丝聚蛋白基因FLG的表达促进剂制造技术

技术编号：40947302 阅读：2 留言：0更新日期：2024-04-18 20:20

本发明专利技术提供了一种角质形成细胞丝聚蛋白基因FLG的表达促进剂，其中，所述表达促进剂是卷柏提取物，所述卷柏提取物中总糖含量≥14.99wt％，总多酚含量≥2.13wt％，和/或总黄酮含量≥4.97wt％。本发明专利技术还涉及卷柏提取物作为角质形成细胞丝聚蛋白基因FLG的表达促进剂在皮肤外用剂中的应用。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化妆品原料功效研究领域，具体涉及一种来源于中药卷柏的具有上调皮肤表皮角质形成细胞丝聚蛋白基因flg表达的卷柏挥发油(脱色)，可以作为化妆品活性物原料和皮肤表皮角质形成细胞丝聚蛋白基因flg表达的促进剂。

技术介绍

1、皮肤的角质层(sc)具有形成防止内部水分流失和微生物或外源病原体入侵的作用。皮肤角质层的屏障功能对保持皮肤健康至关重要，内源性或外源性因素引起的皮肤屏障功能障碍可导致皮肤疾病，如皮肤干燥、鱼鳞病和特应性皮炎(ad)。

2、丝聚蛋白(flg)是角质层的关键结构蛋白，提供在皮肤屏障功能中发挥作用的天然保湿因子。丝聚蛋白聚集角蛋白纤维，形成角蛋白网络，将角化包膜结合起来，使角质形成细胞塌陷成扁平的角质细胞。这种复杂的网络有助于皮肤的物理强度。丝聚蛋白被胱天蛋白酶-14、钙蛋白酶1和博来霉素水解酶降解为氨基酸和氨基酸代谢产物，如反式尿酸和吡咯烷酮羧酸，它们是角质层中关键的天然保湿因子。因此，丝聚蛋白在皮肤屏障障碍的病理生理学中很重要，其缺乏或功能障碍会导致各种皮肤疾病。

3、由于丝聚蛋白在皮肤表皮分化和屏障功能中具有重要作用，因此可以通过提升丝聚蛋白在皮肤表皮角质形成细胞内的表达，促进受损皮肤表皮角质层功能的重建和恢复皮肤表皮角质层正常屏障功能。为实现上述的目的，需要寻找能够调控丝聚蛋白基因的功效活性物。

4、卷柏(selaginella tamariscina(beauv.)spring)和垫状卷柏(selaginellapulvinata(hook.et grev.)m

5、卷柏属植物化学成分具有多样性，主要化学成分是黄酮类，其次包括炔酚类、木脂素类、甾体类、生物碱类、蒽醌类等成分。现代药理及临床研究表明卷柏属植物不仅具有传统的消炎、解毒作用，而且具有抗菌、抗病毒、增强免疫、抗肿瘤、镇静镇痛、降血糖等作用。

6、专利技术人在研究具有提升丝聚蛋白表达的植物提取物时，意外地发现，采用co2超临界萃取技术提取的卷柏挥发油(脱色)有上调角质形成细胞中丝聚蛋白基因flg表达的作用，具有促进表皮角质形成细胞分化和提升表皮屏障功能的作用。

技术实现思路

1、一方面，本专利技术提供了一种角质形成细胞丝聚蛋白基因flg的表达促进剂，其中，所述表达促进剂是卷柏提取物，所述卷柏提取物中总糖含量≥14.99wt％，总多酚含量≥2.13wt％，和/或总黄酮含量≥4.97wt％。

2、在优选的实施方式中，所述卷柏提取物通过超临界流体萃取法提取得到，所述方法包括以下步骤：

3、(a)提供卷柏，机械粉碎；

4、(b)加入乙醇进行拌料；

5、(c)进行超临界流体萃取，萃取压力20-25mpa，萃取温度为40-45℃；

6、(d)收集萃取物，低温静置；

7、(e)离心，收集上层液体，过滤；

8、(f)脱色；

9、(g)滤液浓缩至浸膏状态，得到卷柏提取物。

10、在优选的实施方式中，所述步骤(a)包括机械粉碎至20-40目。在优选的实施方式中，所述步骤(b)采用95体积％的乙醇。在优选的实施方式中，所述步骤(c)还包括：co2流量为75-85l/h，超临界萃取时间约60-120min。在优选的实施方式中，所述步骤(c)还包括：分离釜i压力8-9mpa，分离釜i温度40-45℃；分离釜ii压力6-7mpa，分离釜ii温度30-35℃；分离釜iii压力6-7mpa，分离釜iii温度30-35℃。在优选的实施方式中，所述步骤(d)中所述低温静置为在0-6℃下静置12-24小时。

