一种小鼠嵌合脑-电极复合体模型及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一种小鼠嵌合脑‑电极复合体模型及其构建方法。在小鼠颅骨上构建自由开合的自体颅骨窗，再移除小鼠部分大脑皮层，形成空腔，向空腔中植入自主装皮质脑类器官，还纳颅骨盖并饲养小鼠至设定时间；然后打开并移除移植部位的颅窗，在非移植部位均匀安装多个颅钉，避开毛细血管，将小鼠的硬脑膜移除，再将与信号采集系统连接的柔性电极与颅骨面垂直植入移植部位中心，并将柔性电极上的地线缠绕在多个所述颅钉上，在植入过程中，当柔性电极丝触碰到皮层表面时，记为深度值的0点，直至到达目标深度；柔性电极与信号采集系统连接，使得单个个体长时程拥有稳定的电生理信号记录。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体来说涉及一种小鼠嵌合脑-电极复合体模型及其构建方法。

技术介绍

1、人脑类器官的细胞发育轨迹和基因表达模式与人脑发育相近，并且由于其自组织特性，细胞类型丰富度以及神经网络复杂度更加接近人类正常大脑，因此是体外模拟人类大脑的先进模型。但由于长期培养过程中体积的增大以及缺乏脉管系统，脑类器官中心部分缺乏营养物质交换，导致脑类器官发育不良，仅仅能模拟发育初期的胎儿大脑。将脑类器官植入到小鼠皮层，构建脑类器官-小鼠嵌合脑模型，使得脑类器官获得小鼠的血管支持以及适宜的微环境，对脑类器官发育成熟至关重要。但是，作为外源性组织移植物，脑类器官于宿主体内发育的长时程稳定电生理检测仍有很大的技术难点。

技术实现思路

1、为了解决上述技术方案的不足，本专利技术的目的在于提供一种小鼠嵌合脑-电极复合体模型的构建方法。

2、本专利技术的另一目的在于提供一种上述构建方法构建的小鼠嵌合脑-电极复合体模型。

3、本专利技术的目的是通过下述技术方案予以实现的。

4、一种小鼠嵌合脑-本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种小鼠嵌合脑-电极复合体模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在所述步骤1中，体外构建表达绿色荧光蛋白(GFP)的自主装皮质脑类器官，包括以下步骤：将H9-GFP人胚胎干细胞于多能干细胞培养基(mTesR Plus)中进行培养，至拥有合适的细胞融合度，形成克隆形态后，使用Accutase将形成的克隆形态消化成单细胞悬液，将所述单细胞悬液中的单细胞接种在孔板中，置于神经诱导培养基培养，得到拟胚体，将拟胚体转移至另一种孔板中，置于神经分化培养基中，在水平摇床中培养至设定时间后，更换至成熟培养基中，继续旋转培养38～42天，...

【技术特征摘要】

1.一种小鼠嵌合脑-电极复合体模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在所述步骤1中，体外构建表达绿色荧光蛋白(gfp)的自主装皮质脑类器官，包括以下步骤：将h9-gfp人胚胎干细胞于多能干细胞培养基(mtesr plus)中进行培养，至拥有合适的细胞融合度，形成克隆形态后，使用accutase将形成的克隆形态消化成单细胞悬液，将所述单细胞悬液中的单细胞接种在孔板中，置于神经诱导培养基培养，得到拟胚体，将拟胚体转移至另一种孔板中，置于神经分化培养基中，在水平摇床中培养至设定时间后，更换至成熟培养基中，继续旋转培养38～...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓红，陈翀，常哲瀚，史建新，明东，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：