【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域；具体来说，本专利技术涉及肝癌靶标、肝癌抑制试剂及其应用。
技术介绍
1、肝癌是一种复杂性疾病，与多种危险因素密切相关。如黄曲霉毒素、饮酒和吸烟、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等危险因素都可能助长了肝癌的发生发展。由于肝癌恶性程度高，发展速度快，转移能力强，治疗后易复发。临床上，单纯的手术治疗、肝动脉结扎插管治疗、介入治疗、局部治疗、放射治疗等治疗手段均难以取得满意的效果。治疗药物方面，索拉非尼是抑制被批准治疗肝癌的药物。而一些研究表明，索拉菲尼辅助治疗并不能提高无复发生存率和总生存率；其它的多种治疗方案对于肝癌的疗效也并非理想或尚不完善。
2、作为肝癌的危险因素之一，乙型肝炎病毒(hbv)属于肝病毒科，是一种dna病毒，其基因组呈环状，长度在3200bp(pmid:32102898)。近些年，小核酸药物研发进展很快，为hbv相关疾病的治疗提供了新的方向，但是没有被批准临床用药的药物。目前的慢病hbv感染的主要研发策略是针对hbv病毒本身来制定，尚缺少用于阻断hbv病毒和人相互作用的关键靶点。此外，本领域尚没有找到与hbv基因组密切关联且对于肝癌的治疗具有作用的靶点。
3、因此，寻找治疗肝癌及阻断肝癌进程的新靶点及其靶向抑制剂迫在眉睫。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供新型的肝癌靶标(治疗靶标或检测靶标)、肝癌抑制试剂及其应用。
2、在本专利技术的第一方面，提供分离的多核苷酸在制备(i)抑制肝癌及其进程的靶向试剂的
3、在一种或多种实施方式中，所述变体或同源的多核苷酸为与所述seq id no:1，seq id no:2，seq id no:3，seq id no:4和/或seq id no:5所示核苷酸序列的多核苷酸相比，具有80％以上、85％以上、90％以上、92％以上、95％以上、96％以上、98％以上、99％以上、99.5％以上、99.8％以上序列同一性的多核苷酸。
4、在一种或多种实施方式中，所述分离的多核苷酸不包括全长的病毒基因组序列。
5、在一种或多种实施方式中，所述分离的多核苷酸的序列长度为20～500，20～400，20～300，20～200，20～180或21～30bp(如21、23、25、26bp)。
6、在一种或多种实施方式中，所述seq id no:1，seq id no:2，seq id no:3，seq idno:4和/或seq id no:5所示核苷酸序列的多核苷酸被分别应用。
7、在一种或多种实施方式中，所述seq id no:1，seq id no:2，seq id no:3，seq idno:4和/或seq id no:5所示核苷酸序列的多核苷酸中的两条或多条被组合(如进行融合、串联或混合等)应用。
8、在一种或多种实施方式中，所述分离的多核苷酸包括seq id no:1所示核苷酸序列的多核苷酸。
9、在一种或多种实施方式中，所述的抑制肝癌包括针对肝癌各个时期(包括早期、中期或晚期的肿瘤)的抑制，或其癌前病变。
10、在一种或多种实施方式中，所述的肝癌包括原位癌和转移癌。
11、在一种或多种实施方式中，(b)中，所述多核苷酸的片段为包括核心序列的片段；所述的核心序列包括：seq id no:7，seq id no:8，seq id no:9，seq id no:10和/或seqid no:11所示的核苷酸序列。
12、在一种或多种实施方式中，所述的靶向试剂为靶向抑制试剂，以所述多核苷酸为靶标，干扰或抑制该多核苷酸(如dna水平)、其转录本(如rna水平)或其翻译产物(如蛋白水平)的功能；较佳地，所述靶向抑制试剂包括(但不限于)：反义核苷酸(aso)、干扰分子(如sirna，mirna，shrna，dsrna等)、基因编辑试剂(如sgrna等)，或能表达或形成所述反义核苷酸、干扰分子、基因编辑试剂的构建物；较佳地，所述的靶向试剂为反义核苷酸，靶向于所述核心序列；更佳地，所述的反义核苷酸的序列如seq id no:13，seq id no:14，seq id no:15，seq id no:16，seq id no:17。
13、在一种或多种实施方式中，所述的靶向试剂抑制肝癌细胞的增殖，或抑制肝癌细胞的迁移/转移。
14、在本专利技术的另一方面，提供一种制备抑制肝癌及其进程的靶向试剂的方法，包括：