11、在优选的实施方式中，所述卷柏提取物的hplc分析图谱的主要峰的保留时间(峰面积％)为：uv＝254nm：峰1：5.262(2.65)；峰2：6.443(1.47)；峰3：10.03(1.21)；峰4：13.84(2.07)；峰5：15.366(5.11)；峰6：16.189(2.27)；峰7：18.623(0.91)；峰8：19.314(0.65)；峰9：19.894(0.66)；峰10：20.864(0.82)；峰11：22.748(0.97)；峰12：27.707(1.81)；峰13：29.731(1.1)；峰14：31.163(0.36)；峰15：31.515(72.15)；峰16：33.797(2.34)；峰17：34.907(0.49)；峰18：36.91(1.2)；峰19：37.942(0.8)；峰20：38.793(0.6)；峰21：39.189(0.36)。

12、在优选的实施方式中，所述表达促进剂的使用浓度至少为0.01mg/ml，优选地为0.01-0.1mg/ml。

13、在优选的实施方式中，所述促进剂的皮肤表皮角质形成细胞丝聚蛋白基因flg相对表达量≥133％，优选地为133-299％。

14、另一方面，本专利技术还涉及所述表达促进剂在皮肤外用剂中的应用，用于促进角质形成细胞中丝聚蛋白基因flg的表达。

15、在优选的实施方式中，所述皮肤外用剂选自：面霜、乳液、啫喱、化妆水、精华液、面膜、眼霜、气雾清洁泡、喷雾、沐浴露、或洗面奶。

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【技术保护点】

1.一种角质形成细胞丝聚蛋白基因FLG的表达促进剂，其中，所述表达促进剂是卷柏提取物，所述卷柏提取物中总糖含量≥14.99wt％，总多酚含量≥2.13wt％，和/或总黄酮含量≥4.97wt％。

2.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述卷柏提取物通过超临界流体萃取法提取得到，所述方法包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(a)包括机械粉碎至20-40目。

4.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(b)采用95体积％的乙醇。

5.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(c)还包括：CO2流量为75-85L/h，超临界萃取时间约60-120min。

6.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(c)还包括：分离釜I压力8-9MPa，分离釜I温度40-45℃；分离釜II压力6-7MPa，分离釜II温度30-35℃；分离釜III压力6-7MPa，分离釜III温度30-35℃。

7.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，步骤(d)所述低温静置为0-6℃下静置12-24小时。</p>

8.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述卷柏提取物的HPLC分析图谱的主要峰的保留时间和峰面积％包括：UV＝254nm：峰1：5.262，2.65；峰2：6.443，1.47；峰3：10.03，1.21；峰4：13.84，2.07；峰5：15.366，5.11；峰6：16.189，2.27；峰7：18.623，0.91；峰8：19.314，0.65；峰9：19.894，0.66；峰10：20.864，0.82；峰11：22.748，0.97；峰12：27.707，1.81；峰13：29.731，1.1；峰14：31.163，0.36；峰15：31.515，72.15；峰16：33.797，2.34；峰17：34.907，0.49；峰18：36.91，1.2；峰19：37.942，0.8；峰20：38.793，0.6；峰21：39.189，0.36。

9.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述表达促进剂的使用浓度至少为0.01mg/ml。

10.如权利要求9所述的表达促进剂，其中，所述表达促进剂的使用浓度为0.01-0.1mg/mL。

11.如权利要求1所述的表达促进剂，其中所述促进剂的皮肤表皮角质形成细胞丝聚蛋白基因FLG相对表达量≥133％。

12.如权利要求11所述的表达促进剂，其中所述促进剂的皮肤表皮角质形成细胞丝聚蛋白基因FLG相对表达量为133-299％。

13.如权利要求1-12中任一项所述的表达促进剂在皮肤外用剂中的应用，用于促进角质形成细胞中丝聚蛋白基因FLG的表达。

14.如权利要求13所述的应用，其中，所述皮肤外用剂选自：面霜、乳液、啫喱、化妆水、精华液、面膜、眼霜、气雾清洁泡、喷雾、沐浴露、或洗面奶。

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【技术特征摘要】

1.一种角质形成细胞丝聚蛋白基因flg的表达促进剂，其中，所述表达促进剂是卷柏提取物，所述卷柏提取物中总糖含量≥14.99wt％，总多酚含量≥2.13wt％，和/或总黄酮含量≥4.97wt％。

2.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述卷柏提取物通过超临界流体萃取法提取得到，所述方法包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(a)包括机械粉碎至20-40目。

4.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(b)采用95体积％的乙醇。

5.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(c)还包括：co2流量为75-85l/h，超临界萃取时间约60-120min。

6.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(c)还包括：分离釜i压力8-9mpa，分离釜i温度40-45℃；分离釜ii压力6-7mpa，分离釜ii温度30-35℃；分离釜iii压力6-7mpa，分离釜iii温度30-35℃。

7.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，步骤(d)所述低温静置为0-6℃下静置12-24小时。

8.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述卷柏提取物的hplc分析图谱的主要峰的保留时间和峰面积％包括：uv＝254nm：峰1：5.262，2.65；峰2：6.443，1.47；峰3：10.03，1.21；峰4：13.84，2.07；峰5：15.366，5....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈园园，殷庆飞，
申请(专利权)人：上海家化联合股份有限公司，
类型：发明
国别省市：

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