h；继续降温至-45～-40℃，降温时间40～60min，维持4～6h。
9.如权利要求8所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂的制备工艺，其特征在于：所述循环升华干燥方法为：第一次升华干燥：冷冻干燥机保持真空，然后升温至-35～-30℃，升温时间40～60min，维持10～12h；
10.如权利要求9所述的一种动物IgG抗体冻干粉制剂的制备工艺，其特征在于：所述循环解析干燥方法为：第一次解析干燥：冷冻干燥机保持真空，然后升温至15～20℃，升温时间40～60min，维持4～5h进行解析干燥；
...【技术特征摘要】
1.一种动物igg抗体冻干粉制剂，其特征在于：包括igg抗体和冻干保护剂，所述冻干保护剂的组分包括糖类、聚肌氨酸、甲氧基果胶和表面活性剂。
2.如权利要求1所述的一种动物igg抗体冻干粉制剂，其特征在于：按照重量份数计算，所述冻干保护剂的组分包括糖类20～50份、聚肌氨酸3～5份、甲氧基果胶5～8份和表面活性剂3～5份。
3.如权利要求2所述的一种动物igg抗体冻干粉制剂，其特征在于：所述冻干保护剂还包括1-3重量份数的甘油葡萄糖苷。
4.如权利要求3所述的一种动物igg抗体冻干粉制剂，其特征在于：所述冻干保护剂还包括3-5重量份数的亚氨基二琥珀酸盐。
5.如权利要求1所述的一种动物igg抗体冻干粉制剂，其特征在于：所述糖类为蔗糖、海藻糖和普鲁兰多糖中的一种或多种组合；所述表面活性剂为n-十二烷基肌氨酸钠盐或吐温。
6.如权利要求1-4任一项所述的一种动物igg抗体冻干粉制剂的制备工艺，其特征在于：将冻干保护剂各组分溶解于pbs缓冲液，无菌过滤后灌装获得冻干保护液；然后将igg抗体和冻干保护液混合，放入...
【专利技术属性】
技术研发人员：汪玉宝，朱文武，韩强，王秋平，
申请(专利权)人：武汉鹰达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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