【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物学疾病检测，具体为一种hrp-ck19抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、ck19是一种ⅰ型细胞角蛋白，主要标记各种单层上皮如腺上皮和导管上皮，并可见于鳞状上皮和表皮的基底层，是验证上皮分化的一个很好的标志物。在肝细胞中不表达，而胆管上皮表达，可用于转移性腺癌与肝细胞癌以及胆管细胞癌与肝细胞癌的鉴别诊断，此外在甲状腺病变中，可联合galectin-3用于甲状腺乳头状癌的诊断。ck19这些临床上的应用都必须通过免疫组织化学（ihc）或免疫细胞化学技术（icc）来实现。
2、但是目前常用的ck19免疫组化试剂盒存在如下缺点：1、所需染色时间较长，不能满足临床的术中快速病理诊断需求，所以限制了其应用， 只能用于常规石蜡切片的病理辅助诊断，无法用于术中冰冻切片的病理辅助诊断。2、信号检测都是通过在ck19抗体上化学偶联hrp等信号酶来实现的，偶联效率难以控制，导致不同批次间的抗体染色结果差异较大；另外偶联得率很低，对抗体造成很大的浪费。因此临床上亟需一种染色时间短且染色结果精确、稳定的针对ck19靶标检测的免疫组化试剂盒。
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术提供了一种hrp- ck19抗体，该抗体为具有信号蛋白标签hrp的ck19生物融合酶抗体，信号蛋白标签hrp完全随ck19抗体一起分泌。
2、本专利技术所采用的技术方案是这样的：一种hrp-ck19抗体，所述hrp-ck19抗体包括重链cdr1、重链cdr2、重链cdr3，轻链cdr
3、所述重链cdr1的氨基酸序列如seq id no:1所示；
4、所述重链cdr2的氨基酸序列如seq id no:2所示；
5、所述重链cdr3的氨基酸序列如seq id no:3所示；
6、所述轻链cdr1的氨基酸序列如seq id no:4所示；
7、所述轻链cdr2的氨基酸序列如seq id no:5所示；
8、所述轻链cdr3的氨基酸序列如seq id no:6所示。
9、进一步地，所述hrp-ck19抗体hrp氨基酸序列在轻链cdr1区。
10、进一步地，所述hrp-ck19抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是如seq idno：7和 seq id no：8所示的氨基酸序列。
11、本专利技术还提供了编码上述hrp-ck19抗体的核苷酸序列，包括编码所述hrp-ck19抗体重链可变区的核苷酸序列seq id no：9和编码所述hrp-ck19抗体轻链可变区的核苷酸序列 seq id no：10。
12、本专利技术还提供了一种表达载体，所述表达载体含有seq id no：9或seq id no：10所述的核苷酸序列。
13、优选地，所述表达载体构建中，linker序列如seq id no：20所示。
14、本专利技术还提供了含有上述表达载体的重组宿主细胞。
15、本专利技术提供了一种制备上述hrp-ck19抗体的方法，所述方法包括：
16、1)在合适的条件下培养上述重组宿主细胞表达抗体；
17、2)然后从宿主细胞中纯化、收集抗体
18、本专利技术还提供了上述的hrp-ck19抗体在制备ck19靶标免疫组化检测试剂盒中的应用。
19、区别于现有技术，本专利技术的优点为：① hrp- ck19抗体自带信号蛋白标签hrp，完全随抗体一起分泌，没有任何异质性反应，与现有的通过异质化学偶联hrp的常规ck19抗体不同，连接更紧密，在使用过程中更加大大降低了批次间差异；②hrp- ck19抗体为无需标记二抗，简化了实验步骤，提高了检测效率。
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1.一种HRP-CK19抗体，其特征在于，所述HRP-CK19抗体包括重链CDR1、重链CDR2、重链CDR3，轻链CDR1、轻链CDR2和轻链CDR3；
2.根据权利要求1所述的HRP-CK19抗体，其特征在于，所述HRP-CK19抗体HRP氨基酸序列在轻链CDR1区。
3.根据权利要求1或2所述的HRP-CK19抗体，其特征在于，所述HRP-CK19抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是如SEQ ID NO：7和 SEQ ID NO：8所示的氨基酸序列。
4.编码权利要求1所述HRP-CK19抗体的核苷酸序列，其特征在于，包括编码所述HRP-CK19抗体重链可变区的核苷酸序列SEQ ID NO：9和编码所述HRP-CK19抗体轻链可变区的核苷酸序列 SEQ ID NO：10。
5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有SEQ ID NO：9或 SEQ ID NO：10所述的核苷酸序列。
6.根据权利要求5所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体构建中，linker序列如SEQ ID NO：20所示。
8.一种制备权利要求1所述的HRP-CK19抗体的方法，其特征在于，所述方法包括：
9.权利要求1所述的HRP-CK19抗体在制备CK19靶标免疫组化检测试剂盒中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种hrp-ck19抗体，其特征在于，所述hrp-ck19抗体包括重链cdr1、重链cdr2、重链cdr3，轻链cdr1、轻链cdr2和轻链cdr3；
2.根据权利要求1所述的hrp-ck19抗体，其特征在于，所述hrp-ck19抗体hrp氨基酸序列在轻链cdr1区。
3.根据权利要求1或2所述的hrp-ck19抗体，其特征在于，所述hrp-ck19抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是如seq id no：7和 seq id no：8所示的氨基酸序列。
4.编码权利要求1所述hrp-ck19抗体的核苷酸序列，其特征在于，包括编码所述hrp-ck19抗体重链可变区的核苷酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：贾凤芹，
申请(专利权)人：普睿玛南京生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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