一种细菌检测试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术属于细菌检测领域，涉及一种细菌检测试剂盒，包括捕获探针和检测探针；所述捕获探针为连接抗菌肽的磁珠；所述检测探针为连接特异性适配体的光热粒子。利用CuS纳米颗粒的光热转换功能和过氧化物酶活性，建立温度和显色双传感平台，以开发一种高效、灵敏检测细菌的策略。实验表明，纳米磁性捕获探针对细菌表现出了良好的捕获效率，加入CuS标签后为后续的温度和显色检测提供了有效的热点，基于该方法的高特异性结合和强信号放大，结合IMB‑CuS的光热信号线性范围为101~106 CFU/mL,表现出良好的线性关系，检出限为1.407 CFU/mL。显色信号的线性范围为0~0.5μM CuS。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于试剂盒领域，具体涉及一种细菌检测试剂盒及其制备方法。

技术介绍

1、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)是革兰氏阳性菌代表，为一种常见的食源性致病微生物。传统的基于培养的检测方法被认为是“金标准”，但不能满足快速检测的需要。检测样本往往成分较为复杂，通常含有两种及以上细菌真菌或其他物质，所以分离和有效捕获目标菌成为首要解决问题。现有技术利用免疫磁分离技术(immμnomagneticseparation,ims)，先富集食品中的食源性病原菌，以集菌方法代替增菌培养，实现目标菌的快速分离、捕获。但是该技术多应用抗体捕获细菌，而抗体的制备存在制备过程繁琐、费时、成本较高、不易保存的缺点。

2、为了克服这一缺点，现有技术cn 111323596 b提供了一种金黄色葡萄球菌检测试剂盒及其制备方法，属于试剂盒领域。该试剂盒包被有金纳米颗粒的免疫磁珠探针、金纳米粒子探针、刻蚀溶液和标准菌液。所述的包被有金纳米颗粒的免疫磁珠探针是先制备包被有金纳米颗粒的磁珠，将磁珠与金黄色葡萄球菌特异性鸡卵黄抗体igy偶联得到免疫磁珠探本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种细菌检测试剂盒，其特征在于，包括捕获探针和检测探针；所述捕获探针为连接抗菌肽的磁珠；所述检测探针为连接特异性适配体的光热粒子。

2.根据权利要求1所述的细菌检测试剂盒，其特征在于，所述磁珠和抗菌肽均被修饰，二者的修饰物可发生连接反应；优选的所述磁珠由链霉亲和素修饰，抗菌肽由生物素修饰。

3.根据权利要求1所述的细菌检测试剂盒，其特征在于，所述抗菌肽的序列为：5’-Biotin-RALLRTC-3’、5’-Biotin-FFRKVLKLIRKIER-3’或 5’-Biotin-FFRKVLKLIRKIER-3’。

4.根据权利要求1所述的细菌检测...

【技术特征摘要】

1.一种细菌检测试剂盒，其特征在于，包括捕获探针和检测探针；所述捕获探针为连接抗菌肽的磁珠；所述检测探针为连接特异性适配体的光热粒子。

2.根据权利要求1所述的细菌检测试剂盒，其特征在于，所述磁珠和抗菌肽均被修饰，二者的修饰物可发生连接反应；优选的所述磁珠由链霉亲和素修饰，抗菌肽由生物素修饰。

3.根据权利要求1所述的细菌检测试剂盒，其特征在于，所述抗菌肽的序列为：5’-biotin-rallrtc-3’、5’-biotin-ffrkvlklirkier-3’或 5’-biotin-ffrkvlklirkier-3’。

4.根据权利要求1所述的细菌检测试剂盒，其特征在于，所述光热粒子包括aupd、pt、cuse、cus中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的细菌检测试剂盒，其特征在于，所述特异性适配体为5’-nh2-c6-acctgggggagtattgcggaggaaggt-3’、 5'-sh-atccgtcacccctgctctcgtcgctatgaagtaacaaagataggagcaatcgggtggtgttggctcccgtat-3’、 5'-sh-ta...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐坤，刘师彤，孙春萌，蔡茗，池雨阳，李湘，郑希，
申请(专利权)人：湖南师范大学，
类型：发明
国别省市：