模拟折叠酶功能的小分子化合物Ｎ－烷基酰胱胺、制备方法及用于辅助蛋白质氧化复性的方法技术

本发明专利技术涉及一种模拟折叠酶功能的小分子化合物Ｎ－烷基酰胱胺、制备方法及用于辅助蛋白质氧化复性的方法；此小分子作为氧化剂使用则即使在强还原的环境下也能够促进蛋白质二硫键的形成，所以省去将强还原剂ＤＴＴ从还原变性的蛋白质溶液中除去的操作步骤，从而节省复性时间和成本；采用的模拟折叠酶功能的小分子化合物Ｎ－烷基酰胱胺可以大大提高蛋白质氧化复性的速度，同样条件下，是氧化型谷胱甘肽辅助复性速度的７至１０倍；Ｎ－烷基酰胱胺，较低浓度下就可有效地辅助蛋白质氧化复性，可以大大降低氧化剂的用量；采用的Ｎ－烷基酰胱胺可以和变性还原蛋白质所携带的强还原剂耦合形成氧化还原对，从而不需要在复性液中加入还原剂，操作简单，并降低了复性成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种模拟折叠酶功能的小分子化合物和其合成方法，及其在辅助蛋白 质氧化复性中的使用方法，属于生物技术中的蛋白质复性

技术介绍
蛋白质折叠复性不仅与人类的一些疾病相关，而且也是应用基因重组技术生产贵 重医药蛋白质的瓶颈。因此，蛋白质折叠复性技术是目前研究的热点。很多重要的医药蛋 白质都是含有二硫键的，例如人生长激素、人干扰素、肿瘤坏死因子、胰岛素、白细胞介素、 组织型纤溶酶原激活剂等。这些含二硫键蛋白质的折叠复性则是蛋白质复性中的一个巨大 挑战。这种含有二硫键的蛋白质的折叠过程被称作氧化复性，在此过程中蛋白质不但要形 成正确的三级结构，而且多个半胱氨酸残基要准确配对形成正确的二硫键。在体内，此过程 是受到氧化还原酶催化的。在真核细胞内质网上的二硫键异构酶(PDI)以及原核菌体细胞 周质中的DsbA可以有效地辅助蛋白质折叠过程中二硫键的形成。这些酶不但具有特殊的 共同序列CXXC (C，半胱氨酸；X，任何氨基酸残基)、较低的PKa值和合适的氧化还原势，而且 与变性蛋白质具有特异的相互作用。但是，直接将PDI和DsbA作为氧化剂应用于蛋白质的 氧化复性则存在价格比较本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种模拟折叠酶功能的小分子化合物Ｎ－烷基酰胱胺，其特征在于，Ｎ－烷基酰胱胺是胱胺分子中一端的氨基，通过酰胺化反应与脂肪酸的羧基偶联而形成，Ｎ－烷基酰胱胺结构形式表达如下：　　＊＊＊　　其中：Ｒ为含有４～７个碳原子的烷基链；　　上述的脂肪酸选自戊酸、己酸、庚酸和辛酸。

【技术特征摘要】
一种模拟折叠酶功能的小分子化合物N 烷基酰胱胺，其特征在于，N 烷基酰胱胺是胱胺分子中一端的氨基，通过酰胺化反应与脂肪酸的羧基偶联而形成，N 烷基酰胱胺结构形式表达如下其中R为含有4～7个碳原子的烷基链；上述的脂肪酸选自戊酸、己酸、庚酸和辛酸。FDA0000025878540000011.tif2.一种N-烷基酰胱胺的制备方法，其特征在于1)将胱胺二盐酸盐用去离子水溶解，得到0.05-lmol/L胱胺溶液后，加入含有5-8个碳 原子的脂肪酸，脂肪酸的摩尔浓度为胱胺摩尔浓度的0. 02-0. 5倍，混合后，用NaOH将其pH 调至 5. 5-6. 5 ；2)向上述制得的液体中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐固体粉 末，使固体粉末摩尔浓度为脂肪酸摩尔浓度的5-100倍；3)将上述反应体系置于15-30°C恒温水浴摇床，反应3...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙彦，王国珍，史清洪，董晓燕，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]