15、(1)提供分离的多核苷酸，包括：(a)具有seq id no:1，seq id no:2，seq id no:3，seq id no:4和/或seq id no:5所示核苷酸序列的多核苷酸或与其同源的多核苷酸；或(b)(a)的多核苷酸的片段或变体；较佳地，(b)中，所述多核苷酸的片段为包括核心序列的片段；所述的核心序列包括：seq id no:7，seq id no:8，seq id no:9，seq id no:10和/或seq id no:11所示的核苷酸序列；
16、(2)以(1)的多核苷酸作为靶标，设计特异性靶向该靶标的靶向试剂；所述的靶向试剂为靶向抑制试剂，以所述多核苷酸为靶标，干扰或抑制该多核苷酸、其转录本或其翻译产物的功能；较佳地，所述靶向抑制试剂包括(但不限于)：反义核苷酸(aso)、干扰分子(如sirna，mirna，shrna，dsrna等)、基因编辑试剂(如sgrna等)，或能表达或形成所述反义核苷酸、干扰分子、基因编辑试剂的构建物；较佳地，所述的靶向试剂为反义核苷酸，靶向于所述核心序列；更佳地，所述的反义核苷酸的序列如seq id no:13，seq id no:14，seq id no:15，seq id no:16，seq id no:17。
17、在一种或多种实施方式中，对于所述靶标，可以制备一组(针对其中一条多核苷酸)或多组(针对多条多核苷酸)靶向试剂。
18、在一种或多种实施方式中，所述的靶向试剂包括经修饰或未经修饰的核酸试剂。所述的修饰例如基于核酸链骨架修饰技术等手段进行，所述的修饰基本不改变寡核苷酸分子结合特性；优选那些能够提高核酸分子稳定性的修饰。例如，所述的修饰为du修饰，硫代修饰，或在核糖的2’位置进行烷基修饰。
19、在一种或多种实施方式中，所述肝癌是以hbv感染为诱发因素的肝癌。
20、在一种或多种实施方式中，所述肝癌是hbv病毒与感染者相互作用(如长期或持续的相互作用)导致的肝癌。
21、在本专利技术的另一方面，提供抑制肝癌及其进程的靶向试剂，其为靶向于分离的多核苷酸的靶向抑制试剂；其中，所述多核苷酸包括：(a)具有本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.分离的多核苷酸在制备(i)抑制肝癌及其进程的靶向试剂的用途；其中，所述的多核苷酸包括：
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(b)中，所述多核苷酸的片段为包括核心序列的片段；所述的核心序列包括：SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8，SEQ ID NO:9，SEQ ID NO:10和/或SEQ ID NO:11所示的核苷酸序列。
3.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述的靶向试剂为靶向抑制试剂，以所述多核苷酸为靶标，干扰或抑制该多核苷酸、其转录本或其翻译产物的功能；较佳地，所述靶向抑制试剂包括：反义核苷酸、干扰分子、基因编辑试剂，或能表达或形成所述反义核苷酸、干扰分子、基因编辑试剂的构建物；较佳地，所述的靶向试剂为反义核苷酸，靶向于所述核心序列；更佳地，所述的反义核苷酸的序列如SEQ ID NO:13，SEQ ID NO:14，SEQ ID NO:15，SEQ ID NO:16，SEQ ID NO:17；
4.一种制备抑制肝癌及其进程的靶向试剂的方法，包括：
5.抑制肝癌及其进程的靶向试剂，其为靶向于分离的多
6.权利要求5所述的靶向试剂在制备抑制肝癌及其进程的药物组合物中的应用。
7.一种抑制肝癌的药物组合物或药盒，其特征在于，所述药物组合物中包括权利要求5所述的靶向试剂；或，所述药盒中包括所述的药物组合物。
8.一种筛选缓解或治疗肝癌的潜在物质的方法，所述方法包括：
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤(1)包括：在测试组中，将候选物质加入到表达或含有所述多核苷酸的体系中；和/或
10.一种抑制肝癌细胞的方法，包括：给予需要抑制的对象有效量的所述的靶向试剂或药物组合物。
11.多核苷酸在制备进行肝癌检测的检测试剂或试剂盒中的用途；所述的多核苷酸包括：(a)具有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的多核苷酸或与其同源的多核苷酸；或(b)(a)的多核苷酸的片段或变体；较佳地，(b)中，所述多核苷酸的片段为包括核心序列的片段；所述的核心序列包括：SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8，SEQ ID NO:9，SEQ ID NO:10和/或SEQ IDNO:11所示的核苷酸序列。
