一种添加宿主成分的ETEC培养基及其培养方法技术

本发明专利技术涉及一种添加宿主成分的ETEC培养基及其培养方法。所述培养基是根据不同细菌的原生态位的不同，最大程度模拟还原其原生态位，这样培养出来的细菌更接近于自然状态，与实验室培养的细菌在形态方面会用有不同，这种不同很可能产生培养微生物的致病性、运动能力以及传播能力等生理状态的差异，从而导致实验的结果不同。本发明专利技术提供一种能最大程度还原致病菌原生态位的培养基。本发明专利技术以ETEC为例，仿造其原生态位，区别传统ETEC培养基，培养出的ETEC可以更接近于现实侵染宿主情况，因此，对其的研究也会更接近于自然情况。本发明专利技术可用于仔猪腹泻类的病害特别是原生态位下的产肠毒素大肠杆菌的病害的防控以及替抗药物的研发，具有极大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物防害有关领域，更具体地说，涉及一种添加宿主成分的etec培养基及其培养方法。

技术介绍

1、仔猪腹泻是当前国内外养殖业面临的巨大挑战之一，一旦发生腹泻，仔猪会很快消瘦，全身衰弱，迅速死亡，给养殖业带来巨大损失。多项调查显示，仔猪腹泻在我国各地的发病率有明显差异，发病率介于30％～90％，死亡率介于40％～100％，每年直接经济损失高达10亿。仔猪腹泻作为一种多因素疫病，其病因复杂，病原类型众多。多项研究证明造成仔猪腹泻最主要的致病因素是产肠毒素大肠杆菌(etec)。etec是一类分布范围广泛、在仔猪腹泻病例中检出率高、对各国养猪业都可能造成严重危害的病原微生物。多年来，国内外学者也一直致力于探究etec的致病因子和致病机理。

2、在哺乳动物的肠道中，细菌性疾病的发展的先决条件是将细菌定位到一个适合生长和发病的生态位，因此细菌的附着对于避免细菌从首选位置移动至关重要。etec通过菌毛介导附着于宿主上皮细胞，通过定植因子-菌毛粘附在小肠粘膜上，与肠道上皮细胞表面受体结合。同时分泌肠毒素，结合的毒素会增加宿主细胞环状核苷酸浓度，激本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种添加宿主成分的ETEC培养基，其特征在于，包括胰蛋白胨、酵母浸粉、微量盐、甘油、猪小肠肠道内容物研磨液和去离子水，所述猪小肠肠道内容物研磨液与去离子水的体积比为(10～90):(910～990)；胰蛋白胨与猪小肠肠道内容物研磨液的质量体积比(g/L)为1:(10～90)；所述胰蛋白胨与酵母浸粉、甘油以及微量盐的质量比(g/L)为(5～10):(1～50):5:1。

2.一种权利要求1所述添加宿主成分的ETEC培养基的制备方法，其特征在于，包括将胰蛋白胨、酵母浸粉、KH2PO4、Na2HPO4、微量盐、猪小肠肠道内容物研磨液、甘油和去离子水混合得到。

3.一...

【技术特征摘要】

1.一种添加宿主成分的etec培养基，其特征在于，包括胰蛋白胨、酵母浸粉、微量盐、甘油、猪小肠肠道内容物研磨液和去离子水，所述猪小肠肠道内容物研磨液与去离子水的体积比为(10～90):(910～990)；胰蛋白胨与猪小肠肠道内容物研磨液的质量体积比(g/l)为1:(10～90)；所述胰蛋白胨与酵母浸粉、甘油以及微量盐的质量比(g/l)为(5～10):(1～50):5:1。

2.一种权利要求1所述添加宿主成分的etec培养基的制备方法，其特征在于，包括将胰蛋白胨、酵母浸粉、kh2po4、na2hpo4、微量盐、猪小肠肠道内容物研磨液、甘油和去离子水混合得到。

3.一种添加宿主成分的etec培养基的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述添加宿主成分的etec培养基的培养方法，其特征在于，所述微量盐是mgso4、mncl2、fecl2和cacl2中的一种或多种。

5.根据权利要求3所述添加宿主成分的etec培养基的培养方法，其特征在于，步骤s1所述新鲜猪小肠肠道与去离子水按1:1比例混合；所述均质是通过拍打式均质机在转速为8000～10000rpm的条件下，均质10～15min；所述离心的时间为5m...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐永平，陈佳宁，王丽丽，孙晓雯，徐牧，张恒慧，马欣，郭玲玲，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：