一种沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量PCR检测的引物、探针及方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量PCR检测的引物、探针及方法。本发明专利技术选取沙门菌invA基因和停乳链球菌gapC基因为靶标进行引物的设计并标记探针，沙门菌和停乳链球菌的引物相互之间不会产生干扰，可以满足多重PCR的要求，能够在同一PCR体系中，同时完成沙门菌和停乳链球菌的检测，较单重的荧光定量PCR更加高效，省时省力。该检测方法具有特异性强，灵敏度高的特点，其中，沙门菌与停乳链球菌的灵敏度分别为1.56×10<supgt;3</supgt;copies/μL、1.5×10<supgt;2</supgt;copies/μL，为临床生鲜乳的检测提供了一种新的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量pcr检测的引物、探针及方法。

技术介绍

1、随着人民生活水平的提高，人们对生鲜乳的需求激增，但微生物极易在生鲜乳中生存，进而影响了生鲜乳品质。因此，提升奶源品质对人们身体健康至关重要。

2、沙门菌是一种重要的食源性致病菌，是食品安全中主要检测对象之一，其在生鲜乳中的相关报道也很多，其一般无特异性宿主，可以感染人和多种动物。停乳链球菌广泛存在于大自然中，如奶牛饮用水的水源，分泌的乳汁，以及皮肤上，其也是引起奶牛患病的常见链球菌之一，传染性强。上述病原菌严重影响养殖场奶牛的饲养，对养殖场经济效益带来了巨大威胁。因此，针对上述病原菌的高效诊断显得尤为重要。传统的检测方法一般采取细菌的分离鉴定，一般需要3-7天才能完成，耗时费力，不适用于临床快速检测。

3、因此，迫切需要建立一种快速、准确性高，适用于临床诊断的沙门菌与停乳链球菌的联合检测方法。

技术实现思路

1、针对以上技术问题，本专利技术提供一种沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量p本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量PCR检测的引物和探针组合物，其特征在于，包括：沙门菌invA基因的引物及探针；停乳链球菌gapC基因的引物及探针；

2.一种用于非诊断目的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量PCR检测的引物和探针组合物。

3.权利要求2所述的试剂盒其特征在于，还包括阴性对照、阳性对照、荧光PCR反应液和ddH2O；所述反应液包括双蒸水、PCR缓冲液、Mg2+、dNTPs和DNA聚合酶。所述阴性对照为无DNA酶的ddH2O；所述阳性对照为连接有沙门菌invA基因的质粒和/或连接有停乳链球菌gapC基因的质粒，或...

【技术特征摘要】

1.一种沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量pcr检测的引物和探针组合物，其特征在于，包括：沙门菌inva基因的引物及探针；停乳链球菌gapc基因的引物及探针；

2.一种用于非诊断目的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量pcr检测的引物和探针组合物。

3.权利要求2所述的试剂盒其特征在于，还包括阴性对照、阳性对照、荧光pcr反应液和ddh2o；所述反应液包括双蒸水、pcr缓冲液、mg2+、dntps和dna聚合酶。所述阴性对照为无dna酶的ddh2o；所述阳性对照为连接有沙门菌inva基因的质粒和/或连接有停乳链球菌gapc基因的质粒，或连接有沙门菌inva基因的质粒和停乳链球菌gapc基因的质粒。

4.一种沙门菌和停乳链球菌的双重荧光定量pcr检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：王震，张辉，郭嘉，赵天艺，王勇，周霞，孙志华，邓兴梅，刘良波，张伟，史超，刘非凡，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：