12.特异性识别或扩增多核苷酸的检测试剂的用途，用于制备进行肝癌检测的试剂盒；所述的多核苷酸包括：(a)具有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的多核苷酸或与其同源的多核苷酸；或(b)(a)的多核苷酸的片段或变体；较佳地，(b)中，所述多核苷酸的片段为包括核心序列的片段；所述的核心序列包括：SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8，SEQ ID NO:9，SEQ ID NO:10和/或SEQ ID NO:11所示的核苷酸序列；较佳地，所述的检测试剂包括：特异性扩增所述多核苷酸的引物、特异性识别所述多核苷酸的探针或特异性识别所述多核苷酸的芯片；更佳地，所述引物是如SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20所示序列的引物。
13.一种制备进行肝癌检测的检测试剂的方法，包括：以多核苷酸为对象，制备特异性识别或扩增所述多核苷酸的试剂；所述多核苷酸包括：(a)具有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的多核苷酸或与其同源的多核苷酸；或(b)(a)的多核苷酸的片段或变体；较佳地，(b)中，所述多核苷酸的片段为包括核心序列的片段；所述的核心序列包括：SEQ ID NO:7，SEQ IDNO:8，SEQ ID NO:9，SEQ ID NO:10和/或SEQ ID NO:11所示的核苷酸序列；较佳地，所述的检测试剂包括：特异性扩增所述多核苷酸的引物、特异性识别所述多核苷酸的探针或特异性识别所述多核苷酸的芯片；更佳地，所述引物是如SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20所示序列的引物。
...【技术特征摘要】
1.分离的多核苷酸在制备(i)抑制肝癌及其进程的靶向试剂的用途；其中，所述的多核苷酸包括：
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(b)中，所述多核苷酸的片段为包括核心序列的片段；所述的核心序列包括：seq id no:7，seq id no:8，seq id no:9，seq id no:10和/或seq id no:11所示的核苷酸序列。
3.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述的靶向试剂为靶向抑制试剂，以所述多核苷酸为靶标，干扰或抑制该多核苷酸、其转录本或其翻译产物的功能；较佳地，所述靶向抑制试剂包括：反义核苷酸、干扰分子、基因编辑试剂，或能表达或形成所述反义核苷酸、干扰分子、基因编辑试剂的构建物；较佳地，所述的靶向试剂为反义核苷酸，靶向于所述核心序列；更佳地，所述的反义核苷酸的序列如seq id no:13，seq id no:14，seq id no:15，seq id no:16，seq id no:17；
4.一种制备抑制肝癌及其进程的靶向试剂的方法，包括：
5.抑制肝癌及其进程的靶向试剂，其为靶向于分离的多核苷酸的靶向抑制试剂；
6.权利要求5所述的靶向试剂在制备抑制肝癌及其进程的药物组合物中的应用。
7.一种抑制肝癌的药物组合物或药盒，其特征在于，所述药物组合物中包括权利要求5所述的靶向试剂；或，所述药盒中包括所述的药物组合物。
8.一种筛选缓解或治疗肝癌的潜在物质的方法，所述方法包括：
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤(1)包括：在测试组中，将候选物质加入到表达或含有所述多核苷酸的体系中；和/或
10.一种抑制肝癌细胞的方法，包括：给予需要抑制的对象有效量的所述的靶向试剂或药物组合物。
11.多核苷酸在制备进行肝癌检测的检测试剂或试剂盒中的用途；所述的多核苷酸包括：(a)具有...
【专利技术属性】
技术研发人员：李振艳，
申请(专利权)人：上海伊者生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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