【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析检测，尤其是涉及一种盐酸赖氨酸及磷酸氢钙的蒸发光散射检测方法。
技术介绍
1、现有质量标准及可查询到的资料中，盐酸赖氨酸检测方法有紫外-可见分光光度法、蒸发光散射法、柱前衍生-高效液相色谱法，磷酸氢钙有滴定法、原子吸收分光光度法，均为分别单独测定，其中制剂中滴定法易受干扰，颜色难以观察，专属性较差，紫外-可见分光光度法需测定标准曲线，操作较为繁琐，容易带来误差，所有方法均为仅对单一成分进行测定。
2、蒸发光散射检测器是一种通用型的检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，而不需要样品含有发色基团，其工作原理是：将色谱柱洗脱液雾化形成气溶胶，然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发，最后余下的不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中得到检测。相比目前色谱检测中使用最多的紫外检测器，蒸发光散射检测器具有更高的通用性，不受物质本身结构的限制；蒸发光散射检测器的灵敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适用于绝大多数不挥发和半挥发物质的分析检测，尤其对于天然产物和中药类等复杂物质分析更具优势。
3、但是现有技术的蒸发光散射检测器仅仅对盐酸赖氨酸一种成分进行检测，复方制剂中，需要进行2次测定，工作量大且相对较为繁琐。因此，提供一种能同时检测两种成分的蒸发光散射检测方法是非常必要的。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种盐酸赖氨酸及磷酸氢钙的蒸发光散射检测方法，本专利技术提供的检测方法能同时对两种成分进行测定，灵敏度高，专属
2、本专利技术提供了一种盐酸赖氨酸及磷酸氢钙的蒸发光散射检测方法，包括：
3、a)将待测样品采用溶剂溶解，得到待测液；
4、将盐酸赖氨酸和磷酸氢钙对照品采用溶剂溶解，得到对照品溶液；
5、b)将待测液和对照品溶液分别采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法进行测定，得到待测液的色谱图和对照品溶液的色谱图；
6、色谱条件为：色谱柱为c18柱；
7、流动相a为乙腈-0.01mol/l乙酸铵按照60:40～30:70的体积比混合，ph为3.0～5.0；
8、流动相b为乙腈-甲醇-0.2％冰醋酸的按照10:5:85～25:20:55的体积比混合，梯度洗脱。
9、优选的，步骤b)后还包括：根据所述对照品溶液的浓度、对照品在色谱图中的峰面积和待测样品中相对应成分在色谱图中峰面积，基于步骤b)所述的检测条件，以外标法进行定量。
10、优选的，所述梯度洗脱具体为：
11、0～30min，a相：100％～75％、b相：0％～25％；
12、30～31min，a相：75％～100％、b相：25％～0％；
13、31～35min，a相：100％、b相：0％。
14、优选的，所述色谱柱为c18柱，规格为5μm，4.6×250mm；柱温30℃～60℃。
15、优选的，所述流动相流速为0.5～0.8ml/min；进样量为20μl。
16、优选的，所述蒸发光散射检测器中：
17、蒸发温度为70～90℃，雾化温度为75～100℃，载气流速为每分钟0.8～2.0l。
18、优选的，所述盐酸赖氨酸的进样浓度范围是0.0525～0.1575mg/ml；所述磷酸氢钙的进样浓度范围是0.0511～0.1532mg/ml；
19、盐酸赖氨酸的定量限为1.458ng；磷酸氢钙的定量限为1.474ng。
20、优选的，所述色谱条件为：
21、流动相a为乙腈-0.01mol/l乙酸铵按照50:50～40:60的体积比混合，ph为4.0～4.5；
22、流动相b为乙腈-甲醇-0.2％冰醋酸的按照15:10:75～20:15:65的体积比混合，梯度洗脱；
23、流动相流速为0.6～0.8ml/min；柱温40℃～60℃。
24、蒸发温度为80～85℃，雾化温度为85～90℃，载气流速为每分钟1～2.0l。
25、提取方法为超声提取或振摇提取。
26、优选的，步骤a)所述提取方法为超声提取或振摇提取；
27、所述溶剂包括稀盐酸、水、0.1～1％甲酸溶液、含0.1％冰醋酸的10～30％的甲醇溶液或乙腈溶液。
28、优选的，步骤a)所述待测样品为赖氨酸磷酸氢钙片、赖氨酸磷酸氢钙颗粒剂、赖氨酸磷酸氢钙粉剂或赖氨酸磷酸氢钙汤剂与现有技术相比，本专利技术提供了种盐酸赖氨酸及磷酸氢钙的蒸发光散射检测方法，包括：a)将待测样品采用溶剂溶解，得到待测液；将盐酸赖氨酸和磷酸氢钙对照品采用溶剂溶解，得到对照品溶液；b)将待测液和对照品溶液分别采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法进行测定，得到待测液的色谱图和对照品溶液的色谱图；色谱条件为：色谱柱为c18柱；流动相a为乙腈-0.01mol/l乙酸铵按照60:40～30:70的体积比混合，ph为3.0～5.0；流动相b为乙腈-甲醇-0.2％冰醋酸的按照10:5:85～25:20:55的体积比混合，梯度洗脱。本专利技术采用一种新的蒸发光散射检测方法，对两个成分同时测定，解决了分别测定的问题，专属性强，灵敏度高，操作简便，准确度好，减少时间，提高了工作效率。
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1.一种盐酸赖氨酸及磷酸氢钙的蒸发光散射检测方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B)后还包括：根据所述对照品溶液的浓度、对照品在色谱图中的峰面积和待测样品中相对应成分在色谱图中峰面积，基于步骤B)所述的检测条件，以外标法进行定量。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为C18柱，规格为5μm，4.6×250mm；柱温30℃～60℃。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述流动相流速为0.5～0.8mL/min；进样量为20μL。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蒸发光散射检测器中：
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述盐酸赖氨酸的进样浓度范围是0.0525～0.1575mg/ml；所述磷酸氢钙的进样浓度范围是0.0511～0.1532mg/ml；
8.根据权利要求1～6任意一项所述的方法，其特征在于，所述色谱条件为：
9.根据权利要求1所述
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤A)所述待测样品为赖氨酸磷酸氢钙片、赖氨酸磷酸氢钙颗粒剂、赖氨酸磷酸氢钙粉剂或赖氨酸磷酸氢钙汤剂。
...【技术特征摘要】
1.一种盐酸赖氨酸及磷酸氢钙的蒸发光散射检测方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b)后还包括：根据所述对照品溶液的浓度、对照品在色谱图中的峰面积和待测样品中相对应成分在色谱图中峰面积，基于步骤b)所述的检测条件，以外标法进行定量。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为c18柱，规格为5μm，4.6×250mm；柱温30℃～60℃。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述流动相流速为0.5～0.8ml/min；进样量为20μl。
【专利技术属性】
技术研发人员：常红，孟钢，蔡秀华，张涛，姜黎黎，刘俊频，秦思莲，伦宗慧，刘爽，
申请(专利权)人：修正药